呕吐毒素单克隆抗体制备及鉴定

为制备一种呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)单克隆抗体(McAb),对DON进行改造,合成了半抗原,然后与载体蛋白BSA、OVA分别偶联合成偶联抗原DON-BSA、DON-OVA,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法和紫外分析法对合成的偶联抗原进行鉴定。然后用DON-BSA作为免疫抗原,DON-OVA作为检测抗原免疫小鼠制备抗DON的单克隆抗体。结果所得单克隆抗体为IgG1亚型,分子质量为158ku,抗体标准曲线IC50值为1.7μg/L,与T2毒素、黄曲霉毒素B1几乎没有交叉反应,筛选到的单克隆抗体可用于研制DON酶联免疫检测产品。     

ELISA与LC-MS/MS检测喹诺酮类药物残留的比较

分别采用间接竞争酶联免疫法(ELI SA)与液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法对罗非鱼肉中喹诺酮类药物残留量进行检测,对得出的检测结果进行比较分析。结果显示:ELISA方法样本添加回收率在73.4%～89.5%之间,变异系数在5.6%～14.3%之间,检测时间为45mi n,适合于罗非鱼肉中喹诺酮类药物残留的快速筛选;LC-MS/MS方法,样本添加回收率为77.1%～85.7%,变异系数在5.5%～11.2%之间,检测结果准确,变异系数较小,但检测费用较高,适用于喹诺酮类药物残留的确证。     

喹乙醇代谢物残留ELISA试剂盒检测方法的建立

通过间接竞争ELISA反应检测鸡肉、猪肉、鱼肉、虾肉、鸡肝以及猪肝中MQCA的残留量,标准曲线IC50值为3.8μg/L,线性范围为1.0~81.0μg/L,对鸡肉、猪肉、鱼肉、虾肉、鸡肝、猪肝样本的检测限在1.65~1.89μg/kg,样品添加回收率均在79.0%~93.7%,批内变异系数小于15%。该方法的建立,为快速检验试剂盒的研究奠定了基础。     

黄曲霉毒素B1残留ELISA试剂盒的研制及应用

本研究采用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)检测黄曲霉毒素B₁(aflatoxins B₁,AFB₁)残留量。将AFB₁与蛋白质载体牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备了AFB₁-BSA和AFB₁-OVA偶联物,以AFB₁-BSA作为免疫原制备特异性抗体,并成功建立了AFB₁残留间接竞争ELISA检测方法及检测试剂盒。试剂盒IC₅₀为128.8 ng/L,检测线性范围为50~1800 ng/L,检测限不超过100 ng/kg;食用油、花生和谷物的平均添加回收率大于71.3%,批内、批间变异系数均小于14.2%。因此,本试剂盒具有操作简便、检测快速、灵敏度高等特点,将在植物性食品中AFB₁的残留检测中发挥重要作用。