奶牛生物钟基因BMAL1真核表达载体的构建及生物信息学分析

本研究旨在克隆奶牛脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1基因（Brain and Muscle Arnt-Like Protein 1,BMAL1）的蛋白编码序列（Coding Sequence,CDS）并构建其真核表达载体,运用生物信息学方法解析其CDS序列和编码蛋白特性。以牛肝脏组织为材料,利用PCR技术扩增奶牛BMAL1基因中带有同源臂的CDS片段。采用同源重组法,将目的片段连接至酶切线性化的pc DNA3.1-Puro-N-3HA真核表达载体上,酶切及测序结果均符合预期的质粒命名为pc DNA3.1-3HA-c BMAL1。将空载与重组质粒分别转染至HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR技术（q PCR）和Western Blotting技术检验奶牛BMAL1基因的过表达效果,并利用生物信息学软件分析BMAL1基因CDS区及其编码蛋白的特性和功能。结果显示,pc DNA3.1-3HA-c BMAL1真核表达载体构建成功,将该质粒转染至HEK293T细胞后,成功实现了BMAL1在m RNA和蛋白水平的过表达;牛BAML1基因与绵羊、山羊同源性最高,BMAL1蛋白为不稳定蛋白,其上不存在...     

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响

旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P<0.01),24 h后CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05);qRT-PCR检测IRE1和XBP-1的mRNA表达量在24 h均显著升高(P<0.05),而PERK、ATF6和ATF4 mRNA的表达未发生显著变化(P>0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P<0.01);VceC转染...     

粳型光敏核不育系与常规粳稻杂交后代育性的遗传分析

在分析粳型光敏核不育系与粳稻品种杂交组合F_3及以后世代部分株系的育性和基因型的基础上,对分离世代各种主基因型的育性及频率分布进行了估计,验证了根据F_1、F_2和BF_1代作出的水稻光敏核不育性及其育性恢复的遗传涉及核内2对独立的主基因的遗传结论。由F_6以上高世代株系中测选出对农垦58s恢复效应有明显差异的两种纯合单显性可育株系,获得了存在两个不同恢复基因的遗传证据。     

桂郁金优良种质的筛选

\[目的\]通过产量及化学成分分析,建立桂郁金优良种质筛选标准,优选桂郁金种质资源,提高桂郁金育种优势。\[方法\]参考2015版《中国药典》要求对桂郁金产量进行测定,采用挥发油测定法对桂郁金挥发油进行提取以及GC-MS法分析,利用HPLC法对桂郁金姜黄素类成分（姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素）进行含量测定,根据药用植物良种选育标准,确立更加严格的桂郁金优良种质筛选标准。\[结果\]50份不同种质的桂郁金无论在产量还是化学成分（挥发油及姜黄素类）方面均存在着显著的差异性,根据桂郁金优良种质筛选标准,共筛选出了C104、C16、A81等9个优良种质,其中C104为最优良种质。\[结论\]研究建立的优良种质筛选标准能够筛选出高产优质的桂郁金种质,这将有助于桂郁金良种繁育及后续药理学方面的研究。     

红叶樱花嫁接繁育技术

本文总结了红叶樱花嫁接繁育技术,包括苗圃地选择、砧木苗培育、苗木嫁接、嫁接后管理和苗木出圃等方面内容,以期为红叶樱花种植者提供参考。     

猪伪狂犬病的诊治

近来,猪伪狂犬病在各地养猪场中发生较多,病猪的年龄不同,其临床表现也不一样。仔猪以呈现神经症状为主,成年猪多为隐性感染,妊娠母猪常发生流产,各龄病猪不出现剧痒症状,多发生于仔猪和妊娠母猪。     

猪气喘病的诊疗和综合防制

猪气喘病是由支原体感染引起的接触性慢性传染病,它的分布很广,发病率较高,如无继发感染致死率较低。1 发病情况2005年12月份,公主岭市某猪场养400头猪,部分圈舍的猪出现以咳、喘为主,但呈间歇性,且体温正常,食欲正常,刚开始都没被重视,病程长的表现为呼吸困难,呼吸频率增加,呈现腹式呼吸,个别食欲稍减,后期体重逐渐消瘦。2 临床症状以育肥猪为例,发病猪只于清晨睡醒及进食后较易发生咳嗽,晚间由于环境安静,咳嗽声也较明显,一般不会出现呼吸困难的现象,但经过寒冷的袭击,天气突然变化,病情突然加重,呼吸困难,     

如何控制高热病及其继发感染

近年来,一些地区的猪场持续发生以高热症状为主,呈稽留热或反复发热的病猪;一部分伴有呼吸道症状,皮肤发红或者有出血斑点,主要在6～9月份流行。笔者认为主要与猪流感、蓝耳病、伪狂犬、猪瘟继发链球菌、附红细胞体、胸膜肺炎等有关,建议采取以下措施。     

DHI酮病模块监测奶牛酮病的研究

奶牛酮病是危害奶牛健康的主要代谢性疾病之一,通过测定牛乳中丙酮和β-羟丁酸的含量可以对奶牛健康状况进行评估和筛查.对云南4家DHI参测牧场的酮体测定数据进行分析.根据Foss公司推荐的判断标准,4个牧场亚临床酮病平均发生率为6.1％,范围在3.3％～9.4％,临床型酮病发生率为0.7％,范围在0.4％～1.8％.Ⅰ牧场...     

2018年临清小麦白穗发病原因及对策分析

临清市地处鲁西北平原,种植作物以小麦、玉米为主,小麦常年种植面积50 000 ha 左右。2018 年,临清市小麦白穗现象比较普遍,70%以上麦田发病,一般病株率8%~15%,严重田块达到30%以上,造成比较严重的减产。根据症状判断白穗主要由小麦茎腐病、根腐病、纹枯病、全蚀病以及小麦赤霉病引起。