双水相体系萃取油楠种子总皂苷的研究

利用双水相萃取技术提取分离油楠种子中的总皂苷,以乙醇/硫酸铵为双水相萃取体系,研究乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、p H值、温度等因素对萃取效果的影响。结果表明:在乙醇质量分数为30%,硫酸铵质量分数为20%,p H6.0,温度为30℃的萃取条件下,油楠总皂苷在两相的分配系数为12.60,回收率为94.8%。该方法可用于油楠种子中总皂苷的提取分离。     

农村基层党组织“领头雁”队伍建设问题研究

办好农村的事情,关键在于建设一支坚强有力的农村基层党组织"领头雁"队伍,这既是中国革命、建设和中国特色社会主义成功实践的经验总结,也是巩固党在农村执政地位、应对农村社会治理转型所带来的挑战、也是建设社会主义新农村,农村全面建成小康社会的迫切要求。当前,一些农村基层党组织"领头雁"队伍普遍存在着理想信念淡化、结构不合理、素质不高、能力不强、积极性不高、自我要求不严、消极腐败突出等问题。究其原因,主要是素质能力提升渠道缺失、农村青年要求入党的少与入党难并存、激励与保障程度低与对权利的制约和监督不够。而要解决这一问题,就必须要构建起包括以坚定理想信念为核心的思想教育、"雁苗"成长培育、"领头雁"队伍选聘、能力提升、必要的激励保障以及执行能力建设在内的长效机制。     

肝片吸虫CatB4蛋白分子特征及其免疫原性分析

[目的]明确肝片吸虫组织蛋白酶B4(CatB4)的分子特征及其免疫原性,为研究肝片吸虫CatB4蛋白的生物学特性及揭示其致病机理提供科学依据.[方法]通过RT-PCR扩增肝片吸虫CatB4基因,利用在线分子生物信息学软件对CatB4基因及其编码蛋白进行分子特征分析;构建原核表达载体pET-CatB4,经IPTG诱导获得融合蛋白后进行SDS-PAGE和Western blotting检测分析;并以融合蛋白CatB4免疫小鼠制备多克隆抗体,利用免疫组化对融合蛋白在肝片吸虫体内的表达进行定位分析.[结果]肝片吸虫CatB4基因片段为699 bp,其编码蛋白等电点(pI)7.95,理论分子质量25.89 kD,无信号肽和跨膜区,属于非分泌性蛋白;CatB4蛋白存在10个潜在的磷酸化位点、2个N-糖基化位点和7个N-肉豆蔻酰化位点,有9个抗原决定簇,具有高度保守的CatB结构域,是由无规则卷曲连接9个α-螺旋和8个β-折叠构成其空间结构.基于CatB4基因核苷酸序列同源性构建的系统发育进化树显示,肝片吸虫和大片吸虫聚为一支,二者的同源性为83.98%.SDS-PAGE检测和Western blotting分析结果均显示在41.80 kD处能检测到目的条带.以纯化融合蛋白CatB4与弗氏佐剂乳化后免疫的小鼠均可产生特异性抗体,证实融合蛋白CatB4具有较强的免疫原性;免疫组化定位分析结果显示,在肝片吸虫的卵黄腺腺体细胞、排泄管上皮细胞、肠道上皮细胞和卵黄腺管上皮细胞均发生特异性的抗原抗体反应,呈深棕色.[结论]诱导表达获得的融合蛋白CatB4可特异性识别绵羊肝片吸虫阳性血清,具有较强的免疫原性,且主要在肝片吸虫分泌排泄组织器官中表达,说明CatB4蛋白具有作为肝片吸虫候选抗原的潜力.     

大葱RAPD反应体系的优化

研究了大葱基因组DNA的提取方法,并对Mg2 浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶用量进行了优化,建立了RAPD最佳反应体系,即20μl反应体系中10×Buffer缓冲液2μl,Mg2 浓度2.5 mmol/L,dNTPs浓度0.22 mmol/L,引物浓度0.65μmol/L,Taq酶1 U(2.5 U/μl),模板DNA 60 ng,用灭菌超纯水补足20μl。扩增程序为:94℃预变性3 m in;94℃变性40 s,38℃退火45 s,72℃延伸1 m in,40个循环;最后72℃延伸10 m in。     

巨型艾美球虫株间差异表达基因消减文库的构建和分析

为分离鉴定巨型艾美球虫上海株与南通株间免疫原性的差异表达基因,分别以巨型艾美球虫上海株孢子囊cDNA为驱动组,以南通株孢子囊cDNA为试验组,或相反,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过2轮杂交和2次PCR分别构建了2个抑制性消减文库.随机从2个消减文库中分别挑取96个克隆产物,经PCR鉴定上海株和南通株孢子囊消减文库的重组率分别为91%和94%,差异基因片段大小为250～1 000 bp.从每个文库中随机挑取30个阳性克隆测序,并进行同源性比较分析,结果表明:从上海株cDNA消减文库中获得了19个单一有效序列,其中15个为未知序列;从南通株cDNA消减文库中获得了16个单一有效序列,其中13个为未知序列.这些结果将为分离巨型艾美球虫新功能基因和进一步探索球虫抗原变异相关的分子机理奠定基础.     

25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂防治温室白粉虱的田间药效试验

为了明确25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂对温室白粉虱的防治效果,2013年以常用药剂25％噻虫嗪水分散粒剂和5％高效氯氟氰菊酯微乳剂为药剂对照,在夏春秋甘蓝上测定了25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂2500倍液、2000倍液和1500倍液对温室白粉虱的田间防治效果。结果表明：在试验剂量条件下,25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂对温室白粉虱具有较好的防治效果,且持效期长,对温室白粉虱的天敌种类和数量以及甘蓝生长等均无不良影响。其中,施用1500倍液防效最好,试验期内的防效始终＞药剂对照,施药后第7 d防效为86.97％;施用2000倍液防效次之,除施药后第1 d外,其他时段的防效均＞药剂对照且与施用1500倍液防效差异不显著。生产上推荐25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂施用浓度为2000～1500倍液,折合有效成分用量为93.75～112.5 g/hm2。     

室外人工种植抱茎独行菜种子破除休眠的初步研究

[目的]初步探索室外种植的抱茎独行菜(Lepidium perfoliatum L.)种子破除休眠的方法,为深入研究其种子粘液质特性和农业栽培、开发抱茎独行菜这种优质牧草提供丰富的物质基础.[方法]以室内种植的抱茎独行菜种子为材料,采用不同化学和物理方法处理其种子,测定其种子的萌发率.[结果](1)4℃、CA<,3>、H<,2>O<,2>单独处理以及GA<,3>与H<,2>O<,2>组合处理均可打破抱茎独行菜种子的休眠;(2)GA<,3>与H<,2>O<,2>共同处理效果最好,其中以500 mg/LGA<,3>处理3 d后15;H<,2>O<,2>处理20 min的种子萌发率最高,可高达94.44;.[结论]推测造成室内种植的抱茎独行菜种子休眠的可能原因是种胚的活力不够,从而使得其种子在萌发过程中不能有效挣脱种皮的机械束缚从而导致休眠.     

影响森林火灾发生规律的因子分析

森林火灾作为森林生态系统重要的干扰因子,对森林生态系统物质循环和能量流动产生重要影响.科学有效地加强对森林火灾发生规律的研究具有重要的意义.文章对我国森林火灾发生与环境因子的关系进行了评述,总结了我国森林火灾发生的规律性,同时指出了现有研究存在的问题,并对未来的研究方向进行了展望.     

植物功能型及其划分方法

综述了植物功能型（plant functional types,PFTs）的概念、发展历史、研究意义以及现有的植物功能型划分方法．分析了目前植物功能型研究中所面临的几大难题,对现有的划分方法进行了分析和评价,以期为国内研究者在本领域进一步开展实验提供参考．最后以McIntyre ＆ Lavorel的五步研究方法为基础在四川西部卧龙自然保护区亚高山暗针叶林进行了实例研究．结果根据物种对林窗微环境的响应将林窗中的物种划分为2个PFTs：无响应群和敏感群．划分结果与物种本身对光湿条件的需求基本吻合．证明能够用该方法进行卧龙亚高山森林植物功能型的划分研究,     

酶法提取猕猴桃皮和渣中果胶的工艺研究

[目的]去除猕猴桃皮和渣中的淀粉和蛋白质,提取并制备膳食食用果胶。[方法]通过单因素和正交试验设计,分别确定0.4%淀粉酶和0.4%胰蛋白酶提取猕猴桃皮和渣中果胶的适宜工艺条件。[结果]0.4%淀粉酶可有效去除猕猴桃皮和渣中的淀粉,其适宜工艺条件为：料液比1∶10.0,50℃下酶解60 min;0.4%胰蛋白酶可有效去除猕猴桃皮和渣中的蛋白质,其适宜工艺条件为：料液比1∶10.0,35℃下酶解60 min。在最佳工艺条件下,经离心、浓缩得到果胶,其中猕猴桃皮和渣中的果胶得率分别为3.10%和1.39%。[结论]通过改良酶法,建立了猕猴桃皮和渣中果胶提取的适宜工艺。