美人指葡萄不定芽离体诱导再生植株的研究

6-BA、TDZ与IBA不同浓度组合对美人指葡萄叶片、叶柄和茎段不定芽离体器官发生途径诱导再生植株有不同的影响。以茎段为外植体在MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L培养基上分化效果最好,再生率75.00%;叶片、叶柄分别在MS+6-BA3.0mg/L+IBA0.10mg/L和MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.05mg/L培养基上分化效果较好。TDZ和IBA研究的几种组合都能诱导不定芽再生,但再生率不高。     

蓝浆果农杆菌介导法基因转化条件研究

以蓝浆果品种蓝丰的叶片为转化受体,通过对农杆菌侵染时间、共培养时间、外植体暗培养时间、卡那霉素(Km)选择压以及头孢霉素(Cef)浓度等因素研究,确定转化的最佳试验参数.试验结果:农杆菌侵染5 min,共培养4 d,暗处理21 d时gus基因瞬时表达率最高;在筛选初期添加Km 20 mg/L、Cef 250 mg/L,既能得到不定芽,又达到筛选的目的.利用GUS组织化学染色、PCR扩增方法对蓝浆果的Km抗性植株进行检测,初步证实AtNHX1基因已经整合到2株蓝丰株系基因组中.     

葡萄全基因组SSR分析和数据库构建

利用Perl语言开发了用于探寻基因组SSR的程序SSRFinder,并利用其从法国国家基因测序中心(Genoscope)公布的欧亚种葡萄(Vitis vinifera L.)黑比诺品系PN40024的基因组序列中检索到114 520个SSR.其中含单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸重复单元的SSR数目分别为37 648(329%)、30 123(263%)、18 705(163%)、14 566(127%)、3 492(30%)和9 986(87%)个.在各类SSR中,不同核苷酸组成的重复单元频率间存在较大的差异,其中富含A/T重复单元的SSR频率最高,而富含C/G重复单元的SSR频率最低.SSR在基因组上主要分布在基因间隔区,其次是基因的非翻译区,在编码区的分布密度最小.三核苷酸和六核苷酸SSR在翻译区的分布密度明显高于其他类型的SSR.利用这些SSR序列共设计出80 065(699%)对SSR引物.另外,本研究开发了一个基于Web界面的SSR数据库DGSSR,收录和注释全基因组与EST的SSR,并提供了查询界面,网址为http://wwwyaolabshcn/ssr.     

赤霉素与吡效隆对翠峰葡萄无核化处理果实发育的影响

以翠峰葡萄为材料,采用1次处理或2次处理方式,用不同浓度GA3和CPPU对翠峰葡萄进行无核化处理。结果表明,GA3和CPPU不同浓度、不同处理方式,对翠峰葡萄的无核化和果实发育影响效果不同。2次处理比1次处理更有利于翠峰葡萄产生无核果。1次处理以花前1周25 mg/L GA3 5 mg/L CPPU处理最好,无核率可达82.5%;2次处理的花前1周GA312.5、25 mg/L处理的无核率高达100.0%。但从单果重、可溶性固形物综合考虑,以花前1周GA312.5 mg/L处理1次,盛花后2周GA325 mg/L CPPU5 mg/L再处理1次效果为佳,单果重达19.5 g,是对照的253.2%,可溶性固形物为17.68,是对照的120.3%。与对照相比,1次处理的翠峰葡萄的果形指数有变小的趋势,而2次处理的果形指数有变大的趋势。     

转基因苹果组培苗铁蛋白基因在转录水平上的表达

以转菜豆铁蛋白基因的嘎拉苹果4个株系的试管苗为材料,通过定量RT-PCR的方法检测外源和内源铁蛋白基因的转录表达量,结果表明苹果转基因植株外源铁蛋白基因的转录表达量与其插入的拷贝数没有明显的关系,可能受插入位点的影响;同时在铁诱导的条件下,外源铁蛋白基因与内源的铁蛋白基因的转录表达特性一致,转录水平受铁的调控,随着铁诱导时间的延长,其mRNA表达水平逐渐增加。对转基因植株的根、茎、叶3个部位铁蛋白基因的转录表达量研究结果表明,外源菜豆铁蛋白基因与内源苹果铁蛋白基因的mRNA含量均在根部最高,茎次之,叶片最低。     

GA3和CPPU对维纳斯葡萄果实生长的影响

维纳斯 (Ｖｅｎｕｓ) ,为欧美杂种无核葡萄品种。自引种我国以来 ,表现出成熟早、着色好、适应性强等优点 ,在我国南方地区具有很好的发展前景。但由于其果粒偏小 (一般 3ｇ左右 ) ,使其商品性和规模发展受到限制。ＧＡ3和ＣＰＰＵ在多种无核葡萄品种果实的大粒化上有较为广泛的应用 ,本文拟通过试验找到用ＧＡ3和ＣＰＰＵ对维纳斯葡萄进行处理的最佳方案。1　材料与方法1 1　材料　试验在南京农业大学牌楼果园葡萄品种园进行。维纳斯葡萄树势中上 ,篱棚架 ,株行距2ｍ× 3ｍ。选择长势相近的植株和果穗作为试材。1 2　方法　设 7个处理 :Ａ …     

设施栽培中限根对油桃幼树叶片叶绿素含量、叶干重变化的影响

研究了设施栽培中限根对沪油018幼树叶片叶绿素含量、叶片干重的变化特点。结果表明:(1)限根幼树在秋季枝条停长后, 不同限根处理第1～8叶位叶片叶绿素含量均表现为“升—降—升”；相同叶位处理TR2各个叶位单位叶面积叶绿素含量均低于CK和TR1,CK仅在第1、8叶位较TR1高,而其它叶位均低于TR1。(2)测定盛花后19～262d树冠外围枝中部完全展开功能叶的叶绿素变化动态,结果不同限根处理Chla、总叶绿素含量与Chl(a/b)的变化均表现“降—升—降”的变化规律。限根对Chlb的季节变化进程的影响差异明显。(3)不同限根处理下比叶重的季节变化差异明显,但总的呈上升趋势。叶片干重含水量%的季节变化总的呈下降趋势,不同限根处理间的变化动态差异明显。     

蓝浆果的组织培养及离体微繁技术研究

蓝浆果具有很高的保健功能,是目前世界上最重要的小果类果树之一。以5个北高丛蓝浆果品种和1个兔眼蓝浆果品种为试材,取成熟的蓝浆果单芽切段及幼嫩叶片为外植体,在添加各种激素的改良1/2MS培养基上培养,筛选蓝浆果离体增殖和生根培养基。试验结果表明,兔眼蓝浆果品种粉蓝在添加3 mg/L ZT的改良1/2MS培养基上初代培养后诱导出大量新生枝,北高丛蓝浆果蓝丰和伯克利在分别添加了5、10 mg/L Z-ip的改良1/2MS培养基上继代培养5周后,增殖率均可达40~50倍;在改良1/2MS 0.1 mg/L IBA的生根培养基上生根培养3个月后,蓝浆果的生根率可达100%。     

不同葡萄砧木对矢富罗莎嫁接苗根系形态变化的影响

在不同品种的葡萄砧木上嫁接矢富罗莎,对1年生苗根系的根长、平均直径、不同直径范围内的根长、表面积、总体积、根尖数、根叉点等进行了比较。结果表明,不同砧木的矢富罗莎嫁接苗根系生长状况存在明显差异,根系总长度以110R砧木最长,达6 842.8 cm,为对照(扦插苗)的372%;根系平均直径以巨峰和1202砧木较大,分别为1.734 4 mm和1.632 1 mm;110R和5BB砧木根系的表面积较大,达到2 603.8 cm2和2 056.6 cm2,而华佳8号和对照根系表面积较小;根系体积以110R、5BB和8B砧木的较大;根叉数、根尖条数和根尖点数以110R为砧木的植株显著高于其他砧木品种的组合,分别为对照的320.5%、359.8%和328.0%。几个不同砧木葡萄品种嫁接矢富罗莎后1年生苗根系的生长量以110R、5BB和8B较大,而华佳8号和对照较小。根系的生长量也影响地上部的生长。     

果树基因转化技术的选用和转基因植株的鉴定与性状分析

 植物基因工程为果树育种开辟了一条新途径,在果树重要性状遗传改良方面具有重要意义。果树转基因是一个复杂而长期的工作,包括从对外源基因功能的全面认识、高效表达载体的构建、基因转化、以及转基因植株的鉴定与性状观测等多个重要环节。应该说,每一个环节甚至每一实验步骤都需严格把握。迄今,鉴于已经有大量果树再生体系成功建立的报道,笔者在总结实际研究经验的基础上,结合文献的报道,有针对性地对果树基因转化技术和转基因植株的鉴定与性状分析进行简要介绍,为果树基因转化技术的选用,以及进行高效转基因植株的鉴定与性状分析提供一定的参考。