葡萄MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析

MADS-box转录因子在多种植物的发育过程特别是花器官和果实发育过程中发挥重要的作用。为了从葡萄中克隆出新的MADS-box基因,研究在葡萄花及果实发育中的作用,根据多种植物MADS-box基因保守区序列,设计简并引物,应用RT-PCR技术从红富士葡萄花序中分离出34条MADS-box基因cDNA片段。序列分析表明,这些片段长度在138～152bp之间,包含基因起始密码子。推导的氨基酸序列与已登录的欧洲葡萄及其它物种的MADS-box基因同源性超过83%。用推导的氨基酸序列与已知的欧洲葡萄和拟南芥MADS-box家族基因进行系统发育分析,可将这些基因片段分别归入拟南芥MADS-box基因不同亚家族中,证明葡萄中存在多种MADS-box家族基因,克隆的片段包含ABCDE模型中的各类花发育基因。     

葡萄砧木‘5BB’PGIP基因的克隆及生物信息学分析

以葡萄砧木品种‘5BB’(Vitis berlandieri×V.riparia)为试材,通过设计特异引物、PCR扩增,从‘5BB’基因组中得到1条全长1002 bp的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PG IP)基因序列,该序列包含1个完整的开放阅读框,与欧洲葡萄、其它果树的相应序列同源性分别为99%和68%,其推导的蛋白质序列中包含一段亮氨酸重复序列,第1~27个氨基酸残基是信号肽,三级结构与菜豆PG IP相似。     

美人指葡萄再生体系的建立

以美人指葡萄为试材,研究了不同外植体类型、激素浓度配比以及暗培养时间等对器官再生的影响。结果表明:叶片、叶柄、茎段外植体均可再生出不定芽,其中叶柄的再生率最高;TDZ对美人指葡萄叶柄再生效果比6-BA好,IBA诱导美人指葡萄叶柄不定芽再生率高于NAA和2,4-D;暗培养3周时,美人指葡萄叶柄的再生率最高。叶片再生的最适培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA,再生率为60.71%,增殖系数为5.65;叶柄再生的最适培养基为:MS+1.0mg/LTDZ+0.1 mg/L IBA,再生率为93.10%,增殖系数为5.91;茎段再生的最适培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,再生率为47.37%,增殖系数为5.00。将再生不定芽置于3/4 MS+0.35 mg/L IBA培养基上诱导生根,完整植株培养35~50 d后炼苗移栽,成活率可达90%。     

赤霉素对魏可葡萄果穗及果实生长的影响

以魏可葡萄为试材,于开花前13~22 d,使用不同浓度(3、5、7.5 mg/L)赤霉素处理,结合盛花期25 mg/L GA3和花后两周25 mg/L GA3+5 mg/L CPPU处理。研究了不同赤霉素处理对魏可葡萄花穗长度、果实小穗节间长度、无核率和果实品质的影响。结果表明,在花前13~22 d的12组处理中,花前16 d 7.5 mg/L GA3结合盛花期25 mg/L GA3,花后两周25mg/L GA3+5 mg/L CPPU的处理果穗拉长效果最为显著,其果实小穗节间长度增长为对照的128.81%。使用不同赤霉素处理提高了魏可葡萄的无核率,使魏可果形变长,此外,还增加了果实可滴定酸含量,降低了可溶性固形物含量。     

葡萄雌能花相关基因VvMS2的克隆及表达分析

【目的】从欧亚种葡萄‘魏可’和‘钟山红’的花中分离出VvMS2基因,为研究葡萄雌能花形成的分子机理和分子育种奠定基础。【方法】在NCBI中寻找与拟南芥雄性不育基因MS2同源性最高的葡萄序列（CBI29968）,设计特异引物进行克隆测序,通过生物信息学方法分析结构特征,利用实时荧光定量RT-PCR技术研究其在‘魏可’各组织中及‘魏可’和‘钟山红’雄蕊发育不同时期中的表达特性。【结果】VvMS2基因cDNA编码区全长为1 755 bp,编码584个氨基酸,含有NAD结合域和雄性不育C-末端区域。VvMS2对应基因组DNA全长2 776 bp,含有9个外显子和8个内含子。基因编码蛋白质分子量为64.74 kD,等电点为8.84。该基因与GenBank中其它来源的MS2蛋白序列的相似性为40%—71%。VvMS2为花蕾特异表达基因,且仅在花粉发育四分体期到二核期有表达,单核期‘魏可’的表达量显著高于同时期‘钟山红’。【结论】推测该基因异常表达与‘钟山红’葡萄雌能花形成有关。     

优质晚熟葡萄新品种‘钟山红’

‘钟山红’葡萄是从‘魏可’实生系中选育而成的晚熟新品种。2011年11月通过江苏省农作物品种审定委员会审定。1品种特征特性欧亚种。植株生长势强,芽眼萌发率为80%～95%。结果枝占芽眼总数80%以上。每果枝平均着生果穗数为1.8个。结实力强,丰产。副芽结实力较强,副梢结实力强,     

阳光玫瑰葡萄WH树形枝条垂化处理对叶片光合特性及果实品质的影响

【目的】确定阳光玫瑰葡萄WH树形枝条下垂的合理方案,为其优质栽培奠定基础。【方法】以避雨栽培的阳光玫瑰葡萄为试材,对采取WH形树形栽培的葡萄枝条进行5种处理：距离主蔓30、60、90、120 cm拉枝下垂和水平生长(对照处理,CK),研究不同处理对枝条副梢生长速度、卷须生长速度、叶幕光合能力、叶片绿素含量、果实品质等指标的影响。【结果】与对照相比,不同垂化处理枝条的副梢和卷须生长量下降,叶绿素含量减少,叶幕不同节位的光合特性发生变化,光合能力有所下降,果实的纵、横径增大,可溶性固形物含量增加,着色程度有所提高。其中距离主蔓90 cm拉枝下垂结果最好,减少副梢和卷须18%～30%的生长量,叶片净光合效率可达13.2μmol·m^-2·s^-1,单果质量13.95 g,可溶性固形物含量(w)达18.36%。【结论】距离主蔓90 cm拉枝下垂的改良WH形树形,能够保证阳光玫瑰葡萄果实品质和光合能力,并且方便省力化管理,更适合阳光玫瑰葡萄的生产。     

极早熟杏李红天鹅绒引种试验初报

极早熟李红天鹅绒是杏李新品种，1999年引入镇江象山果树所，经高接观察，现已结果二年，平均株产4．5kg。果实外观艳丽，果大，风味佳。从盛花到果实采收为58—62d，比日本大石早生李早15d左右，是目前引入国外李中最早熟的新品种。     

早熟梨若光在南京的表现及栽培技术要点

若光梨是日本千叶县农业试验场育成的早熟品种,亲本为新水×丰水,日本农林水产省于1992年1月16日正式登录,登录号为第3006号。南京农业大学园艺学院于1999年9月从日本引入该品种。南京农林园艺技术推广站与南京农业大学园艺学院等单位合作承担江苏省农林厅三项工程项目,2002年试种在南京市级果树良种示范园内。经过5年的观察,该品种表现出早熟、果实大、品质优等特点,是综合性状优良的早熟品种。     

基于SSR分子标记的安徽黄山地区野生刺葡萄的遗传多样性分析

利用8对SSR分子标记引物分析了安徽黄山地区40份野生刺葡萄资源的遗传多样性,结果表明:8对SSR引物扩增的等位基因数(Na)为36个,每个引物扩增等位基因数(Na)为2～10个,有效等位基因数(Ne)为1.285～5.378个;观测杂合度(Ho)为0.250～0.775,期望杂合度(He)为0.224～0.824;Nei’s多样性指数(H)为0.222～0.814;香农多样性指数(I)为0.417～1.884;多态性信息含量(PIC)为0.202～0.789。依据地理位置将黄山地区刺葡萄资源分为3个群体(POP1,POP2,POP3),3个群体之间遗传相似度为0.829～0.912,遗传距离为0.093～0.188,表明黄山地区刺葡萄资源的遗传差异较少。通过UPGMA方法对黄山地区40份刺葡萄和湖南、福建的3份刺葡萄进行聚类,在遗传相似系数为0.62时,黄山地区刺葡萄聚为一类,湖南、福建的刺葡萄聚为一类。这些结果表明,刺葡萄的基因流限制于短距离,黄山地区刺葡萄主要以有性繁殖为主。