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为了建立体细胞重编程过程中检测Sox2基因表达变化的方法,本研究利用克隆获得的小鼠Sox2基因与逆转录病毒载体pMX—IRES—GFP连接,构建带有报告基因GFP的逆转录病毒载体,将其转染293GP细胞后获得假病毒上清。将获得假病毒上清侵染小鼠成纤维细胞(NIH3T3细胞)后观察GFP的表达和检测Sox2转录量的变化。其结果,成功构建带有GFP的Sox2基因逆转录病毒载体pMX—Sox2-IRES—GFP;将构建的载体转染后293细胞后获得能侵染NIH3T3细胞的假病毒上清,且与未侵染的NIH3T3细胞相比,侵染后的NIH3T3细胞的Sox2表达量提高近10倍。本研究为开展在体细胞重编程过程中Sox2表达与重编程效率的相关性提供依据. 相似文献
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草鱼(Ctenopharyngodon idellus),属鲤科、雅罗鱼亚科、草鱼属,俗称草鲩、草根(东北),是我国著名的“四大家鱼”之一,深受人们的青睐.但是在养殖过程中容易感染疾病.大量使用抗生素和化学药品,在动物体内造成残留,影响和恶化产品质量,严重危害人体健康.而中药具有天然、高效、毒副作用小、抗药性不显著、资源丰富以及性能多样等优点[1].鉴于中药以上的优点,中药在水产动物疾病防治中的潜在作用引起人们广泛关注.然而,由于目前研究的局限性,使得实际生产中存在忽视某些中药毒性、盲目使用甚至乱用现象.因而时常发生因对中药的毒性不明、浓度使用不当而造成鱼类中毒的情况.本试验在前期已筛选出具有较好促生长和免疫增强效果的中药免疫增强剂Ⅱ基础上,研究了中药免疫增强剂Ⅱ对草鱼急性毒性的影响,为草鱼的健康养殖和病害防治提供理论参考. 相似文献
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【目的】调查柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)和病毒病在广东省梅州市柑橘主产区的危害情况,分析该地区柑橘黄龙病菌(CLas)的原噬菌体多样性。【方法】以16S rDNA为模板设计引物,利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测梅州市不同抽检地在2017—2019年3年间柑橘黄龙病的发病情况;同时分别采用已报道的柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)、柑橘裂皮病毒(Citrus exocortis viroid,CEVd)、柑橘褪绿矮缩病毒(Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDa V)、柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)和柑橘黄脉病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)的特异性检测引物,提取样品的RNA,反转后以样品的c DNA为模板,通过普通PCR的方法分析梅州市抽检地区柑橘病毒病的发生情况。此外,以基于2种原噬菌体类型(SC1和SC2)对应的超变异基因区域设计的2对引物(Lap-TJ-F/Lap-TJ-R1和La... 相似文献