吐鲁番地区葡萄节水灌溉技术现状调查及建议

调查吐鲁番地区葡萄节水滴灌的现状,提出改进葡萄节水滴灌技术的措施。     

浅谈公共秩序保留制度在我国的适用

公共秩序保留制度是国际司法中的一项重要制度,但近年来国际上却有限制公共秩序保留制度的发展趋势.公共秩序在排除外国法适用,保护本国利益方面起到了至关重要的作用,我国应该不断完善公共秩序保留制度的立法,维护国家的公共利益,并促进国际民商事关系的良性发展.     

鸡B-F2基因真核表达系统的建立与鉴定

鸡B-F2基因编码的主要组织相容性复合体(MHC)I类分子α链在递呈内源性抗原中起重要作用。本研究应用RT-PCR方法从鸡外周血单核细胞中扩增了B-F2基因片段,其大小为1 068 bp。进一步将其定向插入真核表达载体,构建重组质粒pEGFP-N1-B-F2。经脂质体法转染COS7,所表达的α链定位于在细胞的浆膜,同时转染P815细胞,经G418的筛选(0.6 mg/mL)得到稳定表达细胞株。该细胞株经培养10代次后,仍在RT-PCR中能获得相应DNA片段。上述结果表明,B-F2基因在动物真核表达系统得到表达,建立的P815(B-F2)细胞株为进一步研究MHC I类分子α链在免疫应答中作用奠定了基础。     

鸡恒定链活性片段和NDVF蛋白表位嵌合体的构建与鉴定

[目的]为研究基于恒定链(Ii)分子片段的免疫载体提供试验材料。[方法]利用鸡恒定链的部分有免疫活性的片段作为免疫载体结构,构建含新城疫病毒F蛋白抗原片段的嵌合体。[结果]成功构建了Ii-key/F306、Ii-key/F306/AP、Cyt/Ii-key/F306和Cyt/Ii-key/F306/AP 4个嵌合体。重组质粒能被诱导表达相应蛋白分子,而且通过纯化获得95%高纯度。[结论]该试验中嵌合体的成功制备为动物免疫试验奠定了基础。     

鸡新城疫病毒F基因片段的原核表达及其抗F蛋白单克隆抗体的制备

[目的]制备鸡新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)抗原的单克隆抗体。[方法]克隆和表达了NDV-F蛋白基因的部分片段F306,经杂交瘤技术制备了抗F蛋白的单克隆抗体。[结果]首先根据F基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计了1对引物,以保存的重组质粒为模板,通过PCR扩增获得长度为306 bp的片段,再将其定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-F306。其次经原核表达获得大小为35.8 kD的融合蛋白,提纯后免疫Balb/c小鼠。最后,用免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选和3次亚克隆获得2株稳定传代和分泌抗NDV-F的抗体的杂交瘤细胞株。连续传代10次后,细胞上清和腹水的抗体效价仍维持在1∶5 124和1∶64 000以上。[结论]获得了2株稳定分泌抗鸡NDV-F抗体的杂交瘤细胞。     

玉米秸秆成型燃料单锅灶的设计与试验(简报)

为了解决农村日益紧张的能源问题和秸秆焚烧问题,根据目前农村的主要生活炊事习惯和玉米秸秆成型燃料的燃烧特性,研制了玉米秸秆成型燃料单锅灶。试验结果表明：该灶达到了国家的相关标准,燃烧比较稳定,利用清洁,有效的利用了玉米秸秆,对于解决玉米秸秆焚烧的问题和改善居民炊事条件具有重要的意义。     

4个沉默鸡恒定链基因(Ii)慢病毒载体的构建及其效果比较

恒定链(invariant chain,Ii)是脊椎动物重要的免疫分子,在主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ类分子递呈抗原中起重要作用。为研究鸡(Gus gallus)Ii与MHCⅡ类分子的关系,本研究构建了4个沉默Ii基因的慢病毒表达载体,并比较了其干扰效果。首先,用自行设计合成的4条鸡Ii基因干扰序列,分别经一步退火法获得双链短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),并将其用双酶切法插入慢病毒载体pLL3.7。4个构建的慢病毒重组载体经酶切和测序鉴定,分别命名为pLLIi-shRNA236、pLL-Ii-shRNA376、pLL-Ii-shRNA527和pLL-Ii-shRNA539。然后把这些重组载体分别转染293T细胞(转染腺病毒E1A基因(lethal infection gene)的人肾上皮细胞系),进行病毒包装,再用包装的慢病毒感染鸡源巨噬细胞HD-11。结果表明,重组载体感染的293T细胞表达绿色荧光蛋白,用包装的慢病毒接种293T细胞,其滴度达2.2×107~5.1×107TU/mL;接种HD-11细胞的感染率均达到95%以上。最后用荧光定量PCR方法检测其沉默鸡源巨噬细胞HD-11的鸡Ii mRNA的效率,与对照组相比,4个重组慢病毒干扰效率分别为37%、52%、88%和78%;其中,pLL-Ii-shRNA527的干扰效率最高。综上所述,本研究从4个构建的重组载体中筛选出1个高效沉默鸡巨噬细胞Ii基因重组载体,并提示shRNA序列是决定沉默特定基因的关键。实验结果为研究鸡Ii在递呈抗原中与其他免疫分子的关系提供了基础资料。     

浅谈公共秩序保留制度在我国的适用

沉默权制度的建立是保障人权和司法正义的要求.虽然各国的相关规定不尽相同,但很多国家已经在立法中确立了沉默权制度.简要阐释了沉默权的含义,并着重从中国国情出发,对沉默权制度在中国的确立进行了利弊两方面的分析,并在具体实施方面提出意见.     

除草剂封闭直播苏州青3号田块的除草效果

用3种除草剂及其倍量对苏州青3号小白菜直播后芽前封闭的除草效果及安全性进行跟踪调查。结果表明,在药后15 d,3种除草剂常规剂量及其倍量对硬草的防效均低于70%,其中667 m2喷施72%金都尔乳油200 mL和50%乙草胺乳油200 mL后,对阔叶草的防效均高于86%;药后40 d,各药剂处理对硬草的防效均达到92%,其中50%乙草胺乳油100和200 mL对阔叶草的防效达90%以上,但50%乙草胺乳油的安全性较差。综合评价认为,72%金都尔乳油100 mL对杂草的综合防效较好,且对苏州青3号小白菜相对安全。     

利用实时荧光P CR技术快速检测玉米籽粒中转基因成分

[目的]利用Taq Man特异性荧光标记法快速检测玉米籽粒中转基因成分。[方法]外源基因选取具有一定代表性的Ca MV35S启动子、NOS终止子、BAR、Cry IA(b)基因,数据结果由实时荧光定量PCR反应的Ct值判定。[结果]用该方法检测玉米籽粒中未含有转基因成分,可作为结果判定。[结论]该方法在样品量大时极具优势,高效,准确,对环境污染较小。