检测H1和H3亚型猪流感病毒多重RT-PCR方法的建立

猪流感病毒(swine influenza virus, SIV)危害猪体健康,影响生长性能,SIV常常与其他病毒和细菌双重或多重感染,使病情加重,死亡率增高[1].目前,猪流感(SI)已遍布美洲、亚洲和欧洲等世界各地,已成为规模化猪场的常发呼吸道传染病之一[2].特别是近年来禽源流感病毒在猪体内的发现更引起人们的关注[3].当前我国流行的SIV主要是H1和H3亚型[4-5].PCR方法特异、敏感、快速、简便,可从临床样品中直接进行诊断和鉴别,而不需要进行病毒分离和其他辅助性试验,是一种很有价值的检测手段.本研究建立的多重RT-PCR方法可同时达到对猪流感病毒诊断及H1和H3亚型鉴定目的,节约了时间和成本.     

广西猪细小病毒与PRRSV、CSFV、PCV2、PRV混合感染的检测

应用PCR技术,对广西南宁、玉林、贵港、柳州、钦州和桂林6个市的10个规模化猪场送检的141份病猪组织样品进行猪细小病毒(PPV)的检测;同时,对鉴定为PPV阳性的样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CS-FV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,以确定猪群中PPV与其它病毒混和感染情况。结果,所有样品诸病毒的阳性检出率达17.73%(25/141);流产胎儿PPV阳性率为19.57%(9/46),繁殖障碍母猪扁桃体的PPV阳性率为17.74%(11/62),发病断奶仔猪组织病料的PPV阳性率为15.15%(5/33),PPV与PRRSV、CSFV、PCV2和/或PRV4种病毒均有混合感染现象,混合感染样品占PPV阳性样品的48.00%(12/25)。     

规模猪场猪呼吸道疾病病原诊断实例分析

<正>猪呼吸道疾病在规模猪场多发和常见,往往是细菌性和病毒性疾病混合感染。目前,猪场对猪呼吸道病原菌的检测步骤主要为病症观察,病料收集,病料培养基接种,抗体检测,细菌的分离、纯化、鉴定,核酸电泳等。现将安徽某猪场出现呼吸道症状的病猪病原分离鉴定案例报告如下：     

不同药剂对水稻1代二化螟的防效研究

研究不同药剂对水稻1代二化螟的防效,结果表明:20%阿维·二嗪磷乳油防治1代二化螟的持效性和速效性较好,当用药量为2 250 m L/hm2时,药后3、7、10 d的枯鞘防效分别为90.91%、81.82%、84.62%,且对水稻安全,可作为大田防治二化螟的轮换药剂。     

不同品种矾根组培快繁生长对比试验

以矾根金秋和黑曜石2个品种的顶芽为外植体材料,通过不同外植体采摘时间,以及添加不同种类浓度的激素,初步研究了适合这2个矾根品种生长的组培快繁体系。试验结果表明,4月下旬至5月上旬为外植体采摘的最佳时间;金秋芽增殖的最适培养基配方为基本培养基(MS)+0.1 mg·L^-1 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.1 mg·L^-1萘乙酸(NAA),黑曜石增殖的最适培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA;2个品种矾根的生根配方均为:1/2MS+0.5~1.0 mg·L^-1 NAA。     

稻茬小麦公顷产量9000 kg群体氮素积累、分配与利用特性

在稻-麦两熟制条件下,以扬麦20为材料,通过基本苗和氮素运筹（氮肥施用量、 施用时期和比例）调控建立不同产量水平群体,研究稻茬小麦籽粒产量高于9000 kg/hm2群体的氮素积累、 分配与利用特性。结果表明,稻茬小麦籽粒产量 9000 kg/hm2以上群体拔节期至开花期、 开花期及成熟期氮素积累量分别在N 104~117 kg/hm2、 197~205 kg/hm2、 234~251 kg/hm2,极显著高于籽粒产量 9000 kg/hm2 以下群体。稻茬小麦不同群体开花期叶片、 茎鞘、 穗及成熟期籽粒氮素积累量与籽粒产量均呈极显著线性正相关,氮素积累量分别为N 89~91 kg/hm2、 74~83 kg/hm2、 32~33 kg/hm2、 177~188 kg/hm2, 有利于实现籽粒产量9000 kg/hm2。花后群体营养器官氮素转运量与籽粒产量均呈极显著线性正相关,叶片、 茎鞘及穗轴+颖壳的氮素转运量分别为N 65~73 kg/hm2、 53~54 kg/hm2、 16~20 kg/hm2, 有利于实现籽粒产量9000 kg/hm2。稻茬小麦籽粒产量9000 kg/hm2以上群体100 kg籽粒吸氮量为N 2.9~3.0 kg, 氮素利用效率32.9~34.5 kg/kg, 氮收获指数0.73~0.77。     

高粱-新高粱2号

1 品种来源 新高粱2号选用“克皮西巴西”作母本,从海南岛引进的红粒甜高粱品种海南高粱蔗作父本杂交选育而成。是高产、高糖、早熟、抗黑穗病的甜高粱新品种。     

沉默鸡B-Fα基因对IL-2、IL-4和IL-6转录水平的影响

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)和白介素(interleukin, IL)都是重要的免疫分子,其中MHCⅠ类分子递呈内源性抗原并启动细胞免疫,IL则是重要的免疫调节因子。关于鸡(Gallus gallus) MHCⅠ类分子(又称为B-Fα)与下游调节因子IL基因的关系尚不明确。本研究旨在应用基因沉默法研究下调B-Fα基因表达对IL-2、IL-4、IL-6转录水平的影响。首先构建沉默鸡B-Fα基因的重组慢病毒载体。根据B-Fα基因和短发夹RNA (short hairpin RNA, shRNA)序列的结构要求,筛选3段DNA序列并设计合成shRNA;利用限制性内切酶定向插入慢病毒表达质粒pLL3.7,获得重组质粒。分别将3个重组质粒转染293T细胞,均能表达标签蛋白并包装慢病毒。将3株重组病毒感染HD-11细胞,感染效率达95%以上。利用qRT-PCR进行检测分析显示,重组病毒干扰B-Fα基因表达,分别下调至39%、97%和61%。将其中干扰效果最佳的重组慢病毒(pLL-sh B-Fα-257)感染鸡源巨噬细胞系HD-11细胞,并检测IL-2、IL-4和IL-6的转录水平。结果显示,B-Fα基因表达下调的同时,IL基因转录水平受到不同程度的影响,其中IL-2表达下调(P0.01),IL-4上调(P0.05),IL-6没有明显变化。上述结果提示,应用基因沉默法可抑制B-Fα基因表达,并影响IL基因的转录水平,提示启动细胞免疫的B-Fα基因与下游调节免疫反应的细胞因子之间存在关联。本研究为深入探讨免疫反应的调控机理提供了基础资料。     

对部分不明原因高热发病猪场的主要疫病调查报告

2007年以来广西一些猪场出现不明原因高热发病和死亡率的现象,为了解其病因,我们应用PCR和RT-PCR技术,对来源于8个发病猪场的89份病料进行猪瘟病毒(CsFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)猪伪狂犬病(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)的调查.结果发现89份病料中检出CSFV阳性样品8份,阳性率8.99%,PRRSV阳性样品43份,阳性率48.31%;PRV阳性3份,阳性率3.37%,PCV-2阳性24份,阳性率26.97%;同时存在CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2不同程度的混合感染现象,其中PRRS和PCV-2混合感染最为严重,阳性率达7.87%.调查结果表明,我区部分不明原因高热的发病猪场均不同程度存在CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2感染的现象,特别是PRRSV感染情况极为严重,提示PRRSV可能是我区一些猪场出现不明原因高热发病死亡的主要原因.