茄子花青素合成中SmTTG1、SmGL3和SmTT8的表达及其蛋白质间的相互作用

采用同源克隆方法从茄子（Solanum melongena L.）中分离得到3个基因,分别命名为SmTTG1、SmGL3和SmTT8。序列分析表明,SmTTG1的cDNA全长1 220 bp,开放阅读框为1 029 bp,编码342个氨基酸,与马铃薯（S. tuberosum L.）TTG1基因序列同源性达到94%,成熟蛋白等电点为4.90,具有典型的WD结构域;SmGL3的cDNA全长2 329 bp,开放阅读框为1 887 bp,编码628个氨基酸,与马铃薯GL3基因序列相似性达到94%,蛋白等电点为5.61,有典型的HLH结构域;SmTT8的cDNA全长2 242 bp,开放阅读框为1 896 bp,编码631个氨基酸,与马铃薯TT8基因序列同源性为85%,蛋白等电点为5.18,有典型的HLH结构域。荧光定量检测结果表明,SmTTG1、SmGL3和SmTT8在茄子根、茎、叶、花、果皮和果肉中均有表达,但表达水平具有组织特异性。酵母双杂交结果表明,SmTTG1与SmTT8、SmGL3之间有相互作用,并且SmTTG1、SmGL3和SmTT8都与SmMYB之间发生作用。推测SmTTG1为WD40转录因子,SmGL3和SmTT8为bHLH转录因子,它们都参与调控茄子花青素的合成。     

番茄重组自交系群体耐冷鉴定体系探究

为了探究用生理指标反映群体耐冷性的可行性,以冷敏感栽培种番茄XF98-7与耐冷的野生醋栗番茄LA2184及其杂交构建的含有146个家系的重组自交系RIL(recombinant inbred line)群体为试验材料,在统计芽期低温相对发芽率、幼苗冷害指数的基础上,测量了幼苗冷害后的POD(peroxidase)活性相对变化率和叶绿素含量相对变化率2个指标。结合4个指标间的弱相关性分析结果,并综合考虑测量数据整齐性、试验可操作性等因素后,认为用POD活性和叶绿素含量对大群体做耐冷性评估值得商榷,需要做进一步试验验证。     

番茄耐盐性及耐盐育种研究进展

综述了国内外番茄耐盐的生理机制,耐盐性状的筛选技术,以及耐盐育种的方法。针对番茄耐盐育种的现状,提出了常规育种与细胞工程育种、分子标记辅助选择育种相结合选育番茄耐盐品种的新途径。     

茄子紫外光受体蛋白基因SmUVR8的克隆及功能分析

以光敏感型茄子(Solanum melongena L.)‘蓝山禾线茄’子叶为材料,克隆了紫外光受体蛋白基因UVR8同源基因SmUVR8的cDNA全长序列,并对序列进行生物信息分析,通过转化拟南芥突变体以及实时荧光定量PCR研究其功能。序列分析表明,SmUVR8的CDS全长1 530 bp,编码509个氨基酸,属于较不稳定亲水性蛋白。蛋白序列比对发现,SmUVR8与其他茄科植物的UVR8高度同源。通过拟南芥uvr8突变体转化试验发现,转基因植株(SmUVR8/uvr8)恢复了野生型的表型,说明SmUVR8与拟南芥的UVR8功能具有相似性。通过实时定量PCR发现,UV-B照射影响SmUVR8以及下游SmHY5和SmCHS的表达。酵母双杂交结果表明,SmUVR8与SmCOP1的互作依赖于UV-B。推测UV-B在茄子中是通过紫外光受体SmUVR8与SmCOP1的互作,促进SmHY5和SmCHS的表达。     

不结球白菜SRAP标记体系的建立与作图亲本筛选

SRAP标记是遗传作图和分子辅助育种的重要技术之一,为了建立具有通用性的不结球白菜SRAP标记体系,选用国家种质资源重点实验室的不结球白菜作为试材,利用正交设计方法对、模板DNA、引物、Taq酶和缓冲液6个因素进行了优化,获得了不结球白菜SRAP标记反应体系的最佳组合:10 μL反应体积中包含40 ng的DNA模板、75 ng引物、0.2 mmol·L-1的的、0.15 U的Taq酶和1倍体积的缓冲液.筛选不结球白菜的作图杂交亲本是构建遗传连锁图谱的基础,以12份不结球白菜亲本为试材,利用70对SRAP引物组合共扩增出了382条多态性带,平均每个引物组合扩增出5.46条,由聚类分析图确定了杂交亲本为相似系数最小的2个组合,Q06-2和Q06--4或Q06-2和Q06-6,同时验证了SRAP标记体系的通用性.     

栽培番茄品种指纹图谱的AFLP分析

以62份栽培番茄为材料,利用65对AFLP引物进行选择性扩增,选出5对多态性丰富、带型清晰的引物进行扩增,共获得85个多态性位点,占总扩增位点的35.41%;选出清晰的16个位点构建了62份栽培番茄的AFLP指纹鉴别图谱。结果表明,由引物组合P55M48、P58M68、P21M49、P77M51、P58M60所构建的DNA指纹鉴别图谱可将供试材料完全区分开。     

茄子栽培种与野生种质资源遗传关系的RAPD分析

利用57个RAPD引物标记对16份茄子材料进行遗传亲缘关系分析。结果表明,从200个RAPD引物中筛选出多态性引物57时,这些引物扩增出274条多态性片段,多态性位点百分率达49．73％。以UPGMA方法时其聚类。所有材料间相似系数在O．35—1．00之间,在相似系数0．45水平上可以把材料分成3类。     

正交设计优化茄子SSR反应体系

以茄子基因组DNA为模板,利用正交设计方法对茄子SSR反应体系中的Mg^2＋、模板DNA、Taq聚合酶、dNTP、引物5个因素进行了优化,同时对反应程序中的退火温度及循环次数进行筛选。结果确定了茄子10μL体积SSR反应体系的最优条件为：Buffer为1μL,Mg^2＋为2．25mmol·L^-1,dNTP为400μmol·L^-1,上下游引物各为39.60ng,Taq聚合酶为0．75U,DNA约为100ng。PCR程序为94℃预变性2min：然后进行35个循环的94℃变性30s,52℃复性30s,72℃延伸45s;72℃延伸8min后4℃保存。     

激素组合与水解蛋白对番茄花药愈伤增殖的影响

以4个番茄F1杂交种(C1、C2、C8、C10)和1个番茄纯系(2052)花药培养的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合对愈伤组织增殖的影响,以及不同浓度水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)对愈伤组织增殖的影响。结果表明:MS(NLN)+1.00mg/L IAA+1.00mg/L 6-BA+30g/L蔗糖和MS(NLN)+0.50mg/L NAA+0.50mg/L KT+30g/L蔗糖这2种激素组合的培养基中愈伤组织生长最快,其中材料C8的增殖系数最高达0.61;愈伤组织增殖最适浓度为5.00g/L CH和0.50g/L LH,且在5个材料中C8愈伤增殖系数最大,分别为1.00和0.91。     

番茄SSR遗传连锁图谱的构建及每序花数性状的QTL定位

以每序花数性状差异显著的栽培番茄与野生醋栗番茄杂交产生的F2为作图群体,应用SSR标记构建了番茄的遗传连锁图谱.图谱共包含120个标记,总长度为879.1cM,标记平均间距7.33 cM.利用区间作图法在第2和第5染色体上检测到2个与每序花数有关的QTLs,其贡献值分别为5.22%和8.39%.