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柑橘黄化脉明病毒RT-LAMP检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
柑橘黄脉病由柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)引起,是中国近年来新发生的一种柑橘病害。根据CYVCV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP检测方法。结果显示该方法能特异扩增CYVCV,与其他6种柑橘病原物(柑橘衰退病毒、温州蜜柑萎缩病毒、鳞皮病毒、柑橘裂皮病类病毒、柑橘碎叶病毒和柑橘黄龙病菌)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍;田间样品的检出率为63.33%,与RT-PCR的结果一致,适用于田间样品的检测。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CYVCV,可省去电泳分析的时间。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点。 相似文献
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枳橙具有生长旺、半落叶、冬季不休眠、成苗快等特点,是培育优良柑桔苗木的理想砧木之一。下面谈谈枳橙秋播繁殖主要技术要点。1播种时间秋播枳橙一般在9月左右,气温在20℃以上,太晚气温降低则萌芽晚,因砧木小,嫁接时间也要后移,影响第二年移栽。2播种前的准备2.1土壤准备及整土土壤在5月底开始准备,采用营养土配方,配方为草炭:泥沙(河沙):谷壳容积比为1∶1∶1,草炭要经过粉碎机粉碎,其营养土团粒直径小于0.5 cm。其中每m3土加油饼不超过5 kg、磷肥4 kg。转入搅拌机搅拌均匀后加入适量的水堆制1~3个月,使其充分发酵腐熟。然后采用60℃左右蒸… 相似文献