猪瘟病毒E0蛋白对IFN-β启动子的抑制作用研究

以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为IFN-β诱导剂,将猪瘟病毒(Classical swine fever vires,CSFV)E0基因的C末端与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protem,EGFP)基因相连,瞬时表达于猪。肾细胞PK15中,利用荧光素酶报告基因系统检测IFN-β启动子的活化状态,结果显示CSFV E0蛋白可抑制NDV对IFN-β启动子的诱导作用,抑制效应随E0蛋白量增加而增强;半定量RT-PCR结果显示,E0蛋白可明显降低IFN-βmRNA的生成量。结果表明,E0蛋白具有干扰素拮抗功能。该研究为阐明CSFV的致病及持续感染机制提供了理论支持。     

汽车电控发动机常见故障诊断及排除方法

在我国汽车产业的发展过程中,电子控制技术被广泛应用在现代汽车上,通过不断完善与实验,这项技术备受汽车生产企业的欢迎,同时随着汽车电控发动机设备的应用,也有效地促进了汽车行业的进一步发展。虽然这项技术能够使汽车的性能更加完善,但是在汽车电控发动机的实际应用的过程当中,还存在各种故障需要及时进行诊断和排除,基于此,文章主要对汽车电控发动机中出现的各类常见问题进行了分析和诊断,探讨有效的排除故障方法,希望可以为相关人员提供参考。     

金福菇的引种与驯化研究

介绍了金福菇的引种驯化研究背景。从2001年开始进行了金福菇菌种的引进和驯化研究。通过几年来的试验,解决了品种选育、栽培季节、培养基配方与覆土等几个关键问题,探索出了一整套适合在江西气候条件的高产栽培模式。     

搞好蚕前消毒养好春蚕

为养好春蚕，必须全面彻底对养蚕用房及所有养蚕用具进行彻底消毒，杀灭病原微生物，杜绝病源。蚕病以预防为主，着重在防。养蚕前对蚕室蚕具的消毒方法步骤概括为“六”个字。     

汕尾市高位池养虾可持续发展的建议与对策

根据发展高位池对虾养殖业的经验，结合汕尾市现有的对虾养殖产业基础及海洋生态条件，提出该市高位池对虾养殖业可持续发展的建议与对策。     

表达小鹅瘟病毒VP2蛋白重组鸭瘟病毒的构建及其生物学特性

【目的】鸭瘟和小鹅瘟是番鸭和鹅的两种重要传染病,鸭瘟最主要的防治措施是定期接种鸭瘟病毒减毒活疫苗。根据2012年国际病毒分类委员会（ICTV）的报告,DEV被归为疱疹病毒科的α疱疹病毒亚科马立克氏病毒属。疱疹病毒如伪狂犬病毒、马立克氏病毒、火鸡疱疹病毒等已广泛用于病毒活载体的研究,而近几年也有关于鸭瘟病毒（DEV）作为疫苗活载体的报道。为了为免疫防控鸭瘟和小鹅瘟提供新手段,本研究拟在鸭瘟病毒疫苗株感染性克隆的基础上,构建表达小鹅瘟病毒（GPV）主要免疫原蛋白VP2的重组病毒rDEV-VP2,并研究其生物学特性,进而探讨重组病毒rDEV-VP2作为防治DEV和GPV的二联重组活载体疫苗的可能性。【方法】将密码子优化的GPV VP2基因通过常规基因克隆的方法插入转移载体pEP-BGH-end,构建含有GPV VP2表达框pCMV-VP2-BGH-pA的重组表达质粒。在鸭瘟病毒（DEV）疫苗株细菌人工染色体克隆pDEV-EF1的基础上,通过“Red E/T”两步重组法将GPV VP2基因表达框插入到DEV US7和US8基因之间构建了突变体克隆pDEV-VP2。利用磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞（CEFs）拯救获得重组病毒rDEV-VP2和删除Bac质粒序列的rDEV-VP2-Cre,并对重组病毒细胞体外生长曲线、蚀斑大小和VP2蛋白表达情况进行测定。将rDEV-VP2接种番鸭,在不同时间采集血清,采用间接ELISA法检测血清中GPV VP2抗体产生情况。【结果】间接免疫荧光检测和Western blotting分析表明,外源蛋白VP2在CEFs细胞成功表达。病毒生长曲线和蚀斑大小测定结果显示,rDEV-VP2在CEFs细胞上的增殖滴度与亲本株相比无显著差异,表明外源基因VP2的插入不影响rDEV重组病毒的增殖。动物试验结果表明,7日龄雏番鸭接种rDEV-VP2可以诱导产生针对GPV VP2的抗体,免疫后3周抗体阳性率为50%（4/8）。【结论】本实验将小鹅瘟病毒的主要免疫原基因VP2插入到DEV疫苗株基因组的US7和US8基因间构建了表达该免疫原性基因的重组鸭瘟病毒细菌人工染色体,继而在鸡胚成纤维细胞（CEFs）上拯救获得了重组病毒rDEV-VP2,病毒细胞生长特性与亲本株基本一致,且能诱导鸭体产生GPV VP2特异性的抗体。该研究为研制DEV-GPV二联重组活载体疫苗奠定了基础。     

京郊设施蔬菜黄瓜花叶病毒的检测

为了明确北京地区设施蔬菜上常见病毒的发生情况,利用ELISA和RT-PCR方法对京郊设施蔬菜中的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)进行检测。共采集设施栽培的芹菜、观赏南瓜、结球生菜、大南瓜、辣椒、抱子甘蓝、番茄（‘大红袍’和‘红罗马’品种）、四棱豆、茄子共10个蔬菜作物样品的叶片进行测定。结果显示：芹菜、观赏南瓜、结球生菜、辣椒、茄子和番茄‘大红袍’品种的样品含有CMV,大南瓜、抱子甘蓝、四棱豆和番茄‘红罗马’品种的样品未检测到CMV。ELISA和RT-PCR检测结果一致,将检测结果为阳性样品的RT-PCR产物进行了序列测定和分析,验证了检测结果的可靠性。     

辅导员在构建创新人才培养体系中的角色认知与能力建设

在创新人才培养体系中,教务学工联动机制、校企合作共建机制和校际交流培养机制是重要支撑。辅导员在这一体系中的角色认知直接影响创新人才的培养。辅导员在做好引领者、协调者和组织者的基础之上加强能力建设,能够更为出色地在创新人才培养体系中发挥自己的作用,为国家创新人才的培养贡献力量。     

梯度有机负荷下农业废弃物厌氧发酵特性及微生物群落

为了解梯度负荷对不同C/N农业废弃物厌氧发酵特性及微生物群落的影响,该试验以猪粪、金针菇菌包、稻秆和甘蔗叶等C/N差异较大的废弃物作为原料,通过逐渐提高全混合厌氧反应器(continuous stirred tank reactor,CSTR)的有机负荷率(organic loading rate,OLR),研究物料在4个OLR(1.11、1.67、2.22和2.78g/(L·d),以可挥发性固体计)下的产甲烷特性和微生物群落结构变化.结果表明:4种物料的日甲烷产量均随OLR递增而增加,但单位物料甲烷产率与微生物菌群结构则因物料C/N差异而表现出不同的变化趋势.其中:猪粪的日甲烷产量最高,细菌和古菌的菌群结构与对照组相比变化不大;多样性指数先增后减,甲烷产率也在OLR达到1.67g/(L·d)后逐渐下降.金针菇菌包甲烷产率相对稳定,细菌和古菌的多样性指数随OLR递增而增长.稻秆和甘蔗叶同属于碳质量分数高的秸秆类物料,二者的细菌和古菌的菌群结构变化明显;但在OLR达到2.78g/(L·d)时,稻秆受系统酸化(VFA/TIC>0.8)影响,甲烷产率下降明显,细菌和古菌的多样性指数也出现下降;而甘蔗叶则因VFA/TIC<0.8,其甲烷产率在发酵过程中未出现明显下降.此外,不同C/N物料对优势菌的形成存在影响.其中:Methanolobus zinderi为猪粪物料特有的优势古菌;Proteiniphilum acetatigenes,Acetivibrio cellulolyticus为金针菇菌包、甘蔗叶特有的优势细菌;Methanospirillum hungatei为稻秆物料独有的优势古菌.     

浙江省地方鸡种禽白血病毒抗原检测与部分分离株GP85基因序列分析

为了解浙江地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis vrius,ALV-J)的感染情况与流行毒株的分子特征,对浙江省部分地方品种鸡体内ALV的p27抗原进行了检测,从疑似感染鸡群中检测分离到5株 ALV-J,并对其GP85基因进行PCR分子克隆和序列分析。研究结果显示:在检测的19个地方鸡品系中,所有品系的鸡样本都呈现抗原阳性,其中101系的抗体阳性率最高,母鸡阳性率为40.48%,公鸡阳性率为16.54%;126系次之,母鸡阳性率为28.87%,公鸡阳性率为3.30%;171系抗体阳性率最低,其母鸡阳性率仅为4.08%,公鸡的感染率为0。为了解地方鸡群中ALV-J的遗传变异,对分离到的5株ALV-J的GP85基因进行了分子克隆和序列分析。结果表明,5个分离毒株的GP85基因大小均为924 bp,与预期一致;本研究样品序列之间的核苷酸同源性为90.8%~98.5%,与原型毒株HPRS103核苷酸相似性为90.3%~97.0%,与国内其他分离株的同源性为86.5%~99.0%。分离株与福建(FJ201308株)和广东(WF13株)分离株的同源性最高。结果表明:浙江省大部分地方品种鸡都不同程度感染ALV-J,而且分离毒株已经发生了不同程度的变异,提示我们应加强浙江省地方品种鸡ALV的净化工作。