李痘病毒及其风险分析

李痘病毒是危害核果类果树的重要病原物,具有传播迅速的特点,已被多个国家列为检疫性有害生物。本文对李痘病毒生物学特性等方面进行综述,通过分析该病毒的传播和定殖规律,并根据我国的具体生态情况,对其传入的可能性进行风险分析,结果认定其传入的可能性较大,需要制定严格的检疫措施,严防传入中国。     

侵染唐菖蒲和百合三种病毒的多重实时荧光RTPCR检测方法

南芥菜花叶病毒Arabis mosaic virus(ArMV)、百合无症病毒Lily symptomless virus(LSV)和菜豆黄花叶病毒Bean yellow mosaic virus(BYMV)是侵染百合和唐菖蒲的主要病原物,受这三种病毒侵染的唐菖蒲和百合植株长势减弱、切花质量降低、种球产量下降.     

应用双重数字PCR对转基因玉米成分进行定量方法研究

基于微滴式数字PCR平台,研究建立了一种在同一个微滴反应体系中同时测定样品中两种靶序列的双重微滴式数字PCR定量方法。结果表明,所建立的T25品系双重PCR方法能特异性检出转基因玉米T25,而其他转基因玉米、油菜、水稻等作物品系均没有扩增。灵敏度实验数据表明,所建立的T25双重数字PCR方法,在相对标准偏差≤25%时可以检测到4.6个T25特异性边界序列分子,在不考虑各重复间相对标准偏差的情况下可以检测到1个拷贝。定量结果准确性比较研究显示,与采用分别定量内源基因和T25边界序列来定量转基因成分结果相比较,所建立的T25双重数字PCR定量结果因消除了取样误差结果更准确,以上研究结果表明双重微滴式数字PCR定量方法比单重微滴式数字PCR定量方法更适用于进出境农产品转基因成分的定量检测。     

基于ITS序列大豆茎褐腐病菌的PCR鉴定

提取了分别来自11个种共13株真菌(都是大豆上的常见病害的病原菌)的DNA.采用ITS序列扩增通用引物对其进行PCR扩增,并对大豆茎褐腐病菌的PCR产物进行测序.根据所得大豆茎褐腐病菌与其常见易混淆品所在属在ITS区的基因序列比较分析,设计并合成了1对特异性引物.采用此对引物,只有大豆茎褐腐病菌能扩增出500 bp条带,检测的灵敏度达到4.2 pg/μL.将此对引物应用于人工接种大豆茎褐腐病菌大豆的检测,结果表明,此方法能够成功区分大豆茎褐腐病菌及其近似种.     

主要大豆贸易国品质检验方法之比较研究

我国是目前世界上最大的大豆进口国,每年进口数千万吨大豆,主要用于食品原料和饲料加工,而大豆在国际贸易市场是非常活跃的商品,因此,其品质问题一直备受重视。但进口大豆品质参差不齐,我国在对进口大豆的品质检验中,屡屡发现品质不合格的问题。为准确了解国内外大豆品质检验的标准和方法,本文比较分析了中国、美国、巴西、阿根廷、加拿大等主要大豆贸易国现行的检验标准和方法,并对我国在进口大豆检验中存在的问题进行讨论。     

16S nested-PCR技术检测玉米细菌性枯萎病菌

 玉米细菌性枯萎病是玉米上的重要种传病害,病原菌为Pantoea stewartii subsp.stewartii。本研究设计了16S通用引物,扩增该病菌及其近似种的16S rDNA,通过序列测定和分析,针对该病菌设计了特异性引物,采用nested-PCR技术,能够准确地区别该病菌及其近似种,检测的灵敏度在DNA水平上达到10^-3 pg级,检测活菌则达到2 cfu。检测人工污染的玉米种子时,不受种子提取液中其它物质的干扰,灵敏度依然达到2 cfu。     

竹绿虎天牛溴甲烷熏蒸处理技术研究

1985～2005年,美国报道从我国出口的竹制品中发现包括竹绿虎天牛(Chlorophorus annularis F.)在内的20多种有检疫意义的害虫.由于目前还没有针对竹制品中竹绿虎天牛的熏蒸处理技术指标,美国APHIS-PPQ采用其检疫处理手册的T404-d方案对竹制品进行熏蒸处理,即溴甲烷熏蒸24h.美国采用的竹制品熏蒸方案中溴甲烷的用量较高,本文应用比T404～d方案更低剂量的溴甲烷,研究竹桩中竹绿虎天牛的熏蒸效果.溴甲烷熏蒸试验在自制的小型熏蒸箱中进行,在26.7℃48 g/m3、21.1℃ 64 g/m3、15.6℃ 80 g/m3、10.0℃ 96 g/m3和4.4℃ 112 g/m3等5个温度和剂量组合,共20个试验(每个剂量4个重复)共熏蒸处理2847头幼虫、140头蛹和122头成虫,死亡率达100%,而在3组对照中共发现455头活虫.同时,用装满竹杆(80%)的20尺集装箱模拟竹制品出口熏蒸试验,以检查在24h的熏蒸过程中溴甲烷是否保持必需的浓度要求.本研究推荐了较低剂量的溴甲烷熏蒸处理竹制品的新的技术指标.     

竹绿虎天牛溴甲烷熏蒸处理技术研究

1985～2005年,美国报道从我国出口的竹制品中发现包括竹绿虎天牛(Chlorophorus annularis F.)在内的20多种有检疫意义的害虫.由于目前还没有针对竹制品中竹绿虎天牛的熏蒸处理技术指标,美国APHIS-PPQ采用其检疫处理手册的T404-d方案对竹制品进行熏蒸处理,即溴甲烷熏蒸24h.美国采用的竹制品熏蒸方案中溴甲烷的用量较高,本文应用比T404～d方案更低剂量的溴甲烷,研究竹桩中竹绿虎天牛的熏蒸效果.溴甲烷熏蒸试验在自制的小型熏蒸箱中进行,在26.7℃48 g/m3、21.1℃ 64 g/m3、15.6℃ 80 g/m3、10.0℃ 96 g/m3和4.4℃ 112 g/m3等5个温度和剂量组合,共20个试验(每个剂量4个重复)共熏蒸处理2847头幼虫、140头蛹和122头成虫,死亡率达100%,而在3组对照中共发现455头活虫.同时,用装满竹杆(80%)的20尺集装箱模拟竹制品出口熏蒸试验,以检查在24h的熏蒸过程中溴甲烷是否保持必需的浓度要求.本研究推荐了较低剂量的溴甲烷熏蒸处理竹制品的新的技术指标.     

应用TaqMan MGB探针检测美澳型核果褐腐病菌

以美澳型核果褐腐病菌的6个菌株以及核果褐腐病菌一个和欧洲种仁果褐腐病菌这两种近似种为研究对象,通过对ITS区序列的比对分析,设计了美澳型核果褐腐病菌的TaqMan MGB实时荧光PCR引物和探针,建立了美澳型核果褐腐病菌的TaqMan MGB实时荧光PCR检测方法.设计了这3种近似种的通用引物和探针,用于检测过程中进行质量控制.     

亚洲梨火疫病致病相关因子的研究进展

本文概述了亚洲梨火疫病(Erwinia pyrifoliae)的生物学特性、危害症状、寄主范围、分布情况,重点介绍了该病菌的微生物学、生理生化、分子生物学特点,以及一些致病相关因子的研究进展.同时,分析比较了亚洲梨火疫病菌和梨火疫病菌以及日本梨枝枯病菌的关系,指出了亚洲梨火疫病菌传入我国的风险以及在检疫上的重要性.