枯草芽胞杆菌PTS-394的GFP标记及其定殖能力

为探明枯草芽胞杆菌PTS-394在番茄根围的定殖能力,采用电转化法获得绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记菌株PTS-GFP,构建其生长曲线,采用对峙生长法评价其室内抑菌活性,并应用抗生素平板回收结合激光扫描共聚焦显微镜观察标记菌株在番茄根围的定殖数量。结果显示：与原始菌株PTS-394相比,标记菌株PTS-GFP的生长、对青枯病菌和4种病原真菌的室内抑菌能力无明显差异。标记菌株PTS-GFP和青枯病菌菌液单独或混合处理番茄苗,灌根当天标记菌株初始菌量接近10⁸ CFU/g,处理3 d后种群数量迅速下降,约10⁶ CFU/g,随后缓慢下降,处理10 d后种群数量约10⁴ CFU/g,处理30 d后,标记菌株仍然能被检测到,约20 CFU/g。表明枯草芽胞杆菌PTS-394在番茄根际土壤中具有一定的定殖能力。     

辣椒疫病拮抗菌的分离、筛选与评价

从67份不同土样中分离得到382株细菌、264株放线分离物,通过平板时峙培养,筛选出拮抗辣椒疫霉的株,其中放线的比例较高,为44.1%;而细菌所占比例则较低,仅为8.5%.测定了抑活性较强的26株株对6种植物病原真的拮抗作用及盆栽控病效果.试验结果表明,拮抗B-YD4-6,A-NP6-7和A-GD5-2对6种植物病原真菌均有抑作用.且抑能力较强,抑圈直径为22.0～26.0 mm,抑制率达45.18%～55.56%;且该3株拮抗株对辣椒疫病的防治效果较好,21 d后的防治效果分别为65.5%,67.4%,64.5%.     

芽孢杆菌(Bacillus spp.)拮抗基因的分子标记

用ＢＯＸ－ＰＣＲ指纹图谱进行了１８４个格兰氏生菌株,其中有４１个菌株与标准菌种Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ之间的ＤＮＡ指纹图谱相似性大于７０％,在离体条件下,测定这些菌株对水稻纹枯菌的拮抗性能。选出４个代表菌株（Ｇ４３３、Ｇ４３４＾－、Ｇ３９６＾＋、Ｇ２９２＾＋）用于筛选ＲＡＰＤ－ＰＣＲ的有效引物、先后共测试了１２４个随机引物,有８个随机引物能够产生明显与拮抗基因相关的ＤＮ     

解淀粉芽孢杆菌Lx-11对水稻细菌性条斑病的防治效果

在不同时期喷施解淀粉芽孢杆菌Lx-11,研究生防菌Lx-11对水稻细菌性条斑病的防治效果。试验结果表明,生防菌Lx-11具有一定的内吸作用,保护作用下对水稻细菌性条斑病的防效为62.7%,显著高于治疗作用下的防效;生防菌Lx-11防治水稻条斑病的最佳防治时期为初发病期。     

枯草芽胞杆菌Bs916突变体库的构建和抑制水稻 细菌性条斑病菌相关基因的克隆

【目的】采用转座子标签技术构建枯草芽胞杆菌Bs916突变体库,从突变体库中筛选对水稻细菌性条斑病菌抑菌效果发生显著变化的菌株并克隆插入位点的基因,获得生防菌Bs916中与抑制细菌活性可能相关的基因。【方法】携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA通过化学转化方法转化至枯草芽胞杆菌Bs916菌株,构建随机插入突变体库。通过平板抑菌试验从突变体库中筛选对水稻细菌性条斑病菌抑菌效果得到显著提高和下降的突变体;并采用PCR和Southern Blot验证转座子是否成功插入到Bs916染色体基因组上,利用反向PCR技术克隆转座子插入位点基因、测序并进行生物信息学分析。【结果】成功构建了枯草芽胞杆菌Bs916的转座子随机插入的突变体库;PCR和Southern Blot结果表明转座子成功的插入到染色体基因组上,约85%突变体以单拷贝形式插入;筛选出30株对水稻细菌性条斑病菌抑制效果发生显著变化的菌株,克隆到21个突变体插入位点的基因序列并测序。生物信息学分析结果表明这些基因与感受态形成、生物膜形成和次生产物代谢相关。【结论】成功构建了Bs916突变体库,克隆到该库中对水稻细菌性条斑病菌抑菌效果显著变化菌株的突变位点基因,这些基因推测可能与枯草芽胞杆菌Bs916中的抑制细菌化合物的合成代谢及调控相关。     

微生物农药在植物病虫害防治中的应用及发展策略

本文介绍了微生物农药的概念，种类及相关类群，简述了我国微生物农药的生产及应用状况，对江苏省农科院植保所在微生物农药研究和开发方向的主要进展做了较详细的介绍。本文作者认为，要减少化学农药的使用，大力发展生物防治农作物病虫草害，必须解决微生物农药田间效果不稳定的难题；加大宣传力度，使农民充分认识微生物农药的优点；同时要抓住发展机遇，加强微生物农药基础研究，将微生物农药的开发与无公害农业生产基地建设结合起来，促进微生物农药产业化进程。     

生防菌SF-193对空心莲子草的致病力和田间生物防除效果

经室内生物活性测定、田间小区试验和较大面积示范试验结果表明,生防菌SF-193能够有效防除空心莲子草。生防菌SF-193在室内生物测定致病力时最佳菌液稀释倍数为25倍,在田间试验防除效果时最佳菌液稀释倍数为10倍;生防菌SF-193混合液的防除效果最好,菌丝悬浮液的防除效果其次,培养滤液基本没有防除效果。经江苏省疾病预防控制中心检测,生防菌SF-193菌液的毒性为微毒级。     

植物病原真菌PCR检测技术研究进展

及时有效地做好真菌病害的检测诊断工作是农作物优质、高产的重要保证之一.传统的检测方法主要是观察孢子形态、病斑特征、发病症状等,虽能起到很大的作用,但对于交叉感染、病原菌产孢困难、病斑病症相似的发病作物则较难检测,而分子生物学的发展和PCR技术的诞生为快速、准确检测植物病原真菌提供了基础.根据目前常用诊断植物病原真菌方法的分类及其利弊进行了综述,主要包括:技术原理、发展状况、存在问题、应用前景等,以期为今后植物病原真菌分子检测技术的发展提供参考.     

拮抗细菌Tn5诱变菌株防治水稻纹枯病的研究

以对水稻纹枯病菌有拮抗作用的荧光假单胞菌Ｐ－９１为受体菌；大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ Ｓ１７－１ ＳＭ１０／ｐＳＵＰ２０２１∷Ｔｎ５为供体菌，通过接合转移技术，将转座子Ｔｎ５从供体菌中引入到拮抗细菌Ｐ－５１的基因组ＤＮＡ中，共获得２４００个Ｔｎ５插入突变体，接合频率为２．０×１０＾－７ｅｆｕ／ｍｌ。通过与自然菌株Ｐ－９１的一系列对比试验表明：２个Ｔｎ５插入突变株完全丧失了拮抗作用和防病能力；４个突变株对     

杀菌剂对水稻种子表面拮抗细菌的影响

从水稻种子表面分离获得２７０个细菌分离物,其中９２个菌株对水稻恶苗病病原菌具有拮抗作用。用拮抗菌Ｐ－９１和Ｂ－９１６处理水稻种子,秧苗株高比对照有明显的增高。通过杀菌剂和拮抗细菌对水稻恶苗病防治作用结果的比较,表明施保克、浸种灵和Ｂ－９１６对恶苗病有较好的防效;菌虫清不仅防效差,而且对水稻种子表面的拮抗细菌有破坏作用。