解淀粉芽孢杆菌Lx-11产脂肽类物质鉴定及表面活性素对水稻细菌性条斑病的防治作用

【目的】对解淀粉芽孢杆菌Lx-11产生的脂肽类物质进行分离鉴定和水稻条斑病防效测定。【方法】根据脂肽类抗菌物质合成相关基因序列对Lx-11进行PCR扩增检测,采用MALDI-TOF-MS对脂肽类物质进行分析。【结果】通过3对特异性引物对Lx-11菌株检测,扩增产物经克隆、测序和BLAST分析,表明解淀粉芽孢杆菌Lx-11基因组中含有sfp、fenB、ituA或bamA基因。质谱分析发现提取的粗提物中含有surfactin、bacillomycin D和fengycin等3种脂肽类抗生素。通过构建surfactin突变体菌株,平板和盆栽试验显示突变体菌株抑制条斑病菌能力显著降低。【结论】解淀粉芽孢杆菌Lx-11产生的surfactin类物质对条斑病菌具有较强的抑制作用,是抑制条斑病菌主要物质之一。     

拮抗细菌B-916培养液对水稻纹枯病菌的抗生活性及其抗菌物质的研究

拮抗细菌Ｂ－９１６培养液从原液至稀释４００倍的稀释液水稻纹枯菌的生长均有抑制作用,且浓度愈高,抑制作用愈强。培养液原液与纹枯菌对峙培养,形成的拮抗带宽度为６．７ｍｍ。用培养液处理Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ,菌核形成比未经Ｂ－９１６培养液处理的纹枯病菌（对照）推迟５２ｈ。把Ｂ－９１６培养液喷雾在水稻植株上能有效控制纹枯菌的侵染、蔓延,防治效果达５８．１％。Ｂ－９１６培养液用８０％饱和度的硫酸铵沉淀后透析,上清液完全丧失了抑菌作用,沉淀部分对纹枯菌的抑菌作用比未经硫酸铵处理的Ｂ－９１６培养液（对照）显著增强。由培养液对蛋白酶的敏感性试验结果推测,拮抗菌Ｂ－９１６培养液中抗菌物质的主要成分是蛋白质。     

水稻中抗纹枯病品种的田间防病效果

水稻纹枯病是水稻重要病害之一,60年代以来,随着高产、矮秆、多蘖良种的推广,种植密度和施氮量的增加,危害日趋严重,造成很大损失。当前防治上采用栽培与药剂防治相结合的对策,对控制病害、挽回损失收到了显著成效。本试验对通过田间人工接菌鉴定筛选出的中抗品种,在自然条件下,进一步考察其抗御纹枯病的效果,为利用水稻纹枯病抗性品种的实用意义作出评价。     

拮抗细菌B—916对水稻植株的抗性诱导作用

选择苯丙氨酸解氨酶（PAI）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（PO）和分酚氧化酶（PPO）作为植物抗病性反应的指标，对接种纹枯病菌（RH-2）和拮抗细菌（B-916）后水稻植株体内这些酶的活性水平进行比较，结果表明，接种拮抗菌B-916、病原菌RH-2及同时接种B-916和RH-2，都是在接种24hr后PAL和SOD活性最先达到最大值，PO在48hr后活性达到最高峰，PPO则在72hr出现高峰值。这些酶活性高峰出现的早迟可能与它僮在植物体内所起作用的时间有关。比较不同接种处理诱导产生各种酶活性的强弱可发现，接种拮抗菌B-916后诱导产生的PAL和SOD活性数量与接种RH-2 B-196和接种RH-2的没有明显的差异，而接种B-916诱导生产的PO和PPO活性数量要比接种R B和接种RH2的少一些。叶面喷施拮抗菌B-916后可以诱导水稻植株内一些与抗病性有关酶类活性大幅度提高，从而增加了水稻抵御病原菌侵入、蔓延的能力。     

稻曲病菌生物学特性与致病力相关性研究

 测定了100个稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)菌株的产孢能力、生长速率、色泽、胞外物质对麦种萌发抑制率和致病力,用SPSS软件分析了其产孢能力、生长速率、色泽、对麦种萌发抑制率与致病力的相关性。结果表明：菌株的产孢能力、色泽与致病力呈正相关;对麦种萌发抑制率与致病力的相关系数无统计学意义;菌株的生长速率与致病力呈负相关。其中,菌株的产孢能力和致病力呈中度相关;色泽、生长速率与致病力呈低度相关。     

正交法优化解淀粉芽孢杆菌B1619水分散粒剂加工工艺

解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens生防菌株B1619对设施蔬菜土传病害有较好的防治效果。为了最大限度降低加工工艺对生物杀菌剂B1619水分散粒剂中含菌量的影响,作者通过单因子水平筛选和正交试验,对B1619水分散粒剂主要助剂配比和颗粒制备条件进行了优化。结果表明:3种主要助剂的最佳配比（质量分数）组合为:硅酸镁铝1.0%、萘磺酸盐甲醛3.0%、硫酸铵4.5%,优化后颗粒含菌量比初始含菌量提高了152.0%;最佳颗粒制备条件为:筛孔粒径1.5 mm、烘干温度65℃、烘干时间20 min,优化后颗粒含菌量比初始含菌量提高了160.0%。验证试验表明,加工工艺优化前B1619水分散粒剂颗粒的含菌量为2.50×108 cfu/g,优化后颗粒的含菌量为1.05×109 cfu/g,优化率为320.0%,优化效果十分显著。     

解淀粉芽孢杆菌Lx-11的促水稻生长作用及促生长物质分析

生防菌Lx-11是一株对水稻细菌性条斑病具有较好防治效果的解淀粉芽孢杆菌,为明确其对水稻的促生作用,本研究以感病品种金刚30为试验材料,通过比较不同稀释倍数的生防菌Lx-11无菌上清滤液对水稻种子萌发和幼苗的生长的影响,测定其对水稻芽长、根长和株高,以及叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量和根系活力的影响,运用液质联用仪检测无菌上清滤液中与促生相关的物质赤霉素、脱落酸、生长素和亚精胺的含量。结果表明,生防菌Lx-11无菌上清滤液稀释后对水稻种子和幼苗均有一定的促生作用,且随着菌液稀释倍数的增加,促生作用呈先增加后减少变化,稀释倍数为100倍时,对水稻种子和幼苗的形态和生理指标的影响最为显著;当稀释倍数达到200倍以上,其对水稻的促生效果下降。不同浓度无菌上清液处理水稻幼苗时,水稻植株的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量和根系活力均有不同程度的增加,其中以100倍稀释液增加最大,分别为45.97%、49.62%、46.95%和225.43%。生防菌Lx-11无菌上清滤液中生长素、赤霉素、脱落酸和亚精胺的含量分别为1 200、75.5、3 130和811ng·mL~(-1)。综上,生防菌Lx-11对水稻植株的生长具有明显的促进作用,且促生长物质主要存在于发酵上清液中。本研究为解淀粉芽孢杆菌Lx-11在微生物农药领域的田间高效应用提供了理论依据。     

在水稻生态系统中纹枯病拮抗细菌的分布和种类

 通过对从菲律宾Laguna省水稻植株上分离获得的700个细菌菌株进行离体与生物测定发现,在水稻生态系统中,存在着大量格兰氏阴性、非致病性、对纹枯病有拮抗作用的细菌微生物。根据拮抗细菌分离来源分析结果表明,从病株和水稻生长后期能分离到比健株和生长前期更多的拮抗细菌。用Biolog的方法测定了195个细菌菌株的种类。在147个格兰氏阴性菌株中有13个属39个种,在48个格兰氏阳性菌株中有8个属13个种。在195个被测菌株中有20个菌株对纹枯病菌具有较强的拮抗作用,它们分别归属于7个属12个种。     

水稻纹枯病拮抗细菌的种群分布及其生物多样性研究

 通过对从菲律宾Laguna省水稻植株上分离获得的700个细菌菌株进行离体与生物测定发现:在水稻生态系统中,存在着大量格兰氏阴性、非致病性、对纹枯病有拮抗作用的细菌。用Biolog微板的方法鉴定了195个细菌菌株的种类。在147个格兰氏阴性菌株中有14个属39个种,在48个格兰氏阳性菌株中有8个属13个种。在195个被测菌株中最为常见的种是Stenotrophomonas maltophilia,Pseudomonas aeruginosa和Pseudomonas pudita,并且上述3个种内具有拮抗性能较强菌株的比例相当高。因此,这3个种的细菌对水稻病害的生物防治很有潜力。用PCR的方法分析上述3个细菌种部分菌株的生物多样性,结果表明:同一属不同种菌株之间的DNA带谱有一定的交叉;不同属之间的DNA带谱的差异明显大于种之间的差异。