山羊痘病毒毒力因子KLP2的表达及多克隆抗体的制备

为了研究羊痘病毒（capripox virus）,制备其毒力因子KLP2的多克隆抗体,试验采用基因同源重组的方法分别构建了羊痘病毒两个结构域（KLP2-1和KLP2-2）的原核表达载体并进行测序鉴定。提取质粒后转化大肠杆菌BL21感受态细胞并用IPTG诱导表达,目的蛋白采用SDS-PAGE和Western blotting检测,并用KCl染色切胶纯化,纯化蛋白加弗氏佐剂免疫家兔,制备的抗体用Western blotting和ELISA检测评价。结果表明,试验成功构建了表达载体pET42b-KLP2-1和pET42b-KLP2-2,测序结果显示KLP2-1和KLP2-2基因大小分别为657和984 bp,分别表达了约27和38 ku的蛋白,与理论值相符。切胶纯化的蛋白浓度在1~2 mg/mL之间,制备的抗体用Western blotting检测发现,蛋白有明显的特异条带,ELISA检测抗体的效价均为1∶512。说明试验成功表达了KLP2-1、KLP2-2蛋白,制备了相应的多克隆抗体。     

白沙枇杷采后果皮与果肉活性氧代谢差异研究

枇杷是我国重要的南方水果,采后易腐导致其鲜食期很短,限制了其商业价值。为了阐明白沙枇杷果皮与果肉活性氧(ROS)代谢的差别以探究枇杷采后衰老的生理学机制,以白沙枇杷"白玉"为材料,在20℃条件下储存,并测定果皮和果肉中ROS代谢相关指标的变化规律。结果表明,随着采后衰老的进行,前6 d果皮和果肉氧自由基产生速率相对稳定,然后持续升高,且果皮的产生速率高于果肉。伴随氧自由基的积累,SOD活性亦表现基本一致的规律;POD、CAT活性则表现为果肉高于果皮。果皮POD活性上升迟缓以及CAT活性更早下降说明果皮ROS清除能力低于果肉。储存过程中,果皮和果肉的MDA含量均持续增加,但果皮MDA含量增加更快,说明枇杷果皮膜脂过氧化程度超过果肉,果皮更容易发生结构化损伤。分析认为,采后枇杷ROS代谢失衡削弱了果皮的保护能力,导致果实内外环境的恶化,与枇杷采后衰老变质有关。     

车辆节能型主动悬架的研究

出于节能和主动控制的考虑,利用无刷永磁直线直流电机作为主动悬架的作动器,提出并设计了这种主动悬架的基本结构,对车辆模型进行运动学分析并设计了控制器。通过对该模型的仿真分析结果表明,主动悬架实现了汽车振动的主动控制,可储存再利用振动的能量,达到节能的要求。     

大坝小流量渗流量仪的优化设计及其应用

大坝渗流量直接反映了大坝结构体内的安全状况，因此渗流量监测数据的准确性、长期稳定性及可靠性对大坝安全显得尤为重要。根据调研及前期研制出的大坝小流量渗流量计在实际工程应用中出现的问题，对其进行了优化设计。通过旋转测量容器的设计方式实现了测量与引流分离，不仅简化了仪器结构、降低了仪器成本，而且解决了水流侵蚀及渗水析出物影响下，很多容积法自动化监测设备可靠性不高和在不大量雍高排水沟水位的情况下，容积法自动化监测设备很难布置的难题；通过增加防浪管和溢流板等防浪设计和液位开关的优化设计，提高了仪器的测量精度，为大坝渗流量监测提供了更为准确的数据依据；增加了复位功能，攻克了仪器正在运行过程中，突然断电，复电后仪器无法继续进行测量的问题，增加了仪器的可靠性，具有更为广阔的适应性；仪器采用零阀门设计，解决了因泥沙进入阀门导致阀门被卡死或无法完全关闭，出现测量不正常或无法测量的问题，提高了仪器的长期稳定性及可靠性差，另外，增加了自清洁装置，降低了仪器的维护工作量，增加了仪器适应性。通过厂内性能测试和在四个水电站的实际应用，证明了优化后的仪器具有测量精度高，可靠性及长期稳定性好，结构简单，方便现场安装等优...     

基于干旱胁迫转录组信息的蚕豆ASPAT基因家族分析

蚕豆(Vicia faba L.)是一种重要的食用豆作物,干旱会导致蚕豆产量降低。鉴定蚕豆耐旱基因,有利于通过分子标记辅助育种和基因工程手段培育抗旱品种。在前期研究中,我们通过转录组测序鉴定出了一类天冬氨酸转氨酶基因(ASPAT)响应蚕豆干旱胁迫。ASPAT催化天冬氨酸(ASP)和α-酮戊二酸的可逆转氨反应,生成草酰乙酸和谷氨酸,是参与植物体代谢的关键酶。本文基于转录组测序数据,通过生物信息学方法全基因组鉴定了蚕豆ASPAT基因家族成员,并分析了各基因家族成员的理化性质、亚细胞定位、基因结构、蛋白结构域、保守基序、系统进化、蛋白质互作和基因表达模式。结果显示,蚕豆转录参考基因组中共有8个ASPAT基因家族成员,包括3个真核型ASPAT(AAT)基因和5个原核型ASPAT(PAT)基因,分别定位于线粒体和叶绿体。系统发育分析表明,蚕豆ASPAT蛋白主要可分为2个亚族Iα和Iβ。Iα为AAT蛋白,包括VfASPAT1～VfASPAT3。Iβ为PAT蛋白,包括VfASPAT4～VfASPAT8。蚕豆ASPAT家族成员均含有motif1、motif3、motif9,且具有相似的基因结构和共同的...