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猪链球菌2型人源分离株EF单克隆抗体的制备与鉴定 总被引:2,自引:1,他引:2
为了解猪链球菌2型(SS2)菌株毒力相关因子的致病机理,建立高效的免疫学检测方法,将SS2胞外因子(EF)抗原性强的区域通过基因克隆、原核表达,经亲和层析纯化的EF蛋白免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术将免疫细鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,建立了4株分泌抗EF蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2。间接ELISA测定杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶128~1∶512,诱生腹水的抗体效价为1∶104~1∶105。4株McAb腹水的Western blot鉴定表明McAb能特异性的识别EF。以2G1单抗腹水与和EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF。 相似文献
52.
从大肠杆菌K88(LT+,ST+)菌株中扩增热敏肠毒素B亚基基因(ltb),得到454 bp片段,克隆至pMD18-T载体后,与pET32a(+)定向连接,并转化入大肠杆菌BL21中,用IPTG 30℃诱导表达重组LTB蛋白。SDS-PAGE显示,重组蛋白分子量约为34 kDa,超声波裂解后,表达产物主要以包涵体形式存在。经鉴定,纯化复性后的LTB蛋白保留部分与GM1结合的生物学活性。 相似文献
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<正> 病毒性疾病的诊断方法应具有快速、特异而又简便的特点,对兽医来说,还要考虑费用应低廉,与性畜自身的价值成适当的比例。当然,在实际工作中不容易面面俱到。病毒诊断有两方面,一是检测病毒抗原,另一是检测病毒抗原诱导产生的特异抗体。此外,近年来还 相似文献
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一个牧场盈利能力的大小取决于牧场的整体管理水平,而整体管理水平的高低在很大程度上取决于牧场每天的数据积累和分析,从大量数据分析中看问题,而避免问题的持续存在,难就难在如何发现问题。本文所要阐述的就是这个观点,下面通过一个实在的案例,将这一观点带给广大的养牛户。 相似文献
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58.
20 0 3年 1月初 ,气温骤降 ,为历年少见的低温阴雨天气。南宁市郊某个体猪场因保温设施不完善 ,中、小猪群普遍出现腹泻 ,继而咳嗽、消瘦、倒地不起、急性死亡。用卡那霉素、庆大霉素、链霉素治疗 ,效果不佳。笔者根据临床症状、病理剖检、实验室检验结果诊断为大肠杆菌病并发巴氏杆菌病 ,经采取及时有效的综合防治措施 ,疫情很快被控制。现将诊治情况报告以下 :1 发病情况2 0 0 3年 1月初 ,南宁市为历年少见的低温阴雨天气。该猪场的中、小猪出现拉痢 ,保育猪尤为严重。到 1月中旬 ,保育猪部分出现咳嗽 ,倒地不起等病症 ,用卡那霉素、庆大霉素、链霉素进行肌注 ,同时进行补液治疗 ,效果不佳 ,病猪数量不断增加。至 2月 10日止 ,全场保育猪3 2 6头中有 92头猪发病 ,死亡 7头 ,病死率为7 61%。2 症状病猪拉痢 ,渐消瘦 ,被毛粗乱 ,行走步样不稳 ,倒地侧卧 ,四肢游泳状划动 ,触及敏感 ,吼叫 ,耳尖红紫色 ,眼睑水肿 ,周围粘附多量分泌物 ,腹式呼吸 ,咳嗽 (早上喂食前较为明显 )。体温在 3 9 5~ 42℃不等。病程多为 3~ 12天 ,最急性的发病 2 -3小时死亡。3 病理剖检... 相似文献
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1材料与方法 1.1材料 1.1.1设备与器材:生化培养箱、高压灭菌器、放大镜、玻璃平皿等。1.1.2 试剂:营养琼脂购自杭州天和微生物试剂有限公司公司。1.2方法 1.2.1培养基制备:称取营养琼脂干粉,置三角烧瓶中,加入蒸馏水,混匀后灭菌,121℃15min。将灭菌后培养基冷却至60℃左右,倒平板。 相似文献
60.
猪链球菌耐药性产生对其毒力的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
为探讨猪链球菌2型菌株耐药性产生对其毒力的影响,作者采用次抑菌浓度的青霉素和红霉素诱导猪链球菌2型临床分离敏感株HA9801成为青霉素、红霉素耐药株,并对亲本株与诱导耐药株的半数致死量(LD50)、溶血环、毒力因子溶菌酶释放蛋白(MRP)、胞外蛋白因子(EF)和荚膜多糖(CPS)及对小鼠的组织损伤进行比较。结果显示:次抑菌浓度的红霉素和青霉素可以诱导耐药性的产生,但耐药株与亲本株比较,溶血性、LD50、MRP、CPS、EF及对组织的损伤程度均与亲本株无显著差异(P〈0.05)。结果表明:猪链球菌2型HA9801株在获得耐药性的同时,仍能保持与亲本株相似的毒力,其毒力不会因耐药性的获得而降低。 相似文献