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131.
【目的】克隆骆驼补体C3d基因,分析序列特征,为其佐剂效应研究提供依据。【方法】利用Trizol试剂,从骆驼肝脏组织提取总RNA,并反转录获得cDNA。设计C3d特异引物,应用PCR技术扩增C3d序列,构建到pMD18-T载体。将重组质粒转入感受态菌株并双酶切鉴定。使用ClustW,DNAstar, Swiss-Model软件对构建的重组C3d基因序列进行同源性比对,建立系统进化树并对其二级和三级结构进行预测和分析。【结果】采用骆驼C3d特异引物,PCR扩增获得大小为909 bp的骆驼补体C3d基因。构建至T载体并转入大肠杆菌,获得阳性转化克隆。克隆的新疆双峰驼C3d序列与骆驼科C3d基因之间的同源性在97%以上,与牛和猪C3d基因同源性为88%,与兔和人的C3d基因同源性为83%。对骆驼C3d蛋白采用Swiss-Model软件进行序列分析,预测该蛋白质的二级结构主要由α-螺旋和β-折叠组成,该蛋白可能具有良好的免疫原性和免疫结合活性。【结论】C3d基因在进化中较为保守,在骆驼免疫中可以采用亲缘关系较近的其他动物来源的C3d作为分子佐剂从而增强骆驼免疫效果。 相似文献
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为了解新疆伊犁入境人员携带禁止入境的动物性食品中食源性细菌和化学污染物状况,抽检了2016年上半年霍尔果斯口岸截获的部分动物性食品,包括肉灌肠10份、马肉罐头10份、牛奶饮料5份、食用动物油16份、蜂蜜5份、罐头鱼子酱7份、盒装鱼子酱3份、奶油10份,共计66份样品。检测项目有重金属铅含量、添加剂亚硝酸盐含量、微生物污染大肠菌群、致病菌沙门菌和产志贺毒素大肠埃希菌。检测结果表明,沙门菌检出5份,其中马肉罐头、奶油和蜂蜜中各检出1株,食用动物油检出2株,检出率7.5%,其余检测项目结果均低于《食品中致病菌限量》(GB/29921—2013)、《食品中污染物限量》(GB/2762—2012)等国家标准中的限定值。新疆伊犁入境人员携带的动物性食品中,食源性细菌污染问题较突出。 相似文献
133.
应用TaqMan荧光定量PCR检测H3N8亚型马流感病毒 总被引:1,自引:1,他引:1
为建立马流感病毒(ETV)的检测方法,本试验针对H3N8亚型ETV血凝素(HA)基因高度保守序列设计并合成了2对引物和1条TaqMan荧光探针,建立了TaqMan荧光定量PCR方法.经用TaqMan荧光定量PCR、RT-PCR和病毒分离方法分别检测新疆等省135份疑似EIV马鼻拭子样品,其结果表明:3种方法的马流感检出率分别为54.07%、37.78%、0.89%;TaqMan荧光定量PCR可检出马流感病毒基因组RNA的灵敏度可达10拷贝/反应.而且与其他马呼吸道病毒均无交叉反应,具有良好的特异性、敏感性和重复性.该方法为H3N8亚型马流感的早期诊断及分子流行病学调查等提供了一种新的快速、准确的定量检测技术. 相似文献
134.
135.
136.
选择不同种植年限的蔬菜大棚以及一般农田和露天菜地进行分析,对其土壤pH值,有机质、土壤全N等主要成分进行测定,分析种植年限对蔬菜大棚的土壤肥力影响.通过本次研究发现,与露天菜地和一般农田相比,蔬菜大棚的pH值相对较低,并且随着种植年限的增加,蔬菜大棚会逐渐出现酸化,种植时间超过3年蔬菜大棚土壤就会出现明显的K含量下降、... 相似文献
137.
138.
139.
140.
肉牛养殖良好的话能获得约2000元左右的收入,为基层牧民增收的重要保障.文章自育肥牛的管理技术和饲养技术两方面,就提升育肥牛的饲养管理效益提供理论和技术指导,以供参考和借鉴. 相似文献