重组牛α-干扰素的原核表达与纯化

为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。     

非洲猪瘟病毒VP73蛋白在昆虫细胞中的表达与间接ELISA方法的建立

为了建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)间接酶联免疫吸附试验(iELISA),利用杆状病毒表达载体pFastBac HTA在昆虫细胞Sf9中表达非洲猪瘟病毒的VP73蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测显示重组蛋白大小约65ku,能与ASFV标准阳性血清发生特异性结合。以此重组蛋白作为检测抗原包被酶标板,初步建立了检测ASFV血清抗体的iELISA方法。表达的重组蛋白具有良好的特异性,为制备ASFV免疫血清学诊断检测试剂和疫苗提供了材料。     

水产养殖的危害源分析

工业的“三废” ,农业的杀虫剂 ,城市的废弃物 ,以及水产养殖本身的微量元素超剂量使用和药物的滥用 ,使水环境与水产品受到污染。主要危害源包括 :重金属、氨氮亚硝酸盐氮 ,以及药物残留和矿物磷等。这些危害不仅对水产养殖构成危害 ,而且危及人类健康。     

疑似鸡新城疫病的诊治

（一）发病经过2010年7月,家住巴林右旗大板镇的一养殖户,饲养海兰褐蛋鸡5000只。160日龄时发病,至170日龄出现零星死亡,送旗化验室检验,根据临床症状、病理变化、镜检结果怀疑为鸡新城疫病,后经对症治疗得到控制。     

酶联免疫法(ELISA)检测饲料中黄曲霉毒素B1

本文介绍了利用ELISA法的黄曲霉毒素B1(AFB1)试剂盒测定饲料中黄曲霉毒素B1的含量。样品经处理后,用甲醇水溶液提取饲料中黄曲霉毒素,提取液经过过滤、稀释后,用酶联免疫法直接测定。加标回收测定,平均加标回收率89%～93%,用酶联免疫法进行定性、定量测定,其特异性强,分析速度快,污染小,简化提取和纯化步骤,结果易判读。     

中秋蚕中肠型脓病的发生与防治

2002年我县遭遇百年大旱,降水量364mm,比往年减少38%。中秋蚕共饲养893张,产茧2.6万kg,较往年减产25%。全县有30%的养蚕户不同程度的发生了中肠型脓病,有的蚕农绝产,严重挫伤了蚕农的积极性。蚕农反映,这几年蚕儿越来越难养了,特别是夏秋蚕、蚕病多,张产低,收入少。我们分析了发病原因及防治方法。1发生原因1.1消毒不严格病原大量存在是发病的首要因素。大多蚕农的房子即是蚕室,贮桑室、仓库,有的是住房等生活场所,养蚕前要进行彻底的清扫,消毒较困难,有的消毒只消地面,房顶,墙壁不消。消毒药液不称量,药液达不到消毒的浓度要求,有的两种药…     

铜绿假单胞菌OprL基因DNA疫苗的免疫效果

为研究铜绿假单胞菌OprL基因DNA疫苗在小鼠体内的免疫效果,本研究利用PCR技术扩增得到铜绿假单胞菌的OprL基因,将其克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)中构建重组质粒pOPRL。将BALB/c小鼠分为5组,分别免疫pOPRL、油乳剂灭活疫苗、OMP疫苗、pcDNA3.1(+)空载体和PBS。每两周免疫一次,共免疫3次。间接ELISA检测免疫后血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,双抗夹心ELISA检测IFN-γ分泌情况,计算强毒攻击后各组小鼠的存活数及保护率。结果表明,随着免疫次数的增加,pOPRL、灭活疫苗和OMP疫苗免疫组小鼠产生的抗体水平逐渐升高,与两对照组相比差异极显著(p0.01),且灭活疫苗组和OMP疫苗组小鼠血清抗体水平高于pOPRL组(p0.05);灭活疫苗组和OMP疫苗组小鼠脾淋巴细胞的刺激值(SI值)和IFN-γ水平也高于pOPRL组(p0.05);pOPRL组、灭活疫苗组和OMP疫苗组对小鼠的保护率分别为53.3%、86.7%和73.3%,表明pOPRL疫苗虽可为小鼠提供一定的保护,但效果不如传统的灭活疫苗,还需采取措施进一步增强其免疫原性。     

控制PED病毒需要一个完善的生物安全策略

<正>猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhoea,PED)是一种只影响养猪生产的疾病,对人类健康没有影响。猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhoea,PED)是一种只影响养猪生产的疾病,对人类健康没有影响。PED于20世纪70年代开始在欧洲暴发,之后传播到东南亚与中国。美国的首次发病于2013年4月发生在俄亥俄州,之后传播到墨西哥与加拿大。     

红心火龙果品质及产量对稻壳有机肥施用量的响应

本研究通过探索红心火龙果营养品质和产量对稻壳有机肥施用量的响应,旨在为红心火龙果的施肥管理提供参考.以5年生'台农二号'红心火龙果为供试材料,设置3个稻壳有机肥施用水平(低施肥量L:22500 kg/hm2;中施肥量M:45000 kg/hm2;高施肥量H:90000 kg/hm2),调查火龙果全年各批次果实的还原糖、...     

干热河谷不同滴灌模式对鲜食大豆生物量分配、产量及水分利用效率的影响

为了优化干热河谷鲜食大豆滴灌模式,以鲜食大豆(G1005)为试验材料,采用大田试验,研究了不覆膜充分滴灌(T1)、膜下充分滴灌(T2)和膜下控墒滴灌(T3)3种滴灌模式对鲜食大豆生物量及分配、产量和水分利用效率的影响。结果表明:(1)不同滴灌模式对鲜食大豆生物量及其分配比例产生显著影响,与T2相比,T1处理显著降低了鲜食大豆荚果生物量及其分配比例,T3处理显著增加鲜食大豆荚果生物量及其分配比例。(2)不同灌溉处理对鲜食大豆各部分生物量异速生长指数产生影响,与T2相比,T1处理荚果-根、荚果-茎、荚果-叶异速生长指数均增大,荚果生物量增长程度大于营养器官生物量增长量;T3处理叶-茎、叶-根、茎-根异速生长指数接近1,改变了根、茎和叶生长轨迹,促进鲜食大豆营养器官间生物量均衡分配。(3)不同灌溉处理对鲜食大豆产量产生影响,与T2相比,T1处理显著降低了鲜食大豆豆荚产量和灌溉水利用效率,T3处理豆荚产量变化不明显,但灌溉水利用效率明显提高。这表明T3处理通过增加生物量,平衡营养器官间生物量分配,增加了荚果生物量分配,进而提高荚果产量,提高灌溉水利用效率。