人泛素结合酶UbcH5c活性突变体的构建·纯化以及催化活性研究

[目的]构建人泛素结合酶UbcH5c的活性位点突变体S22R和F62A,同时分析这2种突变体蛋白与野生型蛋白在泛素化反应中的活性差异。[方法]通过点突变(Site-Directed Mutagenesis)的方法构建2种突变体质粒,利用0.5 mmol/L IPTG分别诱导2种突变体蛋白在大肠杆菌中进行表达;将菌体超声破碎后,依次利用阳离子交换层析法对UbcH5c突变蛋白进行分离纯化,最后利用体外泛素化酶促反应结合蛋白免疫印迹杂交的方法分析野生型UbcH5c与其活性突变体UbcH5c S22R和UbcH5c F62A在泛素化修饰上的差异。[结果]人泛素结合酶UbcH5c的2个突变体蛋白S22R、F62A的泛素化修饰程度明显弱于野生型蛋白。[结论]突变体S22R和F62A突变均不同程度的改变了人泛素结合酶UbcH5c与泛素分子之间的结合活性,即2个突变的位点中第62位苯丙氨酸残基及第22位丝氨酸残基均是UbcH5c结合泛素的关键位点,而且后者对于UbcH5c结合泛素活性的影响更大。     

青薯10号马铃薯种薯繁育技术

由于种薯繁育技术条件的限制,青海省极大部分地区马铃薯单产水平普遍偏低、品种混杂退化较重,这严重制约农业经济收入的增长,已成为青海省马铃薯产业发展的瓶颈。同时马铃薯用种量大,繁殖系数很低,所以一个新品种要在生产中得到应用,最少要需8~10年的时间。如果采取种薯快繁的方法,可以提高繁殖系数50~100倍,可使新品种提前3~5年在生产中应用。     

袋料杏香蘑栽培新技术

近年来国内外市场,杏香蘑产品十分紧缺,对杏香蘑需求量不断增大,具有良好的发展前景。更快地推广杏香蘑栽培新技术,尽快缓解国内外市场产品的紧缺。从栽培季节选择、原料选择与处理、配方、拌料、装袋、灭菌、发菌、催蕾、出菇管理、采收等栽培技术。     

当前林区治安形势与对策研究

随着林区社会、经济发生深刻变革,破坏森林和野生动植物资源犯罪也随之发生变化。在此情况下,森林公安机关不仅要敏锐地捕捉到这些变化,而且必须根据这些变化,建立健全预防和打击违法犯罪的有效机制。一、林区治安形势分析     

培育大规格鱼种的关键措施

鱼种是养鱼稳产、丰产的前提条件。实践证明，大规格鱼种对环境的适应、抗病和摄食能力强，成活率高，起捕规格大，有利于达到高产、稳产目的。因此培育大规格鱼种非常重要。     

猪肌肉发育调控和高瘦肉率基因改良猪的研究进展

猪肉的产量和质量与肌肉发育过程紧密相关。肌肉发育包括胚胎期肌纤维的形成、出生后肌纤维的发育和成年期肌肉的再生等步骤,该过程受到转录水平、转录后水平及通路水平等多层次的网络调控。本文以猪肌肉发育过程为切入点,重点讨论了调控猪肌肉发育的分子基础和高瘦肉率基因改良猪的研究进展,为进一步培育优质猪肉和高瘦肉率猪品种提供了参考。     

故障两例

缸盖镶块小孔常堵塞一台小四轮拖拉机每工作３ｈ左右，缸盖镶块小孔就被积炭塞满。检查喷油嘴、柱塞、出油阀等有关部件正常，仔细检查才发现原来是在进行节能改造时，供油时间角迟后１０度左右造成的，按规定调整了供油时间角度后拖拉机工作正常了。单缸工作一台东方红－...