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鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1、N和M基因的克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:将IBVSX16株的S1、N和M基因克隆入真核表达载体pVAX1,构建IBV真核表达载体pVAX1-16S1、pVAX1-16N和pVAX1-16M。体外转染BHK-21细胞,用间接ELISA检测到目的蛋白表达,用构建的3个表达载体免疫小鼠,从小鼠血清中检测到了抗IBV抗体,初步证实用IBVS1、N和M基因作为核酸疫苗免疫动物,可以激活机体免疫应答。 相似文献
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以栽培2个月的黄参为试材,设置对照(土壤相对含水量70%~80%)和适度干旱胁迫(土壤相对含水量55%~60%)处理,利用高通量转录组测序BGISEQ-500平台,对测序结果进行基因功能注释、差异表达基因(DEGs, differentially expressed genes)筛选。结果表明:(1)获得的68193条Unigene中,分别有34230(50.20%)、34170(50.11%)、31727(46.53%)、27701(40.62%)、27092(39.73%)和22793(33.42%)个Unigene分别被分配到NCBI非冗余蛋白(NR)、eggNOG(基因的进化谱系, Evolutionary genealogy of genes: Non\|supervised Orthologous Groups)、基因本体(Gene ontology,GO)、Pfam (Protein family)、SwissProt (Reviewed protein sequence database)和KEGG (Kyoto encyelopedia of genes and genomes)六大功能数据库。(2)DEGs分析显示,黄参块状根和叶中分别有10674个和13402个DEGs;GO富集结果表明,根和叶中的DEGs功能部位中的分布基本一致,主要富集在生物过程、DNA的复制和翻译调控、氧化还原过程、蛋白质磷酸化、防御响应等;KEGG富集分析表明,根中DEGs显著富集在苯丙烷类生物合成、半乳糖代谢、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、植物-病原菌相互作用、植物激素信号转导等途径,叶中DEGs则主要富集在半乳糖代谢、淀粉和蔗糖代谢、苯丙烷类生物合成、戊糖、葡萄糖醛酸转换、植物激素信号转导等途径,说明淀粉和蔗糖代谢、半乳糖代谢、苯丙烷类生物合成途径、植物激素信号转导途径在黄参应对干旱胁迫中起重要作用。干旱胁迫影响黄参不同器官中差异基因的表达,为解析黄参耐受干旱的生物学途径、黄参药效成分的生物合成和分子机制提供了理论依据。 相似文献
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犬瘟热病毒F1基因的原核表达与初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
将犬瘟热病毒(CDV)F1基因定向克隆入pET-28a( )载体.构建了原核表达质粒pET-28F1。pET-28F1转化宿主菌BL21(DE3)plysS.在IPTG的诱导下.可高效表达目的基因,表达量达菌体蛋白总量的23.52%。Western blot分析表明,所表达蛋白能与抗CDV阳性血清发生特异性的抗原-抗体反应。以E.coli表达的CDV F1蛋白为抗原.HRP标记的兔抗犬IgG为二抗.建立了检测抗CDV抗体的间接ELISA方法。试验表明.应用CDV F1蛋白作为抗原检测抗CDV抗体具有特异性高、抗原易纯化、成本低等特点。 相似文献
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为探索优化张掖市马铃薯施肥技术,提高栽培效益,减少农业面源污染,张掖市耕地质量建设管理站在2019—2020年试验研究了不同施肥组合模式对马铃薯产量及耕地质量的影响,通过施用有机肥料、土壤调理剂、绿肥还田、化肥以及不同组合模式和不同组合变化因子对土壤养分、土壤质量、马铃薯经济性状、产量等方面的影响。结果表明:有机肥+土壤调理剂+绿肥还田+常规施肥组合下马铃薯增产最高,土壤有机质、全氮、有效磷、速效钾、土壤容重、孔隙度都有不同程度改善,经济效益明显,土壤改良效果突出。 相似文献
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1梨黑星病1.1症状。梨黑星病主要为害果实、叶片、叶柄、新梢。果实发病初期生淡黄色、蝇头大小的圆形病斑,逐渐扩展到5~10mm,病部稍凹陷,病斑上出现黑绿色霉层,黑霉就是病菌的分生孢子层,病斑木栓化,坚硬龟裂,病疤附近的果肉变硬,并带苦味,如幼果期受害,常引起果实畸形。 相似文献
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荒漠化地区温室黄瓜水肥耦合效应量化指标研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用三因素二次回归通用旋转组合设计,研究了灌水量、氮肥、钾肥的耦合效应对黄瓜的影响,得到黄瓜产量对三因素的回归数学模型。结果表明:三因素影响黄瓜产量的顺序为施氮量灌水量施钾量。各因素间存在交互作用,H2O与N、H2O与K2O、N和K2O在低于0.500和1.682、0.500和0.501、1.682和-1.351水平时对产量存在正相关关系,在分别高于以上水平时又会呈负相关关系。经过计算机模拟,得到黄瓜最高产量达88.74thm-2时,相对应的灌水量、施氮量、施钾量分别为1620m3hm-2、1070kghm-2、682kghm-2。对试验结果进行的验证表明,构建的模型准确可靠。 相似文献
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首次对犬冠状病毒V1野毒株核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定.根据GenBank中报道的CCV Insavc-1株N基因序列,设计了1对特异性引物,对分离的CCV V1野毒株进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的阳性PCR片段经纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pTN1,进行核苷酸序列测定,并与GenBank中CCV标准毒株Insavc-1 N基因进行了比较.结果该基因全长为1 146 bp,编码382个氨基酸,两者核苷酸的同源性为91.7%;推导的氨基酸序列的同源性为90.2%,显示出较高的保守性.在V1野毒株推导的N蛋白N端156-179位存在一个SRXX富集区,与小鼠肝炎病毒相应区域相同,推测可能是RNA结合区.另外,推导的该蛋白氨基酸序列其疏水性和抗原表位与标准毒株Insavc-1 N蛋白存在一定的差异;在氨基酸组成上,该蛋白丝氨酸和赖氨酸含量高达9.84%,提示该蛋白具有高度螺旋和缠绕的分子结构. 相似文献