全文获取类型
收费全文 | 314篇 |
免费 | 2篇 |
国内免费 | 9篇 |
专业分类
林业 | 6篇 |
农学 | 8篇 |
基础科学 | 8篇 |
3篇 | |
综合类 | 51篇 |
农作物 | 4篇 |
水产渔业 | 1篇 |
畜牧兽医 | 237篇 |
园艺 | 6篇 |
植物保护 | 1篇 |
出版年
2023年 | 7篇 |
2022年 | 10篇 |
2021年 | 7篇 |
2020年 | 11篇 |
2019年 | 7篇 |
2018年 | 17篇 |
2017年 | 2篇 |
2016年 | 2篇 |
2015年 | 5篇 |
2014年 | 3篇 |
2013年 | 7篇 |
2012年 | 19篇 |
2011年 | 17篇 |
2010年 | 16篇 |
2009年 | 12篇 |
2008年 | 13篇 |
2007年 | 9篇 |
2006年 | 22篇 |
2005年 | 18篇 |
2004年 | 14篇 |
2003年 | 16篇 |
2002年 | 7篇 |
2001年 | 19篇 |
2000年 | 23篇 |
1999年 | 16篇 |
1998年 | 5篇 |
1997年 | 2篇 |
1996年 | 5篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 2篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 1篇 |
1988年 | 1篇 |
1987年 | 1篇 |
1985年 | 3篇 |
1983年 | 1篇 |
排序方式: 共有325条查询结果,搜索用时 15 毫秒
41.
42.
一株新城疫病毒弱毒株的分离鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
于1996年8月从长春地区--养鸡场分离到一株新城疫病毒,该毒株经过鸡胚传代培养,病毒形态学观察,血凝谱测定、鸡胚平均致死时间试验、鸡脑内致病指数试验、脉致病指数试验及1入毒试验等生物学特性结果表明该新城商株为弱毒株。 相似文献
43.
H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒中的表达及检测 总被引:6,自引:3,他引:6
利用杆状病毒表达系统对H5亚型禽流感病毒HA基因在sf9细胞中的表达进行了研究。首先将pUCm—T—H5HA质粒用BamHⅠ及NotⅠ酶切,获得HA基因片段,同时杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ也用BamHⅠ及NotⅠ酶切,然后用T4DNA连接酶连接,构建了重组质粒pFastBac—H5HA。再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid—H5HA。将Bacmid—H5HA转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDS—PAGE和Western blotting检测表明,HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达。 相似文献
44.
45.
采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒。以质粒模板建立PPV6的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证。结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320。该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL。该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%。本试验成功建立了PPV6SYBR Green I real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断。 相似文献
46.
本研究旨在通过敲除山羊痘病毒(GTPV)大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体.采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7~ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18~ORF19间1 355 bp的片段.接着分别以上述2片段作为左、右侧同源重组臂,构建了包含报道基因EGFP和抗性基因gpt的GTPV重组转移载体pCF-Eg.然后采用脂质体介导法,将重组转移载体pCF-Eg与GTPV AV41株共转染原代羊睾丸细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定重组病毒的遗传稳定性和生长特性.结果成功获得1株敲除掉ORF8~ORF18间9个ORF、长达7 kb基因组片段的重组病毒vCF-Eg.该重组病毒能稳定表达绿色荧光蛋白至少10代,并且其增殖滴度与亲本毒株基本相同.表明上述区域是GTPV的复制非必需区. 相似文献
47.
将禽流感病毒(AIV)H5、H7、H9血凝素亚型标准血清中的IgG作为包被抗体,H5、H7、H9血凝素亚型单克隆抗体作为第二抗体,建立了双抗体夹心ELISA(AC-ELISA)方法,并优化了反应条件.结果表明:单抗和标准血清最适工作质量浓度分别为5、10 mg/L,标准阳性血清于4℃包被12 h,二抗作用条件为37℃作用1 h,封闭条件为37℃作用1 h,酶标抗体工作条件为1∶5 000稀释后,37℃作用1 h,底物作用条件为37℃作用10 min.阴阳性抗原临界值为0.274~0.332.本方法具有很高的特异性和敏感性. 相似文献
48.
胶体金方法检测H3和H7亚型禽流感病毒 总被引:4,自引:0,他引:4
用微波法制备金溶胶,对禽流感病毒(AIV)H3和H7亚型单克隆抗体(H3-1D6和H7-1F7)用亲和层析法进行纯化,优化单抗与金溶胶的最佳结合条件后,喷涂于玻璃纤维上制成金标垫.将纯化的马抗H3和H7亚型AIV多克隆抗体和山羊抗鼠二抗分别包被于硝酸纤维素(NC)膜上作为检测线和质控线,制备胶体金检测试纸条.用制备的试纸条对H3和H7亚型AIV标准抗原、毕赤酵母真核表达蛋白和已知样品进行检测,结果与血凝试验、血凝抑制试验、AC-ELISA和RT-PCR方法相符.同时用该方法对H5和H9亚型AIV标准抗原、病料以及传染性支气管炎、新城疫等抗原进行检测,结果均为阴性.该方法操作简单,肉眼于10 min内可判定结果,且达到了血凝试验和血凝抑制试验的敏感性. 相似文献
49.
50.
一目前我国动物防疫形势 1 动物疫病和药物残留已成为阻碍我国养殖业健康发展的重要因素 在过去20年间我国的肉类增加了4倍多,从1980年的1450万吨猛增到2000年的6270万吨,从占世界总产量的10.6%跃升到279%,成为肉类第一生产大国。然而我国猪、牛、羊、禽等的死亡率高出发达国家1倍以上。权威机构估计我国每年因畜禽死亡造成的损失为260~300亿元,另外由于疫病引起的生产性能下降、兽医卫生和其他损失约700亿元。 相似文献