叶用莴苣无缝克隆构建LsE3基因过表达载体和新RNAi载体及遗传转化体系优化

研究旨在应用新技术和新载体构建过表达和沉默载体,优化遗传转化体系,验证生菜LsE3基因功能,探究高温抽薹机制。以pCAMBIA1304和pFGC5941载体为材料,通过无缝克隆构建叶用莴苣转基因载体,并通过筛选培养基配方优化遗传转化体系。试验成功地以pCAMBIA1304为基础,插入源自pFGC5941的dsRNA表达框序列,获得了新RNAi空载pCAMBIA1304- FGC5941,构建了LsE3沉默载体,并成功以双元质粒载体pCAMBIA1304构建了LsE3过表达载体。试验对易抽薹叶用莴苣品种‘GB-31’进行潮霉素浓度、直接芽诱导培养基配方和生根培养基配方的筛选,确立了潮霉素适宜筛选浓度为5 mg/L,并确立了最优培养芽诱导和生根培养基配方。试验成功获得新RNAi空载并构建了转基因载体,优化了遗传转化体系,为解决载体构建繁琐复杂的问题提供新思路,并奠定了生菜转基因技术的基础。     

黄芩中黄酮化合物提取检测研究进展

黄芩是中国的传统中药材，具有较高的药用价值。为了从黄芩中提取检测黄酮类物质，归纳总结了黄芩根部及地上部黄酮化合物的提取方法，主要有有机溶剂萃取法、水提取法等；分析了黄芩根部及地上部黄酮化合物的分离纯化方法，主要有柱层析色谱法、高速逆流层析法等；梳理了黄芩根部及地上部黄酮化合物的成分测定方法，有高效液相色谱法、超高效液相色谱法等，并针对黄芩在实际应用中存在的问题提出改善建议，如将实验室研究与工业化生产紧密结合，完善实验设备和提取工艺，更好地为工业生产提供便利；充分利用黄芩资源，创造社会效益等。本文在分析黄酮化合物的基础上，综述了黄芩根部及地上部的黄酮化合物的提取、分离及检测方法的研究进展，为黄芩中黄酮的大规模开发与应用提供技术储备，为进一步研究和推广应用黄芩资源奠定技术基础。