HA蛋白多肽抗体的设计、制备与鉴定

利用人工合成的多肽制备HA的特异性多克隆抗体,以期用于HA基因的免疫调控机制研究。根据GenBank中报道的皮蝇素A（HyderminA,HA）一级结构信息以及HA抗原生物学信息,获得三段序列特异性较高的多肽,采用9一氟甲氧羰基固相合成法获得多肽,采用HPLC和LC·MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达91．2％、目的多肽分子量为28kD。将多肽与KLH进行偶联,并用其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体。采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别HA特异性条带,其相对分子量为28kD,与预测分子量相符。该抗体的制备为研究HA免疫调控机制提供了有用工具。     

五种抗球虫药对肉鸽球虫病的防治研究

为筛选有效的抗鸽球虫药物,选用地克珠利(1 mg/kg)、磺胺喹恶啉钠(300 mg/kg)、磺胺氯吡嗪钠(300 mg/kg)、托曲珠利(25 mg/kg)、白头翁散(500 mg/kg)等5种抗鸡球虫药物进行了本试验,试验重复3次,每次分为用药感染组和不用药感染组,人工感染主要含有拉氏艾美耳球虫和鸽艾美耳球虫的混合孢子化卵囊,剂量为15×104个,以相对卵囊减少率作为抗球虫效果的指标。结果显示磺胺喹恶啉钠、磺胺氯吡嗪钠效果最好,相对卵囊减少率分别为99.9%和99.5%;其次是托曲珠利、白头翁散,相对卵囊减少率分别为96.7%和92.0%;地克珠利效果最差,相对卵囊减少率仅为75.6%。     

上海市鸽球虫感染情况初步调查与种类鉴定

为了调查上海市鸽球虫的感染情况和种类,分别采集奉贤区肉鸽场和信鸽场的110份和44份粪便,以及南汇区肉鸽场的100份粪样,采用麦氏虫卵计数法对粪便球虫卵囊进行计数,收集阳性粪便中的卵囊,经孢子化后进行种类鉴定。结果显示,上海市鸽球虫的平均感染率为52.8%(134/254),平均每克粪便卵囊数(oocyst per gram,OPG)为50 159个,为中度感染。肉鸽感染率(55.2%)和平均OPG(52 110个)均高于信鸽(40.9%和37 583个),奉贤肉鸽感染率(60.9%)高于南汇(49.0%),但南汇肉鸽的OPG(88 634个)明显高于奉贤(25 400个)。从肉鸽阳性粪便中鉴定出5种球虫,即拉氏艾美耳球虫(Eimerialabbeana)、鸽艾美耳球虫(E.columbae)、原鸽艾美耳球虫(E.columbarum)、杜氏艾美耳球虫(E.duculai)以及卡氏艾美耳球虫(E.kapotei),拉氏艾美耳球虫为优势种。在信鸽阳性粪便中鉴定出4种球虫,即拉氏艾美耳球虫、杜氏艾美耳球虫、鸽艾美耳球虫以及原鸽艾美耳球虫,原鸽艾美耳球虫为优势种。本次调查表明上海市肉鸽和信鸽的球虫感染率和粪便OPG均偏高,调查结果为及时做好鸽球虫病的防治提供了基础数据。     

某规模化猪场猪瘟、蓝耳病及伪狂犬病抗体检测与分析

为应用酶联免疫分析(ELISA)试剂盒,分别对某规模化猪场送检的70份血清进行猪瘟病毒抗体、猪蓝耳病病毒抗体、猪伪狂犬病病毒g B抗体检测和猪伪狂犬病病毒g E抗体检测。结果显示,上述4种试剂盒检测,阳性率分别为72.9%、90%、58.6%和1.4%。据此对该猪场免疫状况进行了分析。     

四川宜宾地区规模猪场腹泻仔猪大肠杆菌耐药性监测及血清型鉴定

为有效监测四川宜宾地区规模化猪场仔猪大肠杆菌耐药性及优势血清型变化,对采自该地区腹泻仔猪的38株大肠杆菌进行药物敏感性检测和O抗原血清型鉴定。结果表明,菌株对14种药物存在不同程度的耐药性,其中对氨苄西林、林可霉素、四环素和磺胺嘧啶极度耐药,耐药率分别为100%、100%、92.11%、89.47%;敏感性最高的是庆大霉素,敏感率为68.42%,氧氟沙星、丁胺卡那、环丙沙星和氟苯尼考相对比较敏感;所有菌株至少对4种药物耐受(4耐),最高达14耐。通过血清型鉴定,确定了15种血清型,共27株大肠杆菌,其中以O60、O101和O8为优势血清型。     

银合欢育苗造林技术

指出了银合欢生长迅速、耐旱力和适应性特强,为荒山造林的先锋树种,银合欢适应土壤条件范围很广,以中性至微碱性土壤最好,在酸性红壤土上仍能生长,适应pH值在5.0～8.0之间。在石山的岩石缝隙中,只要潮湿也能生长。银合欢适宜种植在海拔300～1500 m,年雨量500～1800 mm的地区,目前,在中国台湾、福建、广东、广西和云南都有分布,生于低海拔的荒地或疏林中。探讨了银合欢的育苗技术,以供参考。     

柔嫩艾美耳球虫抗马杜拉霉素、地克珠利虫株特异消减文库的构建

 以遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）敏感株孢子化卵囊为驱动组，马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊为试验组，利用抑制消减杂交（SSH）方法，通过两轮杂交和两次PCR分别构建了富含两个抗药株孢子化卵囊与敏感株孢子化卵囊之间差异表达基因的消减cDNA文库。随机从两个消减文库中分别挑取50个克隆，经PCR鉴定马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊的消减文库重组率分别为96%和98%，差异基因片段大小分布在250 bp～1.0 kb之间。从每个文库中随机挑取65个阳性克隆经斑点杂交试验，分别选择表达量上调的6个克隆进行序列分析和同源性比较。结果发现，有4个cDNA片段可能是新基因片段，与地克珠利抗药株的产生有关；有3个新的cDNA片段可能与马杜拉霉素抗药株的产生有关。这些结果将为克隆全长cDNA和探索球虫抗药性产生及发展的分子机理奠定了一定的基础。     

海底输油管道阴极保护数值模拟

海底输油管道通常埋设在海底淤泥中,随着时间推移,海床的变化使得部分海底管道出现悬空,直接与海水接触,而海底管道在海水与海泥中的阴极保护和腐蚀状态不一样。通过建立数学模型,确定边界条件,利用有限元方法分别对海底管道在海水和海泥中的阴极保护情况进行数值模拟分析。结果表明:管道在海泥中的电位变化较小且较稳定;管道在牺牲阳极阴极保护下,海水和海泥中的腐蚀速率分别为0.064μm/a和0.053μm/a,远小于没有牺牲阳极阴极保护时钢结构在海泥区的平均腐蚀速率;牺牲阳极在海水中和海泥中的使用寿命分别为4.58年和13.3年。该结果可为海底管道腐蚀防护设计和安全管理提供理论参考。     

大菱鲆肠道乳杆菌Lactobacillus sp.N5的筛选鉴定及其抑制水产病原菌的研究

从大菱鲆（Scophthalmus maximus）肠道内分离出8株乳酸菌,经16S r DNA鉴定为Lactobacillus sp.,以对水产病原菌的抑制和对抗生素的敏感性为指标,研究乳酸菌的特性。其中,菌株N5对鳗弧菌（Vibrio anguillarum）、哈维氏弧菌（V. harveyi）、副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）均具有较强的抑制作用,对氨苄青霉素、庆大霉素和罗红霉素敏感。菌株N5发酵上清液经加热、排酸和过氧化氢酶处理后,仍有抑菌作用;经蛋白酶处理后失去抑菌能力,推测菌株N5分泌的抑菌物质为耐热的乳酸菌素,其可以抑制病原菌生物膜的形成。菌株N5在凡纳对虾（Litopenaeus vannamei）肠道定植5 d后,加入鳗弧菌和哈维氏弧菌,继续养殖7 d,死亡率显著降低。本研究结果可为菌株N5制备水产养殖益生菌剂提供实验依据。