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应用反向遗传技术对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株感染性克隆PBRN-FL质粒进行操作,构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSV LV株ORF5序列,设计引物扩增ORF5片段,通过PBRN-FL质粒上P和M基因间的PmeⅠ酶切位点插入目的片段,构建重组质粒LaSota-ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI-NP、PCI-P、PCI-L等3种辅助质粒共转染BSR-T7/5/细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot(WB)试验鉴定。结果显示:拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确,IFA出现绿色荧光,WB试验条带大小符合预期,证明GP5蛋白有效表达。结果表明:成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5,为制备表达PRRSV GP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。 相似文献
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目前在我国,有许多农民、蜂友主要靠听广播和看电视了解天气情况,我国地大物博,气象预报的准确率有限,蜂友们大多常处于转地养蜂之中,白天非常辛苦;蜂场设在野外,看电视和听广播局限性很大。据我所知在国内,还没有单位研究蜜蜂的生物学特征和天气及养蜂经济效益之间的紧密联系。为了让广大农民、蜂友更好地养好蜜蜂,我在研究蜜蜂育种高产的同时,对如何采用适当的新技术,利用蜜蜂活动情况,及时准确地预测天气,最大限度地减小因天气不良因素给养蜂带来的损失这一问题,进行了一些探索。通过20年来的观察、记录、对比,发现:蜜蜂活动与天气有着紧… 相似文献
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猪的耳静脉采血保定,过去一直是用人工将猪放倒捆绑或压伏方法,用此方法,稍有不慎,猪一抬头或一动,静脉采血就被迫中断。特别是对中、大猪保定起来十分困难。1990—1992年,我们对猪旋毛虫病进行疫情监测,曾先后采集猪耳静脉血5000余头份,逐渐摸索出一套种猪保定新方法,使用效果既快又省力又安全,现介绍如下: 一、材料 一根长1.5—2米,直径为 相似文献
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[目的]通过研究羊胎盘转移因子注射液对实验动物免疫球蛋白、B淋巴细胞和抗体形成细胞数量变化的影响,探讨受试药品对实验动物体液免疫的调节作用,进而评估其临床体液免疫调节的使用价值。[方法]试验1:用小白鼠进行免疫球蛋白测定试验,比较给药前后小白鼠血清免疫球蛋白的变化;试验2:用大白兔进行EAC玫瑰花环试验,测定给药前后B淋巴细胞数量的变化;试验3:用小白鼠进行溶血空斑试验,比较试验组和对照组抗体形成细胞数的变化。[结果]试验1:试验组小白鼠血清免疫球蛋白含量显著提高(P<0.05);试验2:试验组受试动物EAC玫瑰花环的成环细胞数显著高于对照组(P<0.05);试验3:试验组小白鼠抗体生成细胞的数量极显著增加(P<0.01)。[结论]羊胎盘转移因子注射液对受试动物体液免疫有显著调节作用。 相似文献
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