转基因抗草苷膦大豆对大鼠生理代谢的影响及外源基因水平转移研究

为了分析转抗草甘膦转基因大豆对大鼠生理代谢水平的影响及其内源和外源基因遗传转移的情况，选用32只SD大鼠，随机分成2组，分别饲喂含30％转基因抗草苷膦豆粕和含30％非转基因豆粕的大鼠配合饲料，连续饲喂30d。试验结果表明，与对照组相比，试验组大鼠体重，血清中尿素氮（SUN）、葡萄糖、天冬氨酸转氨酶（CPT）和血清总胆固醇均无显著差异（P〉0．05）。同时，利用定性PER方法检测试验大鼠的血液、肌肉、肝脏、胰脏、肾脏、胃及肠道内容物中的转基因豆粕内源基因和外源基因。结果表明，在用含转基因豆粕的饲料饲喂的大鼠胃、肠道内容物中发现了转基因豆粕的内源基闲和外源基因片段，而在其血液及各组织器官中则没有发现，说明短期内转基因豆粕的内源和外源基因在大鼠体内没有发生遗传转移。     

猪乳中一高分子量蛋白质的非血源性证据

【目的】探讨猪乳一高分子量蛋白质B（HMWP-B）是否来自于血液以及是否为猪乳所特有等问题。【方法】利用兔抗HMWP-B的多克隆抗体，通过免疫印迹实验来检测泌乳母猪血液中是否存在HMWP-B。【结果】实验结果证实HMWP-B在泌乳母猪血液中不存在，由此推测HMWP-B可能为来源于乳腺细胞自身合成而非血源性的乳蛋白；同时，结果还表明牛乳和兔乳中不存在HMWP-B，提示HMWP-B可能为猪乳所特有的乳蛋白。【结论】本实验为证明HMWP-B是由猪乳腺细胞自身合成而不是来自于血液的乳蛋白提供了一定的证据，这为深入开展该蛋白质的功能研究奠定了基础。     

大豆蛋白酶解物对21日龄早期断乳仔猪消化道发育的影响

以28日龄早期断乳仔猪为对照,研究了添喂大豆蛋白酶解物对21日龄早期断乳仔猪消化道发育的影响。结果表明,试验组仔猪胃内容物的胃蛋白酶总活性较对照组高3.22%,但差异不显著,十二指肠内容物胰蛋白酶总活性较对照组增高136.05%,差异极显著(P<0.01),十二指肠内容物淀粉酶活性和脂肪酶活性均极显著低于对照组(P<0.01);试验组仔猪胃窦黏膜厚度、中部十二指肠绒毛高度和隐窝深度以及中部回肠绒毛高度均极显著高于对照组(P<0.01),而中部十二指肠、前段空肠和中部回肠的绒毛宽度以及绒毛高度与隐窝深度之比值与对照组差异均不显著。     

卡介菌多糖核酸对内毒素诱发的实验性山羊乳腺炎乳腺组织的保护研究

【目的】本试验通过卡介菌多糖核酸对内毒素诱发的实验性山羊乳腺炎乳腺组织的保护研究，探讨灌注免疫增强剂BCG-PSN对乳腺组织的影响，研究调动乳腺自身的防御功能，以防治乳腺炎的发生。【方法】选取泌乳初期健康睢宁白山羊6只，左乳区经过乳头管灌注卡介菌多糖核酸5 ml，右乳区灌入5 ml注射用生理盐水作为对照，连灌6 d。第7天按50 µg•kg-1体重分别向左、右乳区灌注大肠杆菌内毒素。灌注前及灌注后0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、24 h观察山羊整体及乳房局部变化。灌注24 h后，处死动物，取乳腺组织，部分Bouin氏液固定、部分液氮保存。【结果】临床症状及病理切片观察均显示，山羊表现典型的急性乳腺炎症状。与灌注生理盐水对照相比，乳腺灌注卡介菌多糖核酸能显著降低乳腺组织中部分炎症相关因子的含量及其基因表达水平。其中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）、髓过氧化物酶（MPO）、碱性磷酸酶（AKP）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）活性显著降低（P<0.05）；IL-1β、TNF-α的含量及其mRNA表达水平均显著降低（P<0.05），IL-6的含量显著降低（P<0.05），其mRNA表达水平有所降低但差异不显著（P>0.05）。【结论】灌注卡介菌多糖核酸可以抑制乳腺组织内IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子及和炎症相关酶的过度释放、减轻炎症因子对乳腺上皮细胞的损伤，对内毒素诱发的山羊实验性乳腺炎有较强的保护作用。     

动物生物化学教学改革的探讨

以本科生必修课“动物生物化学”的教改为背景,从课程体系、课程内容、教学方法等方面进行了探讨,提出了“动物生物化学”教改的几项措施,并在教学中进行了尝试,收到了理想的效果。     

CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的大鼠实验性乳腺炎乳腺的保护作用

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),于产后0 h试验组每只肌注CpG-DNA 200μg,对照组肌注0.01 mol.L-1PBS(pH 7.2)100μL。两组于产后72 h均经乳头管灌注2×1012CFU.mL-1金黄色葡萄球菌,每侧各100μL到第4对乳腺内(两侧);分别于灌注前0 h,灌注后8、16、24、48和72 h(n=6)颈静脉放血处死。组织学观察显示,试验组乳腺腺泡内嗜中性粒细胞(PMN)在感染初期较对照组浸润迅速,试验组在72 h时已无PMN浸润,而对照组仍有浸润。与对照组相比,CpG-DNA能显著降低8、16和72 h的乳腺组织细菌数。IL-2水平在灌注后有显著下降,但与对照组相比CpG-DNA极显著提高乳腺组织0 h IL-2水平,显著提高16、24和48 h乳腺组织IL-6水平,显著降低48 h和72 h乳腺组织中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力。上述结果显示,CpG-DNA可促进炎症初期PMN的快速浸润,促进并加速细胞因子的产生及释放,减少乳腺组织细菌数量,减轻炎症介质对细胞的损伤,表明CpG-DNA对金黄色葡萄球菌感染诱发的大鼠乳腺炎有保护作用。     

大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响

分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞,用3H-TdR掺入法分别检测了0、0.1、1、10、100和1 000 ng&#183;mL-1 2种大豆异黄酮(大豆黄酮和染料木素)对该细胞生长的影响,并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化.同时,利用翻转的离体小肠囊研究了0、0.1、0.5、1和5 μg&#183;mL-1大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响,并检测了小肠黏膜总ATP酶活性的变化.结果显示:100 ng&#183;mL-1的大豆异黄酮(大豆黄酮、染料木素)能够提高该细胞3H-TdR的掺入量和碱性磷酸酶的活性,提示大豆异黄酮可能有促小肠细胞生长的活性;0.1和0.5 ng&#183;mL-1的大豆黄酮和0.5和1.0 ng&#183;mL-1的染料木素对离体小肠葡萄糖的吸收具有促进作用,而对赖氨酸与色氨酸的吸收以及小肠黏膜总ATP酶的活性没有明显影响.     

大鼠胃肠道食糜中β-Casomorphin-7样物质的酶联免疫吸附分析

利用建立的一种酶联免疫吸附试验 (ELISA)对大鼠胃肠道食糜中的 β 酪啡呔 7(β Casomorphin 7)样物质进行了检测分析。动物试验采用30只成年大鼠 ,随机分为 5组。对照组Ⅰ ,仅喂葡萄糖盐水 ;对照组Ⅱ ,喂大豆和饮水 ;试验组Ⅰ ,仅喂牛奶 ;试验组Ⅱ ,喂不含乳的普通饲料和饮水 ;试验组Ⅲ ,喂混有乳的普通饲料和牛奶。各组均自由采食 ,4d后处死。采集胃和十二指肠食糜 ,对其中 β Casomorphin 7样物质进行定量分析。结果 :在试验组Ⅰ和Ⅲ大鼠的胃、十二指肠食糜中检测到显著量的 β Casomorphin 7样物质 ,平均含量分别为 (1 60 52± 1 0 1 9) ,(1 0 6± 6 85)ng/g和 (2 2 0 48± 1 1 91 ) ,(1 4 2 84±7 72 )ng/g。试验组Ⅱ大鼠的胃和十二指肠食糜中也检测到 β Casomorphin 7样物质 ,提示非乳源的食物蛋白质也可能是酪啡肽的潜在来源