鲤胰岛素样生长因子Ⅱ的克隆表达与抗体制备

从鲤(Cyprinus carpio)肝脏总RNA中成功地克隆和诱导表达了胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因,并用间接ELISA法和Western-blot对其融合蛋白的多克隆抗体的效价和特异性进行了分析。结果表明,克隆的鲤IGF-Ⅱ基因与已报道的序列相比,有1个位点发生同义突变;经SDS-PAGE电泳分析,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量占菌体总量的35%。经ELISA测定,制备的抗体效价为6400。Western blot分析表明,抗血清能与重组蛋白发生特异性反应     

水产养殖品种的检测对象内容及方法(一)

目前全国的水产原良种场，经过农业部批准正式挂牌的有１０多家，全国各省市、自治区、地区自行设立的良种繁殖场可能有很多（农业部有关部门正在统计）。这么多的原良种场如何保证各自保存的原良种的优良性状，使它们在水产养殖结构调整中发挥应有的作用，是各级有关部门和机构所应关心的。从现在已经了解到的情况来看，各原良种场对原良种的检测能力参差不齐，对所检测的内容也不是很明确，检测方法不统一等。各原良种场的检测结果可比性不强，权威性不够，所以难以判断原良种的好坏、质量的优劣。本文就水产养殖的对象、检测的内容及检测…     

鲢的性分化及性转技术的初步研究

将繁殖季节顺产出的鲢卵从未受精卵开始到出膜后45d的鱼苗进行连续切片,观察其性分化。经观察,鲢苗出膜后24d在腹腔上皮的下方清晰可见性腺原基。出膜后34d则已明显性分化,雄性生殖嵴之体细胞增殖,与性细胞一起突向体腔,以柄状精巢系膜连于腹膜上皮;雌性生殖嵴之体细胞增殖,沿腹膜上皮横向伸展。用口服甲基睾丸酮(MT)的方法,设3个梯度(15×10-6、30×10-6、45×10-6)对鲢雌核发育苗进行性转,结果以出膜后3～4d的鱼苗口服MT(30×10-6),连续投喂50d,转雄效果较好,鱼苗能正常摄食药饵,成活率可达79.2%。     

鱼源嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS在枯草芽孢杆菌中的表达及检测

用PCR方法从枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）、鱼源嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）的基因组DNA和质粒pGFP-2中,分别扩增P43启动子、不含信号肽的外膜蛋白基因ompTS和不含启动子的绿色荧光蛋白基因。各PCR产物经测序、酶切、连接到大肠杆菌（Escherichia coli）-枯草芽胞杆菌穿梭载体pNW33N相应位点分别构建了穿梭表达载体pNWP43gfp和pN-WP43omp。电转枯草芽胞杆菌构建菌株BS01（pNWP43gfp）,在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光;电转枯草芽胞杆菌构建菌株BS01（pNWP43omp）,表达的外膜蛋白经SDS-PAGE和Western blot检测,结果表明,穿梭表达载体pNWP43gfp和pNWP43omp构建成功。构建的枯草芽胞杆菌在P43启动子的调控下,分别实现了绿色荧光蛋白基因和外膜蛋白基因ompTS的表达。     

鳗鲡血浆与肌肉中乙胺嘧啶检测方法的建立

通过萃取回收和色谱条件优化,建立了运用高效液相色谱法(HPLC)检测鳗鲡血浆和肌肉中乙胺嘧啶的方法。结果显示:在柱温30℃、检测波长236 nm、流动相乙腈、水、乙酸体积比为15∶85∶0.25和流速1.0 mL/min的色谱条件下,在设置鳗鲡血浆及肌肉中乙胺嘧啶浓度分别在0～5.0μg/mL与0～2.0μg/g范围内,相关曲线方程分别为y=766.68x+9.2511与y=853.96x+8.0956,相关系数(r)分别为0.9998和0.9999。在萃取回收中,向血浆和肌肉样品中分别加入适量无水硫酸钠,再分别用乙腈、三氯甲烷体积比为10∶1和5∶5的混合液萃取两次,回收率均达80%以上,日间、日内变异系数均低于3%,最低检测限可分别达0.005μg/mL和0.005μg/g。     

鱼类苗种、亲本及种质标准的检测指标分析

经过二十多年的水产标准化工作，在各级主管部门的正确领导和组织下，通过广大水产标准化工作者的辛勤工作，已经建立了水产标准化的初步体系。鱼类苗种、亲本及种质标准自从团头鲂的国家标准于 １９８８年颁布以来，已有２１项鱼类种质标准、１２项亲鱼和鱼苗鱼种质量标准发布执行（见表一）。正是由于这些标准的陆续发布执行，并通过各级政府主管部门、相关机构和养殖单位的努力工作，使我国的水产养殖正逐步走向健康、有序、稳定的发展道路。 从已有的标准来看，主要检测指标为生物学性状、生化指标和遗传学特性。其中生物学性状主要有形…     

水产养殖品种的检测对象内容及方法(二)

5.可数性状测定 按被检查鱼类种质标准规定执行,通常有以下项目: ——鳃耙:计数第一鳃弓外侧的鳃耙数。 ——下咽齿:计数左右下咽齿排列的行数及每行的齿数,用齿式表示。 示例:1·1·3/3·1·1 式中:1·1·3-左咽骨上有3行齿,外侧第一行有1枚齿,第二行有1枚齿,第三行有3枚齿; 3·1·1-右咽骨上有3行齿,内侧第一行有3枚齿,第二行有1枚齿,第三行有1枚齿。 ——鳍条:计数各鳍的鳍条数,用鳍式表示。 符号与代号:D-背鳍;A-臀鳍;P-胸鳍;V-腹鳍;C-尾鳍。 鳍棘（硬棘）数目用大写罗马数     

4个不同地理种群中华鳖POMC基因全长cDNA克隆及其序列分析

为探讨中华鳖不同地理种群的POMC基因的多态性,建立区分中华鳖不同地理种群的分子遗传标记,采用RT-PCR的方法扩增得到4个不同地理种群(太湖鳖种群、沙鳖种群、台湾鳖种群和黄河鳖种群)中华鳖的POMC基因,对该基因进行克隆及序列测定,并对所测序列进行比较,分析其SNP位点,并对所得的SNP位点进行验证。结果显示:4个不同地理种群中华鳖所扩增的POMC基因的核苷酸序列均为786bp;以megalign软件比较分析4个不同地理种群中华鳖的POMC基因,发现该序列中共有15个多态性核苷酸位点,经过验证,第129位核苷酸的变异为台湾鳖种群不同于其他种群的变异,第441位核苷酸变异为太湖鳖种群不同于其他种群的变异,第168和396位核苷酸为黄河鳖种群不同于其他种群的变异,第531和618位核苷酸为沙鳖种群不同于其他种群的变异。结果表明,中华鳖的POMC基因存在多态性,不同地理种群中华鳖POMC基因均有各自特异的核苷酸序列,可以作为区分中华鳖的不同地理种群的分子遗传标记。     

新疆多拉特水库生态景观规划设计

在对多拉特水库自然生态景观和人为景观的综合分析的基础上提出了相应的设计方法和理念,构建大坝上游“观水“、下游“戏水“景观系统等,并对水库的景观规划建设进行了有益的尝试。     

诱导鲤雌核发育时精子入卵的扫描电镜观察

以雌核发育性成熟鲤(Cyprinuscarpio)卵子和经紫外线照射处理遗传失活的鲫鱼(Carassiusauratus)精子为材料,在再次诱导其雌核发育时,通过扫描电镜和光学显微镜对比观察诱导组和正常受精组精子入卵的情况及鲤鱼成熟卵受精过程中精孔区的外部形态变化。结果表明,无论试验组或对照组在受精后2s精子就能迅速到达精孔区。精子入孔后,受精孔便被絮状物质堵塞;受精后35～40s壳膜表面开始模糊;60s后,精孔区絮状物及精子均消失。