猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白单克隆抗体制备与鉴定

根据NSP9非结构蛋白参数选取相应30 bp DNA片段,片段串联后人工合成并连接p ET-28a(+)载体,大肠杆菌BL21中表达得到可溶蛋白,镍柱亲和层析纯化后免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞骨髓瘤细胞融合。细胞融合后利用间接ELISA法杂交瘤细胞阳性克隆筛选,2次亚克隆后共获得3株抗PRRSV NSP9单克隆抗体,命名为3B17、3J13、3F19。这3株单抗可与大肠杆菌表达的蛋白产物和PRRSV感染的Marc-145细胞发生特异性反应。在PRRSV感染的Marc-145细胞中,NSP9蛋白表达水平接毒后不断升高,48 h达最高,为深入研究NSP9功能奠定基础。     

第六师垦区盐碱地改良技术

<正>土壤盐碱化(土壤盐渍化)是指盐分不断向土壤表层聚积形成盐渍土的自然地质过程。研究表明:土壤母质、质地、地形、新构造运动、水文条件和人为活动等是影响盐碱土形成的重要因素。一般将土壤层0.2米厚度内可溶盐含量大于0.1%的土壤称为盐渍土。土壤盐渍化分盐化与碱化2种类型,故又称为土壤盐碱化。当土壤表层中的中     

保护地蔬菜二氧化碳施肥技术

一、二氧化碳施肥方法 1．施肥原理。用硫酸加碳酸氢铵,经化学反应生成硫酸铵和水,并释放出二氧化碳,使保护地二氧化碳达到适宜的温度。所产生的二氧化碳供保护地蔬菜吸收利用,残留物的主要是硫酸铵,可收集作为肥料用。一次施肥,同时给作物补充了碳、氮、硫3种营养元素。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒FS株Nsp9基因的克隆与序列分析

为了对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）Nsp9基因的功能进行预测,利用RT-PCR法从细胞毒中扩增PRRSV FS株的Nsp9基因,并将其克隆至pMD18-T载体上,测序得到Nsp9基因序列,利用多种生物信息学软件分析Nsp9序列生物学信息。结果显示,Nsp9基因全长1 929 bp,目的基因的蛋白分子质量为70.5 ku,pI为7.78,表明该蛋白不稳定;抗原性分析显示,Nsp9基因存在多个抗原位点,柔韧性较好,多处位点的亲水性较强,适合作为单抗制备的表位;同种亚型不同毒株的Nsp9基因氨基酸同源性为96.9%～98.9%,这表明Nsp9基因高度保守,可进一步作为检测靶蛋白用于猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的诊断与疫苗免疫;亚细胞定位预测该基因可能定位于细胞质中,而不是细胞核内;同源建模预测三级结构结果显示,三维结构呈右手型,具有3个亚结构域,没有信号肽。此外,亲本株Nsp9基因与疫苗株Nsp9基因存在多个氨基酸的突变,这些氨基酸的插入与缺失是否与病毒的聚合酶活性和毒力有关还需要进一步试验验证。     

外源Ca2+对玉米幼苗镉胁迫的缓解效应

本试验以玉米为研究材料,对玉米幼苗进行一定浓度的镉(20mg/L)胁迫,通过对玉米幼苗施加不同浓度的Ca²⁺(0、2、5、8mmol/L),研究Ca²⁺对镉胁迫下玉米幼苗的叶绿素、MDA、可溶性糖、可溶性蛋白、游离脯氨酸和POD活性6个生理生化指标的影响。结果表明：施加外源Ca²⁺显著增加了镉胁迫下南瓜幼苗叶片中叶绿素含量(P<0.05),而MDA含量、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量以及POD活性均显著降低(P<0.05),对可溶性蛋白的缓解作用不显著(P>0.05)。其中以5mmol/LCa²⁺的缓解效果最好。     

岫岩地区甘蓝夜蛾发生规律及综合防治措施研究

甘蓝夜蛾在辽宁岫岩1年发生3代,危害严重。在对其发生规律和无公害农药防治研发的基础上,提出综合防治措施。     

PRRSV强、弱毒株Nsp9基因对PRRSV复制的影响

为了探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)强、弱毒株的Nsp9基因对PRRSV复制的影响,构建含有PRRSV XH-GD强毒株、CH-1R弱毒株Nsp9全长基因的质粒p IRes2-EGFP-Nsp9-XH-GD、p IRes2-EGFP-Nsp9-CH-1R,并将重组质粒分别转染到Marc-145细胞中,以MOI=1的剂量接种PRRSV XH-GD毒株,通过TCID50试验测定病毒的滴度,采用荧光定量PCR和Western Blot方法来测定病毒的N蛋白表达情况。结果表明,转染弱毒株CH-1R Nsp9基因的Marc-145细胞中,PRRSV的N蛋白在mRNA水平、蛋白质水平上的表达量均高于转染强毒株XH-GD组,且病毒的滴度也显著高于转染强毒株XH-GD组。综上,在Marc-145细胞中,弱毒株CH-1R Nsp9基因对PRRSV复制的促进作用优于强毒株XH-GD。     

生物菌肥防治寒地苹果树重茬病的研究

为了解木美土里生物菌肥防控寒地苹果树重茬病的效果,连续2年(2016年和2017年)研究了不同生物菌肥用量对重茬土壤上定植龙丰/山定子苹果树生长发育的影响。结果表明,与对照相比,施用生物菌肥显著提高了苹果的生长量、分枝数和叶片叶绿素含量,其中以0.50 kg/株木美土里处理效果最好。2016年和2017年,0.50 kg/株木美土里处理的株高分别为不施用生物菌肥对照的1.52、1.53倍,茎粗分别为对照的1.27、1.35倍,茎粗增长量分别为对照的1.22、1.66倍,分枝数分别为对照的2.42、2.32倍。除2016年0.25 kg/株处理外,其他处理均明显提高了叶片叶绿素含量。因此,0.50 kg/株木美土里生物菌肥处理对寒地苹果重茬障碍的防治效果最佳,可应用于苹果树寒地重茬栽培。     

岫岩地区绿色生态苹果园主要害虫及天敌调查研究

2003～2005年对辽宁东部岫岩的绿色生态苹果园主要害虫和天敌进行了调查,结果表明果园生态系统中生物资源丰富,天敌种类多,数量大.初步鉴定苹果常见害虫有30余种,其中主要害虫7种;苹果树害虫天敌76种,其中主要天敌44种,隶属2个纲,8个目.     

稻水象甲无公害防治技术措施研究

稻水象甲是当前水稻生产上为害最重的一种害虫,又是国际上重要的植物检疫对象,对水稻生产影响极大。为了适应无公害水稻生产和稻田养殖业发展的需要,探索应用物理、农业及生物等多种无公害防治措施,从而达到对稻水象甲无公害防治的目的,我们进行了如下的试验,并取得了一定的防治效果。1培育壮苗育苗前在选好种的基础上,采用温汤浸种等措施进行种子消毒,达到培育无病虫壮苗。增强水稻的抗病虫能力。2物理防治利用稻水象甲对黑光灯有很强趋性的特点,我们于2003年~2005年的5月10日~6月10日、8月5日~9月5日在稻水象甲越冬代成虫和新一代成虫迁飞…