叶籽银杏GbMADS5基因的克隆与序列分析

MADS-box基因是一类编码转录因子的基因大家族,在植物的发育过程中具有重要作用。本研究采用RT-PCR技术从叶籽银杏（Ginkgo biloba var.epiphylla Mak.）中克隆了MADS-box基因GbMADS5。序列分析表明,该基因编码区全长为666bp,含有一个完整的开放阅读框,编码221个氨基酸残基组成的蛋白质,具有典型的植物MADS-box基因结构,编码肽链包含了MADS区、I区、K区和C末端,但该基因不具有拟南芥（Arabidopsis thaliana）AG基因的N端区域。GbMADS5基因编码的蛋白序列与其它植物的MADS-box蛋白序列有着较高的一致性,与裸子植物（Gymnospermae）的AG基因相似性最高,其中与苏铁（Cycas revolute）的同源性高达91.07%。系统发育树分析显示,GbMADS5基因属于AG亚家族基因。     

中国侧柏地理种源核型分析与进化趋势

本文以16个不同地理种源的侧柏种子为试验材料,采用普通压片法,对其核犁及进化趋势进行研究.研究结果表明:核型均为K(2n)=22=22m,均属1A类型,有1～2对染色体具随体,不同种源次缢痕位置不同;辽宁凌源、河北获鹿、山西长治、陕西黄陵、四川射洪、福建南平、云南昆明的染色体相对长度组成中有L染色体,其余仅有M_2和M_1染色体;通过聚类分析及进化趋势图分析发现,河北获鹿的最进化,河南登封的最原始.     

侧柏不同地理种源种子发芽能力分析

对山东枣庄抱犊崮林场37个地理种源的23年生侧柏种源林种子的发芽率、发芽势、活力指数、发芽值4个指标研究发现：不同地理种源间侧柏种子的发芽能力存在很大差异,福建南平（FNP）、辽宁凌源（LLY）、甘肃徽县（GHX）3个种源发芽能力较强,发芽率分别为65．00％,62．50％和52．00％;山东灵岩（SLY）、河南灵宝（HLB）、内蒙乌拉山（NWS）发芽能力较弱,发芽率仅为6．50％,7．50％和10．50％。确定枣庄抱犊崮林场及毗邻地区种子发芽能力最佳种源为福建南平（FNP）、辽宁凌源（LLY）、甘肃徽县（GHX）3个种源。     

叶籽银杏授粉期胚珠的形态结构变化

 通过树脂半薄切片和扫描电镜技术对叶籽银杏（Ginkgo biloba L. var. epiphylla）叶生胚珠和 正常胚珠授粉期的发育过程进行了观察比较。结果发现：授粉前,正常胚珠各组织已分化完全,珠被迅 速生长,在珠心顶端逐渐靠拢;而叶生胚珠此时没有珠托和珠心分化,仅有脊状的突起,主要靠突起内 的维管束供给营养,随着突起不断发育,有栅栏组织和海绵组织的分化。授粉期,正常胚珠有珠心组织 分泌的授粉滴和珠心发生程序性死亡形成的贮粉室;而叶生胚珠未发现授粉滴的存在,已有珠心和珠被 的分化,珠孔呈喙状,珠孔道伸长,但在珠孔道的下方没有发生细胞的退化,因此不能形成贮粉室。授 粉后,叶生胚珠和正常胚珠进入雌配子体游离核阶段。与正常胚珠相比,叶生胚珠外观形态体积明显偏 小,呈不对称发育。对叶籽银杏败育的机理进行了讨论     

仙客来花粉生活力及发芽率的测定

采用TTC染色法对仙客来7个品种的花粉生活力进行了测定。结果表明:仙客来不同品种的花粉生活力在15.30%~51.41%之间,品种间差异显著。培养基法对3个仙客来品种花粉发芽率测定结果表明,品种、蔗糖浓度对花粉发芽率影响显著。其中美国山脊白色发芽率最高,培养基最优组合为15%蔗糖+2%琼脂+0.1%硼酸。     

玉玲花种苗特性研究

采用形态指标调查法,分别对玉玲花果实和种子的宽度、厚度、长度等指标的变异特性进行了研究,发现果实和种子的变异系数排列顺序存在差异,核果的形态变异系数由大到小是果厚、果长、果宽;种子的变异系数由大到小是种宽、种厚、种长。同时还发现,地上部‘分从播种后23天到33天为快速生长期．地下部分从播种后49天到58天为快速生长期。     

银杏雌株种质遗传关系的AFLP分析

从64对Eco RI/MseI引物(其中MseI引物为荧光标记物)中筛选出7对扩增产物多态性高、谱带清晰的引物.对来自日本、法国和中国的49个银杏雌株种质的遗传关系进行研究.结果表明:7对引物共产生1 219条谱带,132个特异位点(其中缺失带11条、单态带121条),多态带1 200条,多态带的比例为98.44%;每对引物鉴别效率为100%.49个雌株种质之间相似系数为0.39～0.83,来自不同国家的雌株遗传变异程度不同.当相似系数为0.51时,供试种质可分为2类,来源地相同的种质并不单独聚成一类,山东大部分雌株种质聚为一类,它们与其他的雌株种质有显著的遗传差异,亲缘关系较远.叶籽银杏不是很原始的种质,而'海阳'则比较原始.对雌株种质的特异位点、相似系数、聚类结果等的综合分析表明,法国的'垂枝银杏'、日本的'黄金丸'、中国的'盘县1'、'灵川'、'安陆'、'东安1'、'西山大佛手'、'荣城'、'煜?、'郯城2'、'泰安1'、'泰安2'、'泰安3'、'崂山'、'海阳'、'灵岩'16个种质是银杏雌株中的重要特异种质.     

叶籽银杏trnS-trnG序列测定与分析

利用叶绿体基因trnS-trnG基因间隔区的通用引物,扩增并分析了不同地区的14个叶籽银杏和2个银杏的trnS-trnG基因间隔区序列,结果表明,14个叶籽银杏和2个银杏的trnS-trnG序列长度均为1005bp,A T的含量为62.19%～62.39%。用DNASTAR软件对14个叶籽银杏和2个银杏的trnS-trnG基因间隔区序列进行同源性和差异性分析,建立了系统进化树。各样品之间变异小,14个叶籽银杏和2个银杏共有23个可变位点,1个信息位点,这些变异都以碱基的置换发生。除这些变异位点外的核苷酸序列完全相同,说明各样品序列之间具有高度同源性。YZ1变异位点较多,与其它样品的同源性较低。所测序列Blast检验后发现叶籽银杏trnS-trnG序列与银杏的相似度最高,苏铁类次之。     

叶籽银杏拟胚珠的形态发育及变异特性

以山东省沂源县中国首次发现的叶籽银杏为试材, 对其变异特性、“叶生拟胚珠”的形态发育过程、叶脉以及叶和胚珠的形态进行了研究。结果发现, 叶生拟胚珠的发育过程可分为发端期、形成期、增大期和成熟期。每个叶上叶生拟胚珠1～8个, 但只有一个能正常发育。叶籽银杏的叶片可以分为多裂型、全缘型、二裂型、叶生拟胚珠叶和变形叶, 叶色分绿色和斑叶两种类型; 与正常胚珠相比, 首次发现叶生拟胚珠的数量和着生部位差异较大, 发生时间具滞后性和异时性。叶生拟胚珠的形成期比正常胚珠滞后15 d, 而且在授粉期的叶生拟胚珠上始终未发现“传粉滴”的出现; 叶生拟胚珠按其着生位置分为单裂单生型、单裂簇生型、双裂簇生型、多裂单生型和散生型5种; 叶籽银杏正常叶叶脉具有闭合型、W型、V +W型和双V +W型的网结联合, 而叶生拟胚珠叶的叶脉有单弧形、双弧形和多弧形3种类型。对叶籽银杏这一特异观赏种质的变异特性及系统发育进行了讨论。     

叶用银杏种源,性别及无性系的因子和聚类分析

从种源、性别及无性系３个层次,有杉随机区组及电子计算机技术,对我国银杏叶５个产量指标进行了多元统计分析。Ｒ型因子及Ｑ型聚类结果表明：（１）１２个种源可分为６类,山东,江苏,广西及福建属优良种源,山东和福建的雄株及江苏的雌株为性别最佳群体;（２）全国１２个省８６个无性系可以分为６类,其中山东４５号,５８号,５９号及６７号雄株,５２号雌株及江苏的８３号雌株为优良性系,雄株优良无性系达４．６５％;（３）