外埠冷鲜肉的检疫监督

随着人民生活水平的不断提高。对肉类食品的卫生、安全、质量的要求也日益提高，品牌效应在肉类产品中也日益显著。以双汇冷鲜肉为代表的外地品牌猪肉纷纷进人本地市场。并因其安全、质优而为广大群众所欢迎，开始占领异地市场份额，给本地生猪定点屠宰带来了冲击，也给我们动检工作提出了新的问题。如何才能正确应对市场经济下的竞争形势呢？本文试对外埠冷鲜肉的检疫监督工作谈一些自己的体会。     

宁明县活禽交易市场禽流感监测与防控管理

活禽交易市场是禽流感监测与防控管理的重要场所,为了加强对宁明县活禽市场禽流感的监测,了解活禽市场禽流感病毒的流行情况,我们于2014年每个季度对宁明县活禽市场进行采样监测,本次调查监测显示宁明县活禽市场存在较为严重的禽流感污染情况,需采取有效的防控措施,通过有效措施的实施,有效地控制活禽交易环节禽流感病原污染和传播,降低本地区发生禽流感的风险.提高对活禽市场禽流感的防控管理,并进一步落实活禽市场的防控措施,强化营造良好的市场环境,保障禽产品安全供应,有效促进家禽业健康发展.     

一株野鸟源H9N2亚型禽流感病毒的全基因组序列分析及致病性研究

为进一步了解2014年分离自我国南方野鸟粪便中的一株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wide Bird/Hu N/SC1400/2014(H9N2)(WB/400/14)的生物学特性,本研究对其进行全基因组序列测定、进化分析及SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显示:该分离株的HA裂解位点基序为333PAASDR↓GL340,其中不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)氨基酸序列特征。该分离株不同基因片段来源较复杂,分别与H9、H6、H4、H1、H11、H10、H3等多种亚型的LPAIV同源性较高,呈现明显的多样性。感染性试验显示,WB/400/14不能够在SPF鸡和小鼠体内有效复制,但病毒感染SPF鸭后能够在部分脏器中检测到病毒的存在,并且感染鸭能通够过咽喉和泄殖腔同时向外排毒,而同居感染鸭仅通过泄殖腔向外排毒,表明分离株在SPF鸭群中具有良好的水平传播能力。本研究为AIV的监测和防控提供实验依据。     

禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展

禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,ALV-J)几种免疫抑制性病毒的混合感染在我国部分养鸡场中均普遍存在,使得鸡群处于免疫力低下的状态,导致禽流感、新城疫等重要疫苗免疫失败,并容易造成继发感染,使疫病的诊断和防控难度加大。另外,REV可以整合到MDV和鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)基因组中,从而导致商品化疫苗受到污染,并可用做将外源基因插入到鸡和哺乳动物细胞内的表达载体;基于REV传统检测方法的基础上,新型的分子生物学检测技术如PCR、实时荧光PCR、LAMP提高了诊断REV的敏感性和特异性。     

一株鸭源H8N4亚型禽流感病毒分离株的全基因组序列分析及致病性的研究

本研究对2012年从湖南活禽市场中分离到的一株鸭源H8N4亚型禽流感病毒(AIV)A/duck/HuN/S3160/2012(H8N4)进行全基因组序列和进化分析,并对其进行SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的致病性试验.序列分析显示:HA裂解位点序列为339pSIEPK ↓ GLF347,为典型的低致病性AIV特征.内部基因来源较复杂,HuN/160/12的PB1、NS基因分别与A/spot-billed duck/Xianghai/427/2011 (H5N2)和A/wild bird/Korea/A81/2009(H5N2)的同源性最高,其余内部基因同源性最高的病毒株来自H2、H3、H4、H7、H10等亚型分离株,呈现明显的异源性.感染性试验结果显示,病毒在SPF鸭体内可以通过呼吸道和消化道向外排毒,并且能够在气管、肾脏、盲肠扁桃体及法氏囊检测到病毒,而不能在鸡体内有效复制及排毒.对小鼠的感染性试验结果显示,仅在鼻甲和肺检测到病毒存在,其他脏器病毒滴定结果为阴性,体重呈一过性下降,表明该病毒为低致病性AIV.     

河南郏县大尾寒羊肠道寄生虫感染情况调查

为了解大尾寒羊肠道寄生虫感染情况和保护河南省地方品种资源,采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法对河南省郏县某养殖场和散养的大尾寒羊进行了肠道寄生虫感染情况调查。共检查162份新鲜粪便样品,发现大尾寒羊肠道寄生虫感染率高达98．8％,检出10种寄生虫,其中艾美耳球虫（6种）、贾第虫、圆线虫、鞭虫和绦虫感染率分别为95．7％、1．9％、87．0％、27．8％和4-3％,混合感染率88．3％,圆线虫感染严重,平均EPG值3760．9。表明河南郏县大尾寒羊肠道寄生虫感染较为普遍和严重,并可携带人兽共患寄生虫,应加强其肠道寄生虫病的综合防治。     

两株H6N8亚型禽流感病毒分离株的分离与鉴定

为了解禽流感病毒(AIV)在我国华南地区的流行情况,我们对活禽市场中分离得到的两株鸭源H6N8亚型AIV[A/duck/Fujian/S2191/2011 (H6N8) (FJ/191/11)和A/duck/Guizhou/S4035/2011 (H6N8) (GZ/035/11)]进行全基因序列测定,并进行其对SPF鸡和BALB/c小鼠的致病性试验.序列分析显示:HA裂解位点基序为339pQIETR ↓GLFG348,为低致病性AIV特征.内部基因分别源于两个国内流行的H6亚型病毒家系(ST339-like和HuN573-like).序列分析表明FJ/191/11和GZ/035/11为H6亚型病毒与其他亚型AIV的N8NA基因发生重组,呈现明显的异源性.两分离株的感染性试验显示,它们对鸡和小鼠均呈低致病性;而且不能在鸡体内有效复制;对小鼠的感染性实验结果显示,小鼠肺脏和鼻甲病毒分离结果为阳性,其他脏器病毒滴定结果为阴性.     

分泌抗金黄色葡萄球菌细菌素乳酸菌的分离鉴定

为分离和筛选产抗金黄色葡萄球菌乳酸菌素的优势乳酸菌,利用乳酸菌分离培养基MRS从收集的各种腌制菜汁中分离培养乳酸菌,通过细菌培养特性、革兰氏染色特点、生理生化特性初步鉴定,同时根据Genbank中乳酸菌的16SrDNA序列设计特异性引物,采用PCR方法进一步鉴定,并以金黄色葡萄球菌为指示菌对乳酸菌的发酵上清液进行抑菌特性研究。结果表明,从腌渍菜汁中分离获得90株产酸菌,通过形态学、生理生化特性和PCR鉴定,结果73株产酸菌为乳酸杆菌;分泌产物抑菌试验表明,有10株菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性,经酸排除和过氧化氢排除试验,仍然有5株乳酸菌的分泌产物具有抑制金黄色葡萄球菌活性。可见,从腌渍菜汁分离到的乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性的特性,主要是通过分泌乳酸菌素来发挥作用。     

鸡尿酸盐沉积临床病理学实验研究

将２５６只３５日龄迪卡鸡随机分为对照、高蛋白Ⅰ、高蛋白Ⅱ、高钙和肾衰组,通过人工复制尿酸盐沉积病例,对禽痛风进行临床病理学研究。结果：（１）正常鸡血浆中约有０．１０７ｍｍｏｌ／Ｌ的尿酸与大分子（蛋白质）结合,当血浆尿酸浓度升高时,结合尿酸的浓度不变,游离尿酸水平升高;（２）高蛋白饲料使饮水增多,血浆尿酸、ＮＰＮ升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,而肾脏菊糖清除率与对照组（３．２７２μｇ／ｋｇ．ｍｉｎ－１）差异不显著（Ｐ＞０．０５）,剖检未见痛风病变;（３）日粮高钙使采食量下降,增重降低,血浆钙、尿酸、ＮＰＮ升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,肾菊糖清除率（２．７０９μｇ／ｋｇ．ｍｉｎ－１）与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５）,但死亡鸡中３／１１见肾和输尿管内有较多尿酸盐沉积;（４）肾脏损害使血浆尿酸、ＮＰＮ升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,Ｎａ＋、总蛋白降低（Ｐ＜０．０５）,肾菊糖清除率显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）,死亡鸡中１９／２７有明显肾脏肿大、肾和输尿管内沉积大量尿酸盐。     

昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达

为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。