H5、H9亚型禽流感病毒快速鉴别诊断方法的建立

为了快速、敏感、特异地鉴别诊断我国目前流行的禽流感，根据H5、H9亚型禽流感病毒HA基因序列的保守区域设计并合成2对特异性引物，利用这2对引物对H5、H9亚型禽流感病毒的HA基因片段进行二联RT—PCR扩增，并对二联RT—PCR检测方法进行了敏感性及特异性试验。结果表明，这2对引物能特异地扩增H5、H9亚型禽流感病毒HA基因片段，大小分别为490bp和686bp；该检测方法敏感性高，特异性强；初步建立起快速、敏感、特异地鉴别检测H5、H9亚型禽流感病毒的分子诊断方法。     

H7亚型禽流感RT-PCR诊断方法的建立

参照GenBank中已发表的H7亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因设计合成了一对预计扩增片段大小约为310bp的引物。利用这对引物,通过对RT-PCR反应体系和反应条件的优化,建立了针对H7亚型禽流感的RT-PCR检测方法。敏感性试验和特异性试验结果表明,该方法敏感性高,最低可检出100pg的AIV-H7的mRNA,且应用该引物对新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)及其他亚型的流感病毒(H1、H3、H5、H9)在相同反应条件下未扩增出任何片段,具有较好的特异性。用所建立RT-PCR方法检测发病鸡组织病料及咽、肛拭子,检测结果与鸡胚病毒分离结果相比,阳性符合率高达90.6%。     

疑似鹅副粘病毒感染诊断初报

在鹅病的调查中,从一病鹅群中分离到一种既不是小鹅瘟,也不是鹅的鸭瘟或禽流感的病毒。人工发病的症状和病变与现场病例比较接近,从人工发病鹅中分离到同样的病毒,经初步鉴定认为该病毒可能是对鹅有致病力的禽副粘病毒。现将初步调查研究工作报道如下。     

一株鸽源新城疫病毒的分离鉴定

从广东发病鸽群中采集的拭子样本中分离到1株新城疫病毒,用聚合酶链反应(PCR)、血凝抑制试验(HI)及基因测序等对其进行鉴定。结果表明,此分离株具有血凝活性,且可与新城疫病毒标准阳性血清发生特异性抑制反应;用针对新城疫病毒的F基因及P基因特异性鉴定引物对该分离株进行PCR扩增,可扩增出特异性目的片段;测序及BLAST分析表明,其与美国新城疫病毒分离株Pigeon/US(TX)/98的F基因核苷酸序列相似性高达97%以上。毒株被鉴定为鸽源新城疫病毒,并命名为Pigeon/Guangdong/ZQ-17。     

鸡病毒性关节炎

鸡病毒性关节炎是一种由呼肠孤病毒引起的鸡的传染性疾病。病毒主要侵害关节滑膜、腱鞘和心肌,使胫跗关节上方的腱索肿大,趾屈腱鞘和蹠伸腱鞘肿胀。病鸡蹲坐,不愿走动或跛行。病鸡因运动障碍而生长停滞,消瘦衰竭,鸡群的饲料利用效率下降,淘汰率增高,因而给养鸡业带来巨大的经济损失。     

鸡传染性支气管炎病毒中国地方分离株膜蛋白基因的克隆及序列分析

本研究选取有代表意义的9株鸡传染性支气管炎病毒（IBV）国内分离株．利用所设计的一对特异引物，通过RT—PCR的方法成功地扩增了膜蛋白基因即M基因全长片段．通过克隆、序列测定获得了9个分离毒株M基因的全长核苷酸序列。并将各IBV国内分离株与GenBank中注册的一些毒株的M基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比较、系统进化关系分析发现：IBV中国地方分离毒株大部分属于Mass型；不同毒株间存着重组、缺失、插入及点突变等变异，从ATG至第150bp区段的核苷酸序列变异频率最高；IBV中国地方分离株M基因的变异属于高频率的同义突变；国内的IBV分离株分为两个基因群，1群分离毒株与GenBank中Mass型的毒株亲缘关系较近．毒株间核苷酸序列同源性为95．7%～100％，其相应的氨基酸序列同源性为98．2%～100%；Ⅱ群分离毒株与众多参考毒株的亲缘关系都比较远，毒株间彼此核苷酸序列同源性为89．7％～91．9%，氮基酸序列同源性为92．0-96．0%。     

IBV H52疫苗株主要结构蛋白基因信息解析

鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis，IB)对我国养禽业危害巨大。IB的病原为鸡传染性支气管炎病毒(IBV)，该病毒基因组为单股正链RNA，可编码纤突蛋白(S，可裂解为S1和S2)、膜蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)等3种主要结构蛋白；     

有关禽流感免疫的几个问题

近年来,国外一些国家和地区,采取对家禽接种灭活疫苗而有效地预防了禽流感的发生。家禽接种禽流感疫苗是对禽流感的较为有效的预防方法,但并不等于接种禽流感疫苗后就万事大吉、平安无事了。现就有关禽流感免疫的几个问题,谈谈个人的一些看法。一、疫苗种类的选择由于禽流感病毒易于变异,因而使用弱毒疫苗是非常危险的,因为活病毒随时可变异而使毒力返强,因而接种活毒疫苗无疑是等于撒布禽流感强毒,是危险和不可取的。一些基因工程疫苗在实验室内有不同程度的免疫效果,但考虑到它的生物安全性,以及与由全颗粒病毒制成的灭活疫苗相比,其免疫…     

鸡传染性支气管炎病毒中国地方分离株S1基因5''端的变异

对自海南海省、广西省发生鸡传染性支气管炎（IB）鸡群分离的4株IBV分离株（HaN-1/95、HaN-2/95、GX-1/98、GX－2／98）的主要免疫原纤突蛋白S1基因经RT－PCR扩增其5'端的1．2kb的目的片段，将其插入载体pMD 18-Tk ,在大肠杆菌中实现目的的基因的克隆。对克隆的目的基因经限制性酶切分析及PCR鉴定后，以双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，并与GenBank中的参考毒株（H120、SD－1／97和Holte）相应序列作比较，分析其同源性。结果表明，HaN-1/95、HaN-2/95、GX-1/98及SD－1／97与疫苗株H120的核苷酸序列同源性分别为99．5％、99．2％、97．9％和99．5％，其推导氨基酸序列同源性分别为99．1％、98．9％、96．9％和99．2％。GX－2／98与Holte株的核苷酸序列同源率为99．0％，其推导的氨基酸序列同源性为98．6％，而与其他中国分离株的核苷酸序列的同源性仅为70％左右，氨基酸序列的同源性仅为68％左右。     

非特异性免疫研究进展

非特异性免疫是机体抵御外界有害因素的第一道屏障，对机体的正常菌群、巨噬细胞、红细胞以及干扰素等都是非特异性免疫成分的免疫活性、与特异性免疫的相互作用以及对特异性免疫应答的指导作用三方面综述了其研究进展情况。