棉花真叶原生质体分离及瞬时表达体系的优化

【目的】真叶细胞能模拟植物内源条件,建立基于棉花真叶原生质体的高效瞬时表达体系,为快速有效研究棉花基因功能提供方法。【方法】以陆地棉TM-1真叶为材料,采用常用的纤维素酶和离析酶组合分离原生质体,探究影响原生质体分离的叶龄、渗透压、酶解液成分和酶解时间,及渗透压和酶解时间对原生质体活力的影响,并分析渗透压、PEG浓度和培养液种类对原生质体瞬时转化的影响,进而优化棉花真叶原生质体瞬时表达体系。构建GhLTP-GFP表达载体,对比融合蛋白在拟南芥、棉花原生质体和烟草表皮细胞中的亚细胞定位,验证该体系。【结果】不同于棉花子叶,酶解液中高浓度CaCl₂会显著抑制真叶细胞壁的酶解,含10 mmol·L^-1 CaCl₂的酶解液能有效分离棉花真叶原生质体。甘露醇显著影响原生质体得率,含0.5 mol·L^-1甘露醇的酶解液分离原生质体得率最高,且细胞形态维持较好,而0.4 mol·L^-1甘露醇条件下原生质体活力降低一倍,表明0.5 mol·L^-1甘露醇能较好维持棉花真叶原生质体渗透压。陆地棉刚展平的真叶分离所得原生质体大小合适,而展平后的嫩叶分离得到的原生质体细胞较大,得率降低一倍。酶解处理7 h前,原生质体游离缓慢,酶解9 h原生质体产量达到高峰,继续酶解原生质体将破裂,得率降低。在等渗条件下用40% PEG4000转化所得原生质体,转化效率最高,而普遍采用的低渗条件不利于棉花真叶原生质体的转化。转化后,用WI溶液继续培养原生质体,会引起原生质体的大量破裂,用含0.5 mol·L^-1甘露醇的W5溶液继续培养,有利于原生质体形态的维持,转化率提高到90%。表达载体35S:GhLTP-GFP分别转入棉花、拟南芥原生质体和烟草表皮细胞,GFP信号在细胞中的定位结果一致。 【结论】建立的棉花真叶原生质体瞬时表达体系,可获得8.10×10⁶个/mL活力在95%以上的高质量原生质体,原生质体得率提高8倍,转化效率达到90%,可用于亚细胞定位、蛋白互作,以及代谢调控网络研究等。     

大麦2H染色体对小麦农艺和品质特性的影响

为了研究2 H染色体对小麦农艺和品质特性的影响,测定了普通小麦中国春(CS)、栽培大麦Betzes及其杂种衍生的二体异附加系CS 2H和3个异代换系2H/2A、2H/2B、2H/2D的农艺性状及籽粒硬度、蛋白质组成、淀粉特性.结果表明,2H附加系和代换系的农艺性状比CS都有不同程度的改善,但不育小穗数增加,不育率提高,以2H/2A的不育率最高(40.4%).籽粒硬度仅2H附加系表现超亲,三个代换系则介于双亲之间.含2H染色体材料的蛋白质、总氨基酸、苏氨酸和赖氨酸含量、沉淀值均表现超亲遗传,尤以2H/2A的超亲优势最大.3个异代换系的直链淀粉含量均低于双亲,以2H/2A的含量最低;2H/2B的降落值介于双亲之间,其余均超亲,以2H/2A最高.三个代换系的峰值粘度、最终粘度都超亲,稀懈值介于双亲之间.2H/2A在这些淀粉品质指标中表现出了最好的遗传正效应.     

叶考拉F70及其后代在中国小麦品质改良中的应用

品质和产量同步改良是小麦育种的重要目标.自20世纪70年代开始,本研究利用来自CIM-MYT的优质小麦叶考拉F70(Yecora F70)进行品质育种,先后育成优质面包小麦品系京771和中作8131-1、中优9507、中优206等三个优质强筋小麦新品种,产量水平得到逐步提高.中优206较好地实现了优质和高产的结合.中作8131-1及其衍生系已成为中国小麦品质育种的重要优质源之一.本文系统介绍了Yecora F70及其后代在品质育种中应用的最新进展,目的是为中国小麦品质育种提供方法和经验.     

4种猪肺炎支原体疫苗免疫仔猪后抗体水平的变化规律

为探讨免疫接种4种猪肺炎支原体疫苗后仔猪血清抗体的变化规律,选用100头健康仔猪作为试验动物,随机分成A、B、C、D、E(对照)组,每组20头仔猪.参照疫苗说明书,分别在7日龄、21日龄对试验组仔猪进行免疫接种,于对照组仔猪颈部肌肉注射2.0mL生理盐水.分别于20、50、80、140日龄采血并分离血清,采用ELISA方法检测仔猪血清中猪肺炎支原体的抗体水平.结果表明,不同疫苗免疫接种试验猪后产生的抗体水平存在差异.20日龄时,试验组与对照组抗体水平间差异不显著,且各试验组抗体的阳性率不高,A组抗体的阳性率为0;50日龄时,试验组抗体阳性率和抗体水平明显升高,试验组的抗体水平极显著高于对照组(P＜0.01),但各试验组间差异不显著,同时A组的抗体阳性率显著低于其他试验组(P ＜0.05);80日龄时,除A组的抗体阳性率保持不变外,各试验组的抗体阳性率和抗体水平均有所下降,但抗体水平仍极显著高于对照组(P＜0.01),抗体阳性率显著高于对照(P＜0.05),D组的抗体水平和抗体阳性率均高于其他试验组,但试验组间的抗体水平差异不显著;140日龄时,试验组的抗体阳性率和抗体水平显著升高,试验组的抗体水平均极显著高于对照组(P＜0.01),D组的抗体阳性率和抗体水平高于其他试验组,但试验组间的抗体水平差异不显著.     

辽宁省义务教育均衡发展的政策选择

随着社会对义务教育均衡发展问题的不断关注,义务教育相关政策对义务教育均衡发展所起到的保障性作用也逐渐成为各级政府和教育界关注的热点话题。从资源配置的角度分析辽宁省义务教育均衡发展现状与存在的问题,探究导致义务教育发展失衡的政策性原因,进而提出推动辽宁省义务教育均衡发展的政策性建议。     

乳酸菌剂对花椰菜茎叶青贮饲料发酵品质的影响

试验研究了乳酸菌剂对花椰菜茎叶青贮过程中微生物动态、有机酸、可溶性碳水化合物、pH变化的影响,并对发酵第60天青贮饲料的品质进行评定.以晾晒至含水量为75％的花椰菜茎叶为原料,用不同添加量复合乳酸菌剂进行青贮饲料的调制,分别为10、20、30 mg/kg乳酸菌剂组.结果表明:乳酸菌添加能提高花椰菜青贮发酵中的乳酸球菌、乳酸杆菌的增殖速度和数量,抑制霉菌、酵母菌、一般细菌的增殖;加速发酵体系中乳酸的积累,减少乙酸、丙酸、丁酸的产生;有利于pH降低和维持低酸环境,并能降低饲料可溶性碳水化合物含量消耗.根据以上指标,并结合饲料的感观品质及评分,添加20 mg/kg乳酸菌剂,可以得到品质优良的花椰菜茎叶青贮饲料.     

军校学术期刊：遏制学风建设中学术不端行为的前沿阵地

从军校学术期刊及军校学风的概念人手,阐释了学术期刊与军校学风建设的关系,列举了军校学术期刊的三类学术个体在学术论文发表过程中表现出的学术不端行为,并通过主、客观因素即学术个体与学术环境两个维度的成因分析,提出了学术期刊在宏观和微观两个层面纯洁军校学风建设,遏制学术不端行为的方法和对策。     

茶叶中有机氯农药的分析技术研究进展

概述了近年来茶叶中有机氯农药残留分析的前处理技术和测定方法(超声波提取、加速溶剂提取、微波提取、固相萃取、固相微萃取技术及气相色谱、气相色谱-质谱联用技术)的研究进展,并指出了今后的发展方向。     

不同品种烤烟营养特性与土壤养分供应研究

[目的]为了明确烤烟的营养特性和土壤养分供应特性。[方法]选用当前种植较广的云烟85、云烟87、K326为供试材料,对烤烟大田生长期对氮、磷、钾的吸收利用及土壤氮磷钾供应进行研究。[结果]不同品种氮、磷、钾吸收的主要吸收时期最大吸收出现的时间存在明显差异,烤烟氮、磷、钾累积总量也因品种不同而异;烤烟大田生长期氮磷钾吸收曲线与土壤速效氮、磷、钾供应曲线均呈低-高-低变化,但是烤烟氮磷钾吸收主要集中在移栽后50～90 d,土壤速效养分供应则主要集中移栽后20～50 d,早于烤烟吸收。[结论]在实际生产中,应根据不同品种烤烟的营养特性确定不同的施肥量、施肥时间,以满足烤烟对养分的需求。     

农资类电子商务真的来了——2013中国农资产业电子商务发展高层论坛纪实

<正>4月13日,由中华合作时报社·中国农资传媒主办、中国农业生产资料流通协会指导、上海市农业生产资料公司协办的"2013中国农资产业电子商务发展高层论坛暨交易启动仪式"在上海浦东隆重举行。中华全国供销合作总社常务理事、农资局局长、中国农资流通协会常务副会长杨建平,上海市商务委员会副主任吴星宝,上海市农委副主任殷欧,中华合作时报时报社副总编辑、中国农资传媒总编辑曾峰,浙江农资集团党委书记郑军以及上海市