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参考 Genbank收录的 TGEV- Miller株的基因序列 ,自行设计合成 1对引物 (TGEVP5 /P6 ) ,对不同代次的 TGEV疫苗弱毒 STC3及种毒 、种毒 进行了 RT- PCR扩增 ,产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,均出现 1条大约 12 6 2 bp的目的条带 ,经 Eco R 酶切 ,都产生了 871bp和391bp左右的两个片段 ,与预期大小相符。将种毒 RT- PCR扩增目的条带回收纯化后克隆入PMD18- T载体中 ,转化宿主菌 DH5 α,挑选阳性克隆 (命名为 PTs) ,提取重组质粒 ,用 Hpa 、Eco R 对重组质粒进行酶切鉴定以及 PCR扩增 ,然后进行序列测定 ,并进行了序列分析 ,证实与国外标准毒株 Miller、Fs772 / 70、Purdue、TO14等有较高的同源性 相似文献
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某市野生动物园一只年仅3个月的长颈鹿突然发病死亡。死前没有明显的临床症状,呼吸困难,有背脖反应。剖检发现主要以败血症变化为主。肺部淤血、水肿,出现虾肉样变,支气管内充满泡沫样液体;肝脏呈暗褐色,肾脏质脆,结构十分清晰;胃黏膜肿胀充血,也有点状出血点,肠黏膜有出血点;脾脏不肿大。心冠脂肪大面积点状出血,左右心室静脉有出血点。作者采用病料涂片、染色镜检、细菌分离培养、生化试验、动物试验和药敏试验等方法对该病病原进行了研究。通过一系列的实验室检验,结合本病的临床症状和病理变化,鉴定该病原为多杀性巴氏杆菌。 相似文献
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赵玉军 《河南畜牧兽医(综合版)》2019,(4):29-30
《开封市城市养犬管理办法(试行)》自2013年1月1日起已经发布施行6年,已得到了全市人民的积极响应和参与,市区内大部分养犬户也严格遵守《开封市城市养犬管理办法(试行)》,部分养犬户主动到正规的动物诊疗机构进行狂犬疫苗的免疫注射,或者购苗后自行给爱犬注射狂犬疫苗。但是由于大家对狂犬病这个对公共卫生安全有着严重威胁的疾病,了解不深,认识不足,加上引导不够,管理疏漏,多次出现犬只伤人纠纷,严重的甚至致人死亡的公共卫生安全事件。 相似文献
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建三江分局前哨农场充分利用天然条件,建立绿色水稻食品基地10万亩,并在绿色食品生产中利用科技技术,突出提高农业综合生产力,保障粮食生产安全,促进职工增收,创造最佳的绿色食品水稻经济效率,总产值2009年增收1050万元.创造了良好的社会和经济效率.他们的主要作法是:充分利用科技人员,科学技术,加强对水田基本建设的投人,加强对职工的培训,强化管理. 相似文献
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砧木鉴定是果树种质资源学研究的重要内容。苹果属(Malus)砧木类型繁多,性状各异。应用不同技术鉴定苹果砧木,有利于砧木资源的保护和利用,有助于鉴别伪劣苗木,促进苹果生产的健康发展。传统的砧木鉴定法主要有植物学形态特征鉴定法、花粉电镜扫描法、染色体核型分析法和同工酶法等。近年来,DNA 指纹技术的出现为果树种质资源鉴定提供了强有力的工具。目 相似文献
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为获得鸡VEGF基因片段,原核表达GST-cVEG基因,并对融合蛋白进行分离纯化,应用RT-PCR从鸡睾丸中扩增出VEGF片段,将PCR产物克隆至pMD 18-T载体.随后,将cVEGF片段亚克隆至带有GST的原核表达载体pGEX-4T-2中,测序鉴定.将重组质粒pGEX4T2-cVEGF转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导,并进一步通过Ni-NTA Agarose亲合层析纯化,纯化产物以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,结果表明,成功地构建了原核表达质粒pGEX4T2-cVEGF.GST-cVEGF融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,Ni-NTA Agarose纯化后得到较纯的蛋白.Western blot分析证实,纯化后蛋白是GST-cVEGF融合蛋白,为进一步研究CST-cVEGF融合蛋白疫苗抗小鼠肿瘤模型奠定了基础. 相似文献