堆型艾美耳球虫ADF基因的原核表达与免疫原性

参考Gen Bank中收录的E.acervulina ADF基因序列设计1对特异性引物,以河北保定株堆型艾美耳球虫子孢子DNA为模板,用聚合酶链式反应(PCR)法扩增ADF基因。将扩增的ADF基因克隆至p MD18-T载体,转化感受态细胞DH5α,蓝白斑法筛选出阳性重组子,提取阳性质粒进行PCR、酶切鉴定及对序列确证。将扩增产物与原核表达载体p ET32a(+)连接,构建重组质粒p ET32a-ADF,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定。用E.acervulina重组质粒p ET32a-ADF免疫雏鸡,观察其对雏鸡细胞免疫和体液免疫功能的影响。结果显示,ADF基因扩增产物为729 bp,与预期结果相符。序列分析结果表明,该株的ADF基因序列与参考序列同源性达99.6%。表达出的ADF重组蛋白相对分子质量大小约为46 000。与健康对照组相比,重组质粒组淋巴细胞的增殖能力明显增强(P0.05),外周血中Ig G及IL-2含量均显著升高(P0.01),表明p ET32a-ADF质粒DNA能有效提高雏鸡的细胞免疫和体液免疫水平。     

堆型艾美耳球虫保定株裂殖子3-1E基因的克隆与序列分析

依据GenBank中收录的堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina,E.acervulina)关国株(US)3-1E基因序列,设计特异性引物,以堆型艾美耳球虫保定株裂殖子基因组RNA为模板,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增获得3-1E基因序列部分片段,将此片段克隆至pGM-T Easy载体中,经PCR、限制性内切酶鉴定和克隆片段的序列测定、比较,结果表明该克隆片段扩增准确、可靠.序列比较发现,此片段与E.acervulina美国株(US)株、E.acervulina QH株cDNA的核苷酸同源性分别为99.4%和99.6%.     

河北省鸡传染性法氏囊病超强毒株的分离鉴定

鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease，IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒引起鸡的急性、高度接触性、杀淋巴细胞性疾病。其特征是突然发病、病程短、发病率高、病鸡严重委顿、白色下痢、法氏囊内B淋巴细胞损伤、鸡体免疫能力抑制。我国于1979年先后在广东、上海等地发现本病，现已遍及全国各     

黄曲霉毒素对动物性食品的污染与检测

本文概述了黄曲霉毒素对动物性食品的污染,对人体健康的危害及其检测方法。     

堆型艾美耳球虫早熟减毒株子孢子体外脱囊试验

堆型艾美耳球虫早熟减毒株子孢子体外脱囊条件为0.75％胰酶,5％鸡胆汁,在38—40℃水浴箱内孵育2小时,脱囊率为94％。     

沙门氏菌对动物性食品的污染与检测

本文对沙门氏菌的生物学特性及其对动物性食品的污染和食物中毒的现况进行了概述,对检测方法进行了介绍。     

鸡的常见病毒性免疫抑制病的防治

马立克氏病(M D)、鸡传染性法氏囊病(IBD)、鸡传染性贫血病(CIA)是由病毒感染引起的免疫抑制病。本文就这几种常见疾病的免疫抑制机理及有关防治措施作一简要综述。1马立克氏病1.1免疫抑制机理由马立克氏病病毒(M D V)感染所导致的免疫应答的抑制是马立克氏病的一个重要特征,这决定于M D V分离株的致病力。造成免疫抑制后常会改变宿主对其他病原体的易感性。免疫抑制可能是M D V感染引起淋巴细胞溶细胞性感染的直接结果。一些报道提供的体外研究数据表明,马立克氏病肿瘤细胞本身可能就有免疫抑制活性,这可能是表达具有免疫抑制性的鸡…     

苯并芘对动物性食品的污染与检测

苯并芘（简称食品BAP）是多环芳香烃（PAH）类化合物中一种主要的污染物，是一种重要的化学致癌物，食用被其污染的食品，对人体健康有很大的威胁，应引起广泛重视。1苯并芘对动物性食品的污染苯并芘可通过各种途径进入食品，但主要通过以下几种途径。1．1食品加工过程的污染：食品加工过程的污染是构成食品污染的主要因素，食品在加工时，经烟民，烧烤，油炸等高温处理，可受到BAP的污染。由于BAP是烟中的一个重要成分，食品在烟熏过程中与燃料不完全燃烧产生的PAH，特别是BAP直接接触而受到污染。据报道烟熏肉制品，熏前新鲜猪肉…     

牛病毒性腹泻病毒RT—PCR检测方法研究

【目的】建立快速、简便、特异的检测牛病毒性腹泻病毒抗原的RT-PCR方法;【方法】根据已发表的牛病毒性腹泻病毒株(BVDV)5’端非编码区保守序列设计合成了两条引物,应用RT-PCR技术对两株BVDV标准株(OregonC24V and NADL)进行基因扩增,对扩增产物进行酶切鉴定。同时设猪瘟兔化弱毒疫苗株、轮状病毒株、MDBK细胞作对照;【结果】两株BVDV标准株均扩增出了长度为325bp的片段,扩增产物经酶切后形成长度为111bp和214bp两条片段,而对猪瘟兔化弱毒疫苗株、轮状病毒株、MDBK正常细胞扩增均为阴性,与预期结果一致。【结论】PCR检测方法可以快速准确地对牛病毒性腹泻-黏膜病作出诊断。该方法的敏感性可高达10-1TCID50。