牛病毒性腹泻/黏膜病病毒河北分离株的生物学特性

【目的】了解牛病毒性腹泻病毒河北分离株HB株的特性，阐明牛病毒性腹泻/黏膜病致病机理，更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据特进行此项试验；【方法】用理化学及生物学方法对BVDV河北分离毒株HB的特性进行检测，与BVDV准毒株Oregon C24V株进行比较，分析了其理化性及生物学特性。电镜负染检查可见直径为40~60nm有突起的圆形或近圆形的病毒颗粒,病毒在蔗糖中的浮密度为1.13~1.14g/cm3。与牛病毒性腹泻－粘膜病病毒颗粒相似。毒力测定TCID50为10-4.5。理化学研究表明，该病毒对氯仿、乙醚、胰酶敏感；不耐酸、对碱具有较强的耐受性。牛病毒性腹泻/黏膜病病毒对56℃ 30min较敏感，56℃ 70min可使其完全灭活。血凝试验表明，该病毒对鸡、兔、猪和绵羊的红细胞均无血凝性；5-碘脱氧尿核苷(5，-IUDR)不能抑制病毒的增殖，核酸分型试验表明该病毒株基因组为RNA；病毒纯化后经SDS—PAGE电泳出现了5条主要结构蛋白带，与BVDV国际标准毒株Oregon C24V株结果一致；【结论】河北分离株HB株为牛病毒性腹泻病毒。     

不同抗球虫药物对鹌鹑人工感染球虫病的防治效果观察

选用15日龄的鹌鹑200只,随机分为10组,20只/组。经口感染孢子化鹌鹑球虫卵囊,5×104个/只。药物预防组在感染的同时给以规定浓度的妥曲珠利、地克珠利、马杜拉霉素、盐霉素抗球虫药物;药物治疗组在出现球虫病症状时投服上述药物,同时设感染不用药发病对照组和不感染不用药健康对照组。观察4种抗球虫药物对人工感染鹌鹑球虫病预防和治疗效果。结果显示,各药物组的抗球虫指数均高于感染不用药发病对照组,均有预防和治疗鹌鹑球虫病的效果,其中妥曲珠利药效最佳。     

牛病毒性腹泻病毒HB-bd毒株E2基因的克隆表达及免疫原性分析

为了研究牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的免疫原性,试验采用PCR技术扩增牛病毒性腹泻病毒HB-bd毒株去除跨膜区的E2基因,将获得的s E2基因克隆到p ET20b载体构建重组质粒p ET20bs E2,并转化大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞及诱导表达,应用SDS-PAGE、Western-blot和Dot-ELISA对表达产物进行分析,取纯化的表达产物加等量佐剂免疫家兔,观察免疫效果。结果表明:s E2基因得到了高效表达,表达的重组蛋白分子质量约为37.0 ku,表达产物能诱导免疫家兔产生高效价抗BVDV抗体。说明表达产物s E2蛋白具有良好的免疫原性。     

堆型艾美耳球虫ADF基因的原核表达与免疫原性

参考Gen Bank中收录的E.acervulina ADF基因序列设计1对特异性引物,以河北保定株堆型艾美耳球虫子孢子DNA为模板,用聚合酶链式反应(PCR)法扩增ADF基因。将扩增的ADF基因克隆至p MD18-T载体,转化感受态细胞DH5α,蓝白斑法筛选出阳性重组子,提取阳性质粒进行PCR、酶切鉴定及对序列确证。将扩增产物与原核表达载体p ET32a(+)连接,构建重组质粒p ET32a-ADF,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定。用E.acervulina重组质粒p ET32a-ADF免疫雏鸡,观察其对雏鸡细胞免疫和体液免疫功能的影响。结果显示,ADF基因扩增产物为729 bp,与预期结果相符。序列分析结果表明,该株的ADF基因序列与参考序列同源性达99.6%。表达出的ADF重组蛋白相对分子质量大小约为46 000。与健康对照组相比,重组质粒组淋巴细胞的增殖能力明显增强(P0.05),外周血中Ig G及IL-2含量均显著升高(P0.01),表明p ET32a-ADF质粒DNA能有效提高雏鸡的细胞免疫和体液免疫水平。     

堆型艾美耳球虫(E.acervulina)单克隆抗体细胞株的建立

利用细胞融合技术 ,将堆型艾美耳球虫 (Eimeria acervulina)的子孢子可溶性抗原免疫的小鼠脾细胞和 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,通过间接 EL ISA方法筛选 ,得到能稳定分泌针对堆型艾美耳球虫子孢子的特异性抗体细胞株 5 B4和5 G7。用间接 EL ISA方法对这 2株细胞的腹水效价进行测定 ,结果 5 G7细胞株的腹水效价为 1∶ 2 6 2 14 4 ,5 B4细胞株的腹水效价为 1∶ 1310 72。腹水经正辛酸 -硫酸铵二步法纯化 ,SDS- PAGE结果表明 ,此方法对 5 G7细胞株纯化效果较好 ,但对 5 B4细胞株纯化效果不理想     

河北省坝上高原地区绵羊消化道线虫优势虫种季节动态研究

河北省坝上高原地区完全放牧条件下的绵羊消化道线虫优势虫种(捻转血矛线虫、羊仰口线虫和食道口线虫)季节动态：幼虫的感染强度在温暖的4～9月最低，而寒冷的10～3月较高；成虫的感染强度在6～9(或8)月最低。血矛线虫4～6月和9月～次年1月感染强度较高，羊仰口线虫除6～8月外其余各月份感染强度较高。食道口线虫4～6月为感染强度的高峰期。     

堆型艾美耳球虫早熟减毒株裂殖子的细胞培养研究

堆型艾美耳球虫早熟减毒株裂殖子在鸡胚成纤维细胞和鸡胚肝细胞中不能继续发育,在鸡胚小肠上皮细胞和雏鸡肾细胞中可发育到卵囊阶段。     

五种不同来源柔嫩艾美耳球虫耐药性虫株的检测

五种不同来源柔嫩艾美耳球虫耐药性虫株的检测秦建华，赵月兰，田勇，张明勇（张家口农业高等专科学校０７５１３１）国外，近年来对鸡球虫的耐药性进行了大量研究，为合理选择和正确使用抗球虫药以防治球虫病奠定了良好的基础。我国在这方面研究较少，实际用药过程中十分...     

肉的种类鉴别

我国有句俗语“挂羊头,卖狗肉”较形象地说明了假冒食品在古今中外皆有之。我国1982年制定的食品法对假劣食品,作了有关规定。尽管如此,一些唯利是图的食品生产经营者,仍常常在食品生产流程中施行掺假,以及在市场销售中以假乱真,用低质内充优质肉从中取利。为了维护消费者利益,应进一步加强肉品的检验。     

副溶血性弧菌对动物性食品的污染及检测

副 溶 血 性 弧 菌(VibrioParahamolyticus)又名致病性嗜盐菌(Halophilic vibrio)。1951年藤野等在日本首先报告了这类细菌,随后在世界上许多国家相继报道,特别是东南亚国家,副溶血性弧菌是最常见的食物中毒菌之一。1 副溶血性弧菌的生物学特性 本菌为革兰氏阴性、多形态细菌,呈杆状或稍弯的弧状。在不同的培养基上生长的细菌形态差异很大。一般是两极浓染,多单在,