温度、pH对杜仲抗真菌蛋白抗菌活性的影响

以白色念珠球菌为指示菌,用纸片法显示的抑菌圈直径考察了温度、pH值对杜仲抗真菌蛋白活性的影响。杜仲抗真菌蛋白在室温（21℃）、37、50、60、70、80、90、100℃下分别处理10min、30min,用pH值为5．8、6．0、6．5、7．0、7．5、8．0的系列磷酸盐缓冲液溶解后,纸片法检测活性,测量抑菌圈直径。结果表明,杜仲抗真菌蛋白的最适作用温度为37℃,在100℃加热30min后,抑菌圈直径为13．16mm,抑菌环宽度为2．64mm;在选定的pH值范围,杜仲抗真菌蛋白都有显著抑制活性,最适pH值为7．0,抑菌圈直径为13．23mm,抑菌环宽度为3．62mm。杜仲抗真菌蛋白对高温有一定耐受性,可适应较宽作用的pH值范围。     

转KN1毛果杨细胞分裂素、赤霉素含量及其相关形态结构

为了研究KN1基因超量表达对木本植物生长发育的影响,本研究测定了转KN1基因毛果杨细胞分裂素类激素及赤霉素的含量,并进行表型及解剖结构观察。结果表明,转基因毛果杨植株细胞分裂素类激素ZR、dhZR和iPA的含量分别为14.14ng/g、18.29ng/g和12.43ng/g,明显高于对照的9.44ng/g、12.47ng/g和7.60ng/g,而赤霉素GAs含量为9.61ng/g,低于对照的12.14ng/g,从而引起其植株矮化、分枝增加、叶片增厚、叶色变深、表皮细胞增大、栅栏和海绵组织发达等现象。本研究将为探索KN1基因对木本植物生长发育的影响提供依据。     

蒺藜状苜蓿中MtERF-6基因的克隆及序列分析

乙烯反应元件结合蛋白属于植物特有的一个转录因子家族,这个家族保守的DNA结合域称为ERF结构域.根据对蒺藜状苜蓿Medicago truncatula测序的数据库进行分析,设计合成引物,通过RT-PCR扩增得到了乙烯反应元件结合蛋白基因(MtERF-6),并测定了其核苷酸全序列.该基因完整的读码框包括654 bp,编码218个氨基酸.用此片段的氨基酸序列通过GenBankBLAST分析表明,该基因属于EREBP(Ethylene responsive element binding proteins)家族,其核苷酸与已报道的ERF4[Gossypium hirsutum]、ATERF-9[Arabidopsis thaliana]、NtERF3[Nicotiana tabacum]、NsERF3[Nicotiana sylvestris]、CaEREBP-C1[Capsicum annuum]的相似性分别为45%、47%、41%、40%和42%,是新的基因.MtERF-6的核酸序列在GenBank发表,登录号为DQ344024.     

缺素培养对杜仲幼苗生长及橡胶生物合成的影响

为研究缺素处理对杜仲幼苗橡胶合成的影响,以华仲15号当年生种子为材料,以Hoagland营养液配方为基础营养液,对杜仲幼苗分别进行13种必需营养元素N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl的缺素培养,观察幼苗缺素特征及缺素培养对杜仲幼苗生长发育和橡胶生物合成的影响.结果显示,(1)缺素处理的杜...     

FaGST基因改良菊苣新种质创制

谷胱甘肽转移酶(glutathione transferases,GSTs)在植物抵御逆境胁迫中具有非常重要的作用.从高羊茅叶片中克隆获得FaGST基因,对其进行酶切位点分析,设计酶切引物,通过Bam HI和PstⅠ双酶切将目的基因片段连接在真核表达载体pCAMBIA 1300-35 S上,成功构建pCAMBIA 13...     

黑糯米成熟胚愈伤组织培养及植株再生研究

对贵州惠水黑糯、黑糯141成熟胚愈伤组织培养及再生条件的研究结果表明,分步消毒可以减少外植体的污染率,在附加2,4-D 2 mg/L的NBD 1培养基中,成熟胚愈伤组织诱导率较高,分别为93.84%、90.52%。愈伤组织的继代培养是分化前必不可少的过程,适当干燥处理及合适的激素配比能够提高愈伤组织分化率,贵州惠水黑糯分化率为95.18%,黑糯141分化率为89.38%。2个黑糯米品种在附加NAA 0.5 mg/L的生根培养基中均能正常生根。     

不同方法对头花蓼组织培养中种子消毒效果的影响

为了寻找头花蓼种子无菌萌发的最佳消毒方法,用HgCl2、H2O2、NaClO分别对头花蓼种子进行消毒处理,研究了用氯气熏蒸与未熏蒸对头花蓼种子的消毒及发芽影响.结果表明:头花蓼种子用氯气熏蒸24 h,酒精消毒10 s,再用0.1％的HgCl2消毒3 min效果最好,发芽率达98％,无污染.     

从江香猪γ干扰素基因克隆与序列分析

试验旨在研究从江香猪γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)基因克隆与序列分析。试验提取贵州从江香猪肝脏组织总RNA,反转录生成cDNA,采用2对特异性引物进行巢式PCR扩增从江香猪IFN-γ(CJ-poIFN-γ)基因编码区,将其克隆至pUCm-T载体上,获得重组质粒pUCm-CJpoIFN-γ,并测序鉴定;利用NCBI、SOPMA、SignalP-4.1等在线服务器软件、DNAStar软件对CJ-poIFN-γ进行序列分析。结果表明,CJ-poIFN-γ基因编码区长501bp,编码166个氨基酸;核苷酸序列比对结果显示,CJ-poIFN-γ与梅山猪、剑白猪、藏猪、成华猪、荣昌猪、印度猪、长白猪、内江猪同源性为99.4%~100.0%;进化树分析结果显示,CJ-poIFN-γ与梅山猪、剑白猪、藏猪、成华猪亲缘关系较近;CJ-poIFN-γ基因编码蛋白不存在跨膜结构,为分泌蛋白,前23个氨基酸为信号肽序列;CJ-poIFN-γ基因编码蛋白二级结构主要以α-螺旋(50.60%)和无规则卷曲(33.14%)为主,B细胞表位主要位于62-65、84-87、113-115、144-156和162-166位氨基酸。试验结果为进一步研究IFN-γ的生物活性、加快从江香猪品种资源的有效利用奠定基础。     

百脉根离体再生体系的优化

本研究以百脉根叶片、叶柄、茎段、花柄和根组织为外植体,比较了它们在不同激素配比培养基中的愈伤组织、不定芽及不定根的分化情况,优化并建立百脉根组织培养再生体系。研究结果显示:除根外,其它组织均可通过组织培养获得再生植株;外植体类型是影响愈伤组织、不定芽及不定根诱导的主要因素,叶片外植体的诱导效果最好。优化的百脉根组织培养再生体系为:使用叶片外植体,愈伤组织诱导培养基为MS+3.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA、芽分化培养基为MS+0.3 mg/L KT、生根培养基为1/2 MS+0.4 mg/L IBA。通过该体系60~75 d可获得百脉根再生植株,约为无性繁殖周期的1/3~1/2。     

喜树快速繁殖与再生体系建立

喜树(Camptotheca acuminata)是珙桐科(Nyssaceae)的一种落叶阔叶树，为我国南方特有树种，含有抗肿瘤作用的喜树碱。本研究建立了喜树愈伤诱导，器官发生与植株再生体系以及喜树成年茎段和无菌苗子叶节的快繁体系。以喜树无菌苗子叶和胚轴为外植体，采用不同激素组合诱导愈伤组织，只有培养在NN69 6-BA(1．0mg／L) IAA(0．05mg／L) AS(afenine sulfate，10mg／L)的培养基上的愈伤组织出现器官分化。每个愈伤分化的芽数平均为6个，分化率达86％。培养在附加0．5mg／L的6-BA和0．1mg／L的KT的NN69培养基上的芽生长既快又好。以子叶节和茎段为外植体，附加6-BA(0．5mg／L)，IAA(0．1mg／L)的NN69培养基对喜树茎段丛生芽的诱导效果较好，子叶节丛生芽诱导培养基为NN69附加6-BA(0．2mg／L)，IBA(0．05mg／L)，AS(afenine sulfate，10mg／L)，附加6-BA(0．25mg／L)，IAA(0．05mg／L)的培养基对丛生芽增殖效果明显。所诱导的芽苗在附加0．5mg／L IBA，0．1mg／LKT，10mg／L AS的B5培养基上诱导生根，生根率可达90％，平均根数6-8条。本研究为喜树的遗传转化提供了前提。