3种来源猪胚胎激活后6h内基因组DNA甲基化变化模式

主要探讨猪手工克隆(HMC)胚胎和体外受精(IVF)胚胎及孤雌激活(PA)早期胚胎发育过程中6 h内的单细胞核全基因组DNA甲基化模式.运用抗5-甲基胞嘧啶抗体免疫荧光和激光共聚焦显微镜检测相对荧先强度的方法,检测猪手工克隆胚在融合后6 h内全基因组DNA甲基化模式,并与同时期猪体外受精胚及孤雌激活胚胎进行比较,从而探讨这3种胚胎变化模式的异同.结果显示:3种不同来源的胚胎在培养后不同时间点比较时,2、4、6 h均呈强甲基化状态,且均呈下降趋势;在同时间点比较时,2 h和6 h这两个时间点检测到3种胚胎的相对荧光强度均差异不显著(P＞0.05),而在4 h时,HMC胚胎显著高于PA和IVF胚(P＜0.05).结论:猪手工克隆胚在融合后6h内虽然也发生类似IVF胚的全基因组DNA去甲基化,但其去甲基化不充分,甲基化程度偏高,这可能是导致核移植胚胎核重编程不充分、发育能力低的一个原因.     

胰岛素和半胱氨酸对猪孤雌胚早期体外发育的影响

探讨在NCSU-23中添加不同浓度的胰岛素和/或半胱氨酸对猪孤雌胚体外发育的影响.结果表明,在试验1中,添加胰岛素的质量浓度为2.5 μg/mL时,猪孤雌胚的卵裂率及囊胚率显著高于对照组(P<0.05);在试验2中,添加半胱氨酸的浓度为1.2 mmol/L时,猪孤雌胚囊胚发育率最高,但添加的浓度大于4.8 mmol/L时,猪孤雌胚的囊胚发育率显著降低(P<0.05);在试验3中,联合添加胰岛素和半胱氨酸时能显著提高猪孤雌胚的囊胚率(P<0.05).因此,在NCSU-23中添加一定浓度的胰岛素和/或半胱氨酸能提高猪孤雌胚发育到囊胚阶段的能力.     

乌鲁木齐北郊日光温室茄子嫁接育苗技术

<正>乌鲁木齐北郊是首府反季节蔬菜重要的生产基地。近年来,由于重茬栽培,土壤病害严重,造成蔬菜产量低、品质差、经济效益下降。为解决这一生产难题,在乌鲁木齐北郊开展了日光温室茄子嫁接及高产栽培技术示范,对增强茄子抗病性,提高产量和品质作用显著。现将乌鲁木齐北郊日光温室茄子嫁接育苗技术要点总结如下:     

不同类型纸袋套袋对“红地球”葡萄品质的影响

研究了3种类型纸袋套袋对＂红地球＂葡萄品质的影响。结果表明,青岛进口白色木浆纸半透明袋对＂红地球＂葡萄品质有显著影响,无论是外观品质还是内在品质均优于北京白色单层蜡纸半透明袋和烟台黄色单层专用纸袋。因此,建议生产上使用青岛进口白色木浆纸半透明袋。     

西藏黄牛胎儿成纤维细胞的分离与培养

[目的]以西藏黄牛胎牛为材料,建立西藏黄牛胎儿成纤维细胞系,为在西藏特殊生境条件下高原物种的动物克隆及其他细胞生物学研究提供理想的生物学材料。[方法]对西藏黄牛胎儿成纤维细胞的分离和培养进行了研究。利用组织块法成功分离培养西藏黄牛胎儿成纤维细胞,对细胞的传代培养、形态学和动力学进行观察与分析。[结果]所建立的西藏黄牛胎儿成纤维细胞系具有典型的成纤维细胞形态;西藏黄牛胎儿成纤维细胞要经历滞留期、对数期、平台期,分别为0-2 d、2-7 d、7-8 d,细胞群体倍增时期为60 h。[结论]成功培养了西藏黄牛胎儿成纤维细胞。     

热处理对条斑紫菜中砷含量及组成的影响研究

研究浸泡、蒸煮、油炸、焙烤、微波等热处理方式对条斑紫菜中砷的含量及组成的影响。结果表明,在浸泡、蒸煮热处理中,几乎所有样品中的总砷、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、无机砷的含量呈降低趋势;在油炸热处理中,随着油炸温度的升高、油炸时间的延长,样品的总砷含量降低,但一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、无机砷的含量变化趋势复杂;经微波处理的样品,随着微波强度的升高,总砷、二甲基砷(DMA)、无机砷的含量呈现较明显的升高趋势,且二甲基砷(DMA)的含量明显高于一甲基砷(MMA)。     

猪卵母细胞和早期胚胎透明带杨氏模量变化

在39℃环境下,利用微管吸吮的方法,在倒置显微镜下,通过显微操作装置用显微玻璃管吸吮猪卵母细胞和早期胚胎来测定其透明带的杨氏模量。结果显示,从猪卵巢抽取的未经体外成熟培养的卵母细胞(GV期)一直到早期囊胚(未扩张囊胚)阶段,其透明带杨氏模量一直都无显著变化,均集中在20 kPa左右,但当发育到扩张囊胚期其透明带杨氏模量明显变大(P0.05),且扩张囊胚中化学激活的明显大于体外受精的(P0.05)。结果提示,在猪卵母细胞和早期胚胎发育进程中,其透明带的刚性在扩张囊胚期最大,这为通过某些理化方法来帮助扩张囊胚期的胚胎孵化,从而提高囊胚的孵化率并最终提高妊娠率提供了力学方面的理论参考。     

西藏牦牛胎儿成纤维细胞的分离与培养

对西藏牦牛胎儿成纤维细胞的分离和培养进行了研究.利用组织块法和酶消化法均能成功分离培养西藏牦牛胎儿成纤维细胞,通过细胞的传代培养、形态学和动力学观察与分析,结果表明,所建立的西藏牦牛胎儿成纤维细胞系具有典型的成纤维细胞形态;西藏牦牛胎儿成纤维细胞要经历滞留期、对数期、平台期,分别为0～2 d、2～7 d、7～8 d.试验结果表明,已成功培养了西藏牦牛胎儿成纤维细胞.     

广西巴马小型猪供核细胞的传代培养和冷冻保存及肌肉成纤维细胞HDAC1基因的mRNA的表达

本试验旨在建立猪颗粒细胞、胎儿成纤维细胞和新生巴马小型猪不同组织来源成纤维细胞的分离及传代培养技术体系和冷冻保存方法,并比较猪卵丘/颗粒细胞和新生巴马小型猪肌肉成纤维细胞HDAC1基因的mRNA表达的差异,从分子水平上鉴定新生巴马小型猪肌肉成纤维作为供体细胞的可行性。运用组织块贴壁培养方法分离不同来源的组织细胞进行培养,并比较了常规冷冻保存和微量冷冻保存对细胞复苏率的影响,同时,运用实时定量PCR的方法检测猪卵丘/颗粒细胞和新生巴马小型猪肌肉成纤维细胞HDAC1基因mRNA表达的动态变化。研究结果表明：（1）猪颗粒细胞单层细胞的生长需要5～6d;用组织块法获得猪胎儿成纤维细胞单层的生长时间为10～11d;用组织块法可以成功地对新生巴马小型猪的肌肉、肺、肾脏、心、睾丸组织的成纤维细胞进行分离和传代培养,肾和睾丸组织的成纤维细胞贴壁生长后,长满形成单层细胞需要12～13d,而肺、肌肉和心脏组织的则需要15～16d。（2）细胞的微量冷冻保存效果优于常规冷冻保存（P〈0.05）。（3）猪卵丘/颗粒细胞与新生巴马小型猪肌肉成纤维细胞HDACl mRNA的相对表达量为1.000比0.985,两者差异不显著（P〉0.05）。新生广西巴马小型猪不同组织来源的成纤维细胞的分离及传代培养和微量冷冻法,丰富了这种猪体细胞的分离培养种类,为其体细胞核移植研究提供了丰富的供体细胞,并从表观遗传的角度分析,鉴定了新生巴马小型猪胎儿成纤维细胞与猪卵丘/颗粒细胞一样适合作供体,为核移植前的供体细胞鉴定提供了新的方法。