规模化养猪场的环境污染和应对措施

随着养猪场规模越来越大，集约化和机械化程度的提高，所引起的环境问题越来越引起人们的关注。要实现养猪业可持续发展．必须改善生态环境．无害化处理及资源化利用畜禽废弃物，保持养猪生产与环境保护的协调。     

我国2000～2001年J亚群禽白血病病毒分离株gp85基因的序列比较

以相当于J亚群禽白血病病毒（ALV-J）原型株HPRS-103基因组碱基#5394-#5416及#7811-#7794的1对引物对PCR，在2000-2001年从山东，河南和宁夏分离的8株ALV-J中，有6株可以扩增出含gp85基因的2.2kb左右的特异性片段，对其中5株的扩增片段做了序列分析，结果表明，这5个毒株的囊膜糖蛋白gp85与原型株hprs-103有93.4%-96.8%的同源性，与我国最早的分离株SD99024有93.7%-98.7%的同源性，它们相互之间的同源性为91.2%-98.7%，由此说明，我国AVL-J的gp85基因正在不断发生变异。     

表达绿色荧光蛋白的伪狂犬病毒Bartha-K61株TK-突变株的构建

提取伪狂犬病毒(PRV)Bartha—K61株基因组DNA为PCR扩增模板，并根据GenBank已发表的PRV Ka—plan株UL区UL25、UL24、UL23、UL22基因序列，选择保守序列设计了两对引物，分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R)，L包括部分UL25、全部UL24、部分TK，R包括部分TK及部分UL22，L和R的拼接片段中TK基因内部缺失270个核苷酸。将L片段和R片段克隆于pBlueseript M13—载体上，获得pSKLR；再将绿色荧光蛋白载体pEGFP—C1上含GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插人pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLRG。提取pSKLRG质粒，经单酶切线性化后用脂质体与PRV Bartha—K61株共转染143TK^-细胞，在细胞培养液中有5—溴脱氧尿嘧啶(BrdU)存在的条件下筛选出表达绿色荧光蛋白的重组PRV Bartha—K61毒株：PRV rBGFP。     

可见光分光光度法测定畜禽舍内的氨气含量

采用可见光分光光度法测定畜禽舍氨气含量，并与检气管比长度法、纳氏试剂比色法进行对照，结果基本一致。本法具有简便、快速、准确、重现性好等优点，可作为目前家畜环境中氨气含量测定的最好方法。     

酵母菌性乳腺炎的诊治试验

奶牛乳腺炎是奶牛乳腺发生的一种炎症,是造成奶牛业损失最严重的疾病之一.细菌、病毒、真菌、支原体等均可引起奶牛乳腺炎,90%以上的乳腺炎都是由细菌引起的,抗生素疗法是最传统、最常规的治疗方法.笔者在临床治疗中,遇到几例顽固性乳腺炎,大剂量使用多种抗生素治疗均无效,乳腺红肿更加明显.经实验室检查,诊断为酵母菌感染,遂用自制中药"乳肿消"治疗11例,其中10例是继发于细菌性乳腺炎,全部治愈.     

猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E基因的序列结构分析

对猪伪狂犬病毒鲁A株(PRVLA株)gE基因进行了克隆和序列测定。应用DNAStar程序分析了PRV国内外各分离株以及PRV与HSV-1、BHV-1、EHV-1、CHV-1、MDV-1、SHV-SA8、SVV、ILTV的gE基因。PRV各分离株的gE基因有很高的同源性。不同疱疹病毒的gE核苷酸和氨基酸的同源性很低,但具有相似的结构。对上述α疱疹病毒的gE氨基酸序列进化树分析可以将其分为四个特定的组:单纯疱疹病毒组,水痘疱疹病毒组,类马立克氏病病毒组,传染性喉气管炎病毒组,推测α疱疹病毒的gE基因在进化上可能起源于ILTV的gE基因的或其前体基因。而且gE基因的进化趋势与其宿主的进化情况一致。     

利用半套式PCR扩增16S rRNA基因检测牛和猪附红细胞体

根据GenBank收录的猪和牛附红细胞体16SrRNA基因序列设计1对通用引物，在其上游引物内侧叉设计1条分别针对猪和牛附红细胞体的特异性引物。以这4条引物对出现附红细胞体痛典型症状及疑似症状的猪和牛的血样DNA进行半套式-PCR扩增。结果显示，该反应阳性率为58．3％，低于临床解剖和镜检结果。对谈基因的序列测定结果进行分析，表明不同动物附红细胞体的16SrRNA基因同源性在80％以上。从谈基因来看，附红细胞体与立克次氏体没有同源性，而与肺炎支原体和穿透支原体亲垮关系较近。     

鲁南青年山羊肺炎链球菌病的诊治

2003年9月份作者从泰安市某养殖户发病死亡的鲁南山羊采取病料，进行实验室诊断，确诊为山羊肺炎链球菌。具体情况如下。     

添加绿汁发酵液对苜蓿青贮料发酵品质的影响

用未预干和预干的开花初期的苜蓿原料草，添加绿汁发酵液及将其稀释调制成的绿汁发酵液，探讨绿汁发酵液对青贮料发酵品质的影响，发见，除了未预干草中的dPFJ20绿汁发酵液的添加之外，其它的绿汁发酵液都明显改善了苜蓿青贮料的品质。     

瘤胃纤维分解细菌的分离培养

反刍动物的瘤胃内容物中,共生着多种微生物群体,他们在动物机体进行营养转化过程中起着重要作用。其中纤维分解细菌,在利用秸秆中的纤维进行营养转化过程中具有重要功能。为了了解反刍动物瘤胃内容物中纤维分解细菌的存在分布和活性,及其对机体营养状况的影响,我们应用人工培养基