绿衣观音土曲中微生物的分离鉴定及发酵生理特性测定

前文我们介绍过绿衣观音土曲的沿革及其制作工艺,并认为它是一种较为独特的小曲类型。因此进一步研究其微生物种类,将给生产提供直接或间接的依据。本文主要报道汉阳县红星酒厂所制绿衣观音土曲中微生物的分离鉴定及其发酵生理特性测定的结果。     

1株环境源单增李斯特菌的分离鉴定及生物特性分析

【目的】探究牦牛屠宰场中存在的单增李斯特菌对牦牛肉造成污染的风险。【方法】通过细菌分离培养、形态观察、生化试验及分子学方法对牦牛屠宰场50份污水样品中的单增李斯特菌进行分离鉴定;通过PCR方法对分离株血清型和毒力基因进行鉴定和检测,并测定分离株在不同生长条件下D_{600 nm}值;通过细胞的黏附和侵袭试验及小鼠半数致死量(LD₅₀)确定分离株的毒力。【结果】从50份污水样品中分离出1株革兰氏阳性短杆状细菌。分离株在李斯特菌显色培养基上为蓝绿色菌落,镜检为革兰氏阳性两端钝圆的短杆状菌,疑似为单增李斯特菌。生化试验结果显示,分离株可水解七叶苷,发酵葡萄糖、麦芽糖和鼠李糖,MR、VP、动力、过氧化氢酶试验为阳性,甘露醇和木糖发酵试验为阴性。系统进化树显示,分离株与单增李斯特菌EDG-e具有高度同源性,序列相似性为99%,血清型鉴定其血清型为1/2a。毒力基因检测结果显示,分离株携带inlB、inlC、inlJ、actA、plcA、prfA、mpl、hly、inlA、SigmaB毒力基因。抗应激能力试验显示,分离株在低温、强酸、强碱、高盐、乙醇胁迫和氧化...     

曲霉种间原生质体融合改良产淀粉酶能力的研究

原生质体制备与融合是重要的细胞工程技术,有利于实现远缘遗传物质的直接交换,促进遗传资源创新。本试验用Olympus BHS显微镜观察了曲霉原生质体融合全过程;采用淀粉-麸皮-硫铵培养基、淀粉-麸皮-豆粕培养基、马铃薯蔗糖琼脂培养基(PDA)等研究曲霉融合子及亲株产淀粉酶能力的特点;比较分析了亲株和融合子产淀粉酶性能与温度稳定性;比较研究了曲霉亲株和融合子淀粉酶的淀粉-聚丙烯酰胺非变性垂直平板凝胶电泳特征和各菌株可溶性蛋白质的淀粉-聚丙烯酰胺凝胶电泳特征。结果表明:曲霉原生质体融合过程很快,整个融合过程在5 min之内完成;融合子及亲株产淀粉酶随培养基、培养时间不同而变化;F05融合子在淀粉-麸皮-豆粕培养基产酶水平达(61 111.42±123.30)U/g,比亲株M70和M4分别高204.81%和114.00%,耐高温性能也有所提高;2种电泳结果都能够特异性显示淀粉酶带、重复性好。可见,原生质体融合是改良曲霉淀粉酶的有效方法。     

几种酸泡菜中乳酸菌的分离与鉴定

从几种酸泡菜发酵的不同阶段分离得到乳酸菌1488株。经鉴定,它们分别属于:肠膜明串珠菌、类肠膜明串珠菌、葡聚糖明串珠菌、小片球菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、发酵乳杆菌、棒状乳杆菌等。     

1株跨种裂解李氏杆菌噬菌体的分离鉴定

本研究旨在获得天然李氏杆菌噬菌体,提供防治李氏杆菌病新型生物制剂,减少抗微生物药物的使用,抑制病原菌耐药性的产生。利用产单核细胞李氏杆菌作为宿主菌对屠宰场污水进行双层琼脂平板法筛选,获得噬菌体,并对其进行透射电镜观察、生长特性检测(温度、pH、一步生长曲线、最佳感染复数、有机溶剂影响)、基因组酶切鉴定和全基因组测序分析。分离出的产单核细胞李氏杆菌噬菌体中,选取1株裂解性强,遗传稳定的噬菌体进行后续试验,并命名为LP8;经电镜观察为肌尾科噬菌体,可以跨种裂解18株产单核细胞李氏杆菌和5株威尔斯李氏杆菌,确定LP8的最佳感染复数为1、最适生长温度为45 ℃、最适pH为7;在6种有机溶剂中,仅异戊醇可导致LP8活性丧失;对提取的基因组进行酶切鉴定,确定为双链DNA;LP8全基因组测序结果表明,基因组大小为87 038 bp、含有120个编码基因、编码基因的累计长度为76 326 bp、编码基因的平均长度为636 bp、编码区域长度占基因组的比例为87.69%。本试验分离出产单核细胞李氏杆菌噬菌体,并对其噬菌能力和应用价值进行鉴定。分离出的LP8噬菌体相较于李氏杆菌的噬菌体,细菌裂解能力更强,适应环境范围更广。本研究为实验室后续建立产单核细胞李氏杆菌噬菌体库和产单核细胞李氏杆菌噬菌体的其他应用提供了良好的基础。     

乳酸发酵在酸腌菜加工中的应用

蔬菜的腌渍不但能保存蔬菜的鲜味及营养物质不受腐败细菌的危害,且能进一步改善蔬菜的风味,酸香爽口,有增进食欲、助消化、清理肠胃的功效。我国制作腌菜酸菜等食品的历史十分久远,有文字记载者已有二千余年。然对发酵机制的了解,对作用微生物的研究,在国内迟至四十年代才有正式报道。现根据现有资料对这一问题作一简要的介绍。一、常见的乳酸细菌及其主要性状能产生乳酸的细菌很多,我们通常所说的乳酸细菌是指那些发酵产品为乳酸的细菌。在蔬菜腌渍过程中常见的乳酸细菌主要有: 1.链球菌属(streptococcus)。细胞球形,呈链状排列。糖类经双磷酸巳糖途径降解,产生右旋乳酸,为正型乳酸发酵。多来源于动物及其制品。常见的种有乳脂链球菌(S.Cremoris)、乳链球菌(S.lactis)。2.明串珠菌属(Leuconostoc)。细胞球形,呈链状排列。糖类经单磷酸巳糖途径降解,产生左旋乳酸,为异型乳酸发酵。多来