甘蔗独脚金内酯生物合成基因ScCCD8的克隆与表达分析

【目的】克隆甘蔗的ScCCD8,分析其序列特征并预测其功能,研究在甘蔗不同组织部位、不同胁迫处理条件以及不同生长时间点ScCCD8的表达情况,为该基因在甘蔗基因工程育种中的应用提供理论支撑。【方法】以NCBI中检索的甘蔗CCD8同源片段EST序列为模板设计引物,扩增甘蔗CCD8的片段,采用RACE和RT-PCR技术分别从甘蔗品种新台糖22号中克隆CCD8的5′、3′目的片段和全长cDNA序列,以生物信息学方法对序列进行预测分析,利用qRT-PCR方法分析CCD8在不同组织、不同逆境胁迫条件下和不同生长时间点的表达特性。【结果】克隆获得甘蔗CCD8,命名为ScCCD8,GenBank登录号为KP742973.1。该cDNA全长2 016 bp,含有1个1 623 bp的完整开放阅读框（ORF）,编码540个氨基酸,编码的蛋白质分子量为59.534 kD。生物信息学分析表明ScCCD8编码的蛋白是定位于叶绿体上的非分泌性蛋白,不是典型的跨膜蛋白,没有信号肽位点。存在着多个糖基化位点和磷酸化位点等活性位点。序列分析表明,ScCCD8与其他植物的CCD8蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,甘蔗ScCCD8与高粱的CCD8蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析表明,ScCCD8的表达具有组织特异性,在根中的表达量最高,是老叶中表达量的18倍。其在模拟重度干旱胁迫（20% PEG）、盐胁迫（200 mmol·L^-1 NaCl）、磷缺乏（1/8 mmol·L^-1）和营养缺乏(纯水培养)4种胁迫处理下,茎尖中的ScCCD8均被诱导表达,且在处理24 h以后,ScCCD8的表达量增加较为明显。在不同生长时期,ScCCD8在甘蔗不同生长时期的茎尖中均有表达,且在幼苗期的表达量高于萌芽期和分蘖期。【结论】从甘蔗品种ROC22中克隆获得的甘蔗独脚金内酯生物合成关键基因ScCCD8是CCD8基因家族成员,推测ScCCD8可能与甘蔗SLs响应逆境胁迫有关。     

国外引进甘蔗品种比较试验初报

对引进的9个甘蔗品种在云南开远进行了品比试验,观察测量各品种相应的农艺性状及产质量指标,并对得到的数据进行分析比较,筛选出了综合性状表现较优的品种4个。试验结果对甘蔗良种的扩繁、示范、推广及进行杂交利用有着重要的指导意义。     

DTOPSIS法对甘蔗新品系的综合评价

采用DTOPSIS法对12个甘蔗新品系进行了综合评价,评价结果表明：云98-46、云98-236、云00-45、云98-13和云99-596五个品系综合性状优于双对照,云01-932优于CK1,次于CK2。以上品系应重点试验和评价。其余材料综合性状皆次于双对照,仍需作进一步试验观察或给予淘汰。     

新台糖系列品种后代实生苗甘蔗黑穗病抗性研究

新台糖系列甘蔗品种是我国重要的甘蔗品种和亲本,利用其作为亲本,易于培育出更为优良的杂交后代。本研究利用7个新台糖系列甘蔗亲本,配制20个组合,对其杂交组合进行黑穗病抗性评价,结果表明:20个组合人工接种黑穗病菌后全部发病,参试组合平均丛感病率与平均茎感病率为极显著正相关;组合间丛感病率和茎感病率均为极显著差异,说明人工接种胁迫试验能够将抗病性强、中、弱的组合鉴别出来,从而将感病严重的组合进行淘汰;通过聚类分析,20个组合抗病性可分为3种类型,组合3和12号聚为一类,发病最重,平均丛感病率、平均茎感病率分别为24.74%、11.5%和28.48%、18.44%,该类组合可以予以淘汰,组合7、10、11和13号聚为二类,发病中等,其余组合聚为三类,发病较轻。     

利用正交设计优化甘蔗SRAP-PCR反应体系

利用正交设计L16(45)对甘蔗SRAP-PCR反应体系的五大因素(Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA、Taq酶)在4个水平上进行优化,得到如下结论:各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小依次是:Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA;通过对各因素进行筛选,建立甘蔗SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为:dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.1μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L、Taq酶0.25U和模板DNA 60 ng。     

甘蔗新品种云蔗94—375的选育

云蔗94-375系从Cp72-1210x崖城73-512的杂交后代中选育的优良甘蔗新品种.其表现为生势强、茎径粗壮、直立紧凑、丰产中熟高糖、适应性广.产量(102.6t/hm2)比对照新台糖10号(P.OC10)增产18.8%,比对照桂糖11号增产10.9%;平均甘蔗含糖分(14.45%)比ROC10高0.10个百分点,比桂糖11号高0.15个百分点;平均含糖量(14.7 t/hm2)比ROC10增产17.7%,比桂糖11号增产13.1%.该品种免疫花叶病,抗黑穗病,抗旱性好,适宜于中等肥力的旱坡地、水浇地及水田种植.可作为糖料或糖能兼用甘蔗新品种推广应用.     

国家甘蔗品种第六轮区试云南开远新植试验初报

2008年第六轮国家甘蔗区域性试验开远新植结果表明,综合性状表现较好的品种有：福农02-3924、云蔗99—91和RB76—5418：表现一般的品种有：闽糖95—261、闽糖96—6016;表现有缺陷的品种有福农99—20169、赣南99—591、桂辐98—296、桂引6号（B8）、粤甘16号、粤甘18号,因出现重蒲,可能难于在生产上推广应用。     

云南省第十一轮甘蔗品种区试结果评价

通过对16个甘蔗品种8个参试点两年新植一年宿根24次试验结果的收集整理、分析,结果表明,表现为高产的品种有：VMC88-354、德蔗05-77、云蔗05-197、云蔗04-621等;表现为高糖的品种有：德蔗04-1、Q124、德蔗05-77、云蔗06-267等;单位面积含糖量较好的品种有：德蔗05-77、VMC88-354、云蔗05-197、云蔗04-621等.多年多点试验结果为甘蔗品种的推广应用提供了科学依据.     

甘蔗胚性愈伤组织的诱导和抗褐化研究

甘蔗组织培养是提高甘蔗新品种繁育效率,降低繁种成本的重要手段,其在甘蔗新品种繁育推广应用过程中有着重要作用.以云蔗06-407、云蔗03-194、云蔗03-258及云蔗05-51这4个甘蔗新品种的心叶为材料,研究不同2,4-D浓度对胚性愈伤组织诱导的影响.试验结果表明,不同基因型甘蔗品种胚性愈伤组织诱导需要的2,4-D浓度不同.以云蔗03-258为抗褐化材料研究甘蔗抗褐化培养基,结果表明诱导培养基中加入PVP或活性炭能有效地减轻组织酚害.     

云南甘蔗品种第11套区试开远试点评价

对云南省甘蔗品种第11套区试开远试点进行分析评价,结果表明:14个参试品种综合性状较优的有云蔗05-197、云蔗04-621、德蔗05-77、VMC88-354和云蔗01-1413,可以考虑给予进一步繁殖、示范、推广.