布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体多重TaqMan荧光PCR检测方法的建立及应用

为建立一种应用于宠物布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体的高通量、高灵敏、高特异的检测方法,根据各自保守序列合成了特异性引物及Taq Man探针,通过优化反应体系,建立了多重Taq Man荧光PCR检测方法,并利用该方法对2021年厦门市抽检的304份犬猫全血样品进行了检测。结果显示：该方法特异性好,可特异性扩增布鲁氏菌、弓形虫和巴尔通体阳性核酸,其他对照菌株核酸均无扩增信号;抗干扰性强,检测混合模板时,不同成分间无交叉干扰反应;灵敏度高,最低检出限均为3×10⁰ copies/μL;重复性好,批内及批间重复试验变异系数均小于2%。应用该方法在4 h内即可完成304份临床样品的快速检测,此次临床抽检样品中未检出布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体阳性核酸。该方法大大提高了检测效率,为多种动物布鲁氏菌、弓形虫及巴尔通体感染的早期诊断及筛查提供了技术支持。     

2株H11N3亚型禽流感病毒厦门分离株的基因特征及遗传进化分析

从厦门地区健康鸭群和环境中分离到2株H11N3亚型禽流感病毒(简称SD61和XA33),对其进行全基因组序列测定、遗传演化分析和特殊位点的氨基酸分析。结果显示:2株分离株的HA裂解位点均符合低致病性禽流感病毒特征,NA颈部均无缺失碱基;内部基因中M1基因N30D、T215A突变,PB1基因发生S622G突变,NS1均存在PL基序,为ESEV,SD61株中NS1发生P42S突变,提示当前分离株已出现致病性增强的变化。8个基因片段均属于欧亚谱系,除了HA基因外,与A/duck/Fujian/SD063/2017(H3N3)毒株其他7个基因片段有高度的同源性,同时与浙江、江西、江苏等不同亚型禽流感病毒同源性很高,说明这2株H11N3毒株发生基因重组现象。本研究结果将为本地区禽流感病毒生物学特性研究和防控提供科学依据。     

有母源抗体的三黄鸡免疫H5N1亚型禽流感疫苗后抗体水平的测定

通过对三黄鸡禽流感母源抗体和免疫抗体水平连续跟踪,探讨H5N1亚型禽流感母源抗体和免疫抗体消长规律.结果表明:该批鸡母源抗体水平较低,下降较快:免疫后30 d左右,抗体滴度达到4.5 log2,免疫后56 d,抗体达到高峰,其免疫保护期可达3个月.     

节约型园林理念下满都海公园花镜营建研究

介绍了2020年呼和浩特满都海公园在节约型园林理念指导下,在沿人工湖坡地和林下山丘进行花镜营建的实践案例。在花镜的设计、施工和养护管理中采取了充分利用原有场地,因地制宜设计,铺设节水灌溉系统,整形修剪原有植物,大量种植多年生与野生花卉等节约型园林营建措施。沿人工湖坡地花镜中种植7种颜色的花卉和44种观赏草,林下山丘花镜采用耐阴和护坡2种组合播种方式。营建中还存在着花材选择范围小、雨水利用率低、养护人员专业素质有待提升等问题。2处花镜建成后均达到了时时有花开,处处有景致的良好效果,得到了市民的普遍赞誉,是节约型园林的一次有益探索。     

2007~2012年苏州河水质变化分析与评价

利用2007~2012年苏州河沿程5个断面的水质监测数据,采用时间序列法、秩相关系数法分析了6年间苏州河水质的变化,运用综合水质标识指数评价苏州河水质等级,以期为评价苏州河当前的水环境质量提供参考数据,为进一步采取水环境保护措施提供决策依据。结果表明:2007~2011年,苏州河水质污染程度降低,北新泾断面NH₃-N和CODMn浓度显著下降,2012年各断面水质指标浓度比2011有所上升;5个断面中,以北新泾断面水质最差;6年间,苏州河水质基本符合地表水环境质量标准中Ⅴ类水标准,2011年水质最佳,达到Ⅳ类水标准。     

四重荧光定量PCR技术用于食品中4种肠道致病菌的检测

用已建立的四重荧光PCR方法、传统国标或行标方法、MALDI Biotyper高通量微生物鉴定法(基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法)对随机抽取的14份食品样品进行检测,比较3种检测方法的匹配性。并用四重荧光PCR对农贸市场、大型超市采集的10类食品共205份样品进行检测。旨在研究四重荧光PCR法在食品中检测沙门氏菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌和迟缓爱德华菌的应用及食品中这4种菌的污染情况。在205份食品样品中,受污染的食品有110份,污染率53.66%(110/205),同时检出两种及两种以上致病菌的样品有62份,占污染样品的56.36%(62/110)。迟缓爱德华菌大肠菌、弗氏枸橼酸杆菌、奇异变形杆菌、沙门氏菌的检出率分别为7.80%(16/205)、53.66%(110/205)、26.34%(54/205)、5.85%(12/205)。在这3种检测方法中,四重荧光PCR的特异性好、准确性高,操作简便省时,更适用于食品中4种致病菌的快速检测。抽检的食品样品中存在这4种菌的污染,尤以生禽畜肉和水产品污染严重,需加强对食品加工、流通环节的卫生监管和监测。     

厦门市同安区生猪腹泻流行病学调查

为掌握厦门市同安区生猪腹泻情况,于2013年1月7日至18日,对11个镇、街道、农场的不同养殖规模猪场猪群进行了2012年12月生猪腹泻流行病学调查,通过实地走访,共填写合格问卷100份.调查分析显示,全区2012年12月生猪腹泻的发病率为0.0417头/猪-月.根据不同养殖规模的猪场猪群进行统计,以年出栏量100~499头的规模猪场猪群发病率最高,为0.1450头/猪-月;对不同猪群进行统计,以仔猪的发病率和病死率最高,分别为0.0876头/猪-月和32.9%;对11个镇、街道、农场的猪群进行统计,以大同街道猪群的发病率最高,为0.1550头/猪-月.厦门市同安区2012年12月生猪腹泻主要是病毒性和细菌性腹泻.     

淡水鱼塘叶绿素a与环境因子间影响关系的通径分析

为简便而有效地研究池塘水体中叶绿素a(Chl.a)含量与环境因子间的复杂关系,建立通径分析方法将各因子与Chl.a的相互影响关系清晰化。利用上海地区38批次淡水鱼养殖池塘水质监测数据,通过通径分析筛选出影响Chl.a含量变化的关键因子。结果显示:影响Chl.a含量变化的关键因子是高锰酸盐指数(CODMn)、活性磷(PO_4~--P)、透明度(SD)和溶解氧(DO);CODMn和PO_4~--P是影响养殖水体中Chl.a含量的主导因子,它们的决定系数分别为0.426和0.325,占所有关键因子决定值的89.6%;利用关键因子对Chl.a建立多元回归线性方程:Chl.a=60.17+9.90 CODMn+100.30(PO_4~--P)-1.74 SD-4.82 DO(R=0.784),并通过检验。     

某地区养猪场生物安全调查分析

为了解福建某地区生猪养殖环节目前的生物安全水平,提升动物疫病防控工作的针对性、科学性,于2020年3~4月采用问卷调查和现场调查相结合的方式,对该地区现有的51个养殖场(户)进行调查。结果显示:该地区现有养殖场均具备基本生物安全硬件设施,制度执行基本到位,但存在部分场址位置、场区布局不合理,人员与车辆管理不到位,从业人员水平良莠不齐等问题。建议持续推进规范化养殖场建设,提升从业人员疫病防控水平,加大监督检查力度,全面提高该地区养殖场的生物安全水平。     

多重PCR鉴定猪链球菌2型毒力菌株

为了鉴定猪链球菌2型毒力菌株,根据猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的荚膜多糖基因(capsular polysaccharide 2J,cps2J)、溶菌酶释放蛋白基因(muramidase-released protein,mrp)、毒力相关序列orf2基因(virulent-associate sequence orf2)设计合成3对引物,建立三重PCR检测方法,并对PCR扩增产物进行测序、酶切、特异性及敏感性实验。结果显示:26株SS2致病菌株均同时扩增出这3个目的片段,5株其他血清型猪链球菌(SS1,SS7,SS9)及13株非猪链球菌的其他猪源链球菌(兰氏B群、C群和D群)均未扩增出cps2J和mrp片段,检测结果与菌株的已知毒力因子背景完全相符。26株SS2的扩增片段经HincⅡ酶切鉴定,与预期结果一致。以SS2四川株ZY05719为模板的三重PCR产物(cps2J,mrp,orf2)测序结果与GenBank上相关序列比较,同源性分别为99%、100%、94%。该PCR敏感极限是600个细菌/每个反应。本试验所建立的三重PCR,特异性强,敏感性好,可用于实验室的快速诊断。