猪伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体制备与鉴定

为获得猪伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白单克隆抗体,选择原核表达的重组gE蛋白免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,将其脾细胞与SP2/0进行融合,经间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,结果获得了2株能稳定分泌抗PRV gE蛋白的杂交瘤细胞,命名为E3B8和E5C11。间接ELISA检测2株杂交瘤细胞的培养上清液抗体效价为1∶6.4×10~3,腹水的抗体效价分别达到1∶3.28×10~6和1∶6.55×10~6。2株杂交瘤细胞的染色体数分别为105和108。E3B8亚类鉴定重链为IgG1,轻链为κ链;E5C11亚类鉴定重链为IgG2b,轻链为κ链。Western blot检测显示2株单克隆抗体腹水均能与PRV重组gE蛋白发生特异性反应,间接免疫荧光试验(IFA)检测显示2株单克隆抗体均能与PRV分离毒株感染的BHK-21细胞发生特异性反应,交叉反应性检测显示2株单克隆抗体与常见病毒不发生交叉反应。表明制备的2株gE蛋白单克隆抗体效价高、特异性强,为gE蛋白结构与功能分析以及PRV免疫诊断试剂盒的开发奠定了基础。     

基因4型HEV上海株ORF_2编码蛋白表达及其抗原性分析

为了表达基因4型戊型肝炎病毒(HEV)上海株ORF2编码蛋白并分析其抗原性,采用套式RT-PCR方法扩增上海猪基因4型HEV代表株结构蛋白基因ORF2部分片段,构建含有该基因片段的pET30a(+)重组表达质粒,命名为pET-E;将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,经1mmol/L IPTG诱导得到表达,进行SDS-PAGE分析,然后用Western blot鉴定其抗原性,最后纯化蛋白。结果:SDS-PAGE证明该片段得到融合表达,分子量为33 ku。Western blot分析表明,重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性;该融合蛋白含有组氨酸标签,可以用MagExtractor-His-tag-kit进行纯化。用纯化的重组蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA检测89份猪血清样品,阳性率达80.4%,与已有的试剂盒检测结果相比,阳性符合率达95%。     

气相色谱-串联质谱法快速检测当归中102种农药残留

建立了当归中102种农药残留的快速检测方法。样品采用优化的QuEChERS前处理方法,利用气相色谱-串联质谱 (GC-MS/MS) 检测,动态多反应监测 (dMRM) 模式,基质匹配外标法定量。结果表明:在样品前处理过程中,经对提取溶剂、提取体系、净化体系的组成和用量进行筛选优化后,样品采用乙腈、1.0 g氯化钠、4.0 g无水硫酸镁、1.0 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸二钠盐提取,无水硫酸镁800 mg、PSA 150 mg、C₁₈ 150 mg净化,通过基质匹配外标法校正,当归中基质效应对目标化合物的定性、定量影响明显减弱。在0.02~0.64 mg/kg范围内,102种农药的质量浓度与对应的峰面积间呈良好的线性关系,R2均大于0.99,检出限为0.002 5~0.025 mg/kg,定量限为0.005~0.05 mg/kg;在0.04、0.08和0.32 mg/kg 3个添加水平下,102种农药的平均回收率为52 %~128%,RSD为1.0%~10 %。该方法快速简便、耗时短,具有良好的灵敏度、正确度和精密度,为提高当归中农药安全水平,降低健康风险提供了一种快速、高效、可靠的分析手段。     

植物病原细菌Ⅲ型效应子的双向作用

病原细菌Ⅲ型效应子对寄主植物防卫反应的抑制和诱导决定了互作中植物抗(感)病性状。本文概述了植物病原菌Ⅲ型效应子抑制和诱导寄主植物防卫反应的双向作用,所涉及的抑制和诱导作用主要包括植物过敏反应、植物细胞壁介导的防卫反应以及植物抗病信号介导的抗性反应等。本文还对植物病原菌Ⅲ型效应子双向作用的研究和应用进行了展望。     

岱衢族和闽——粤东族大黄鱼生长对比试验

大黄鱼为我县海水养殖鱼类的主要品种,其养殖品系主要产自福建官井洋的闽——粤东族大黄鱼。长期以来,官井洋的闽——粤东族大黄鱼经多代近亲交配及繁育造成严重的种质退化。为选择和推广优良大黄鱼品种,在2005～2006年,我们开展了岱衢族大黄鱼与闽——粤东族两种品系大黄鱼深水网箱养殖对比试验,现将试验结果报告如下：     

夏洛来牛和利木赞牛改良本地黄牛的生产性能的比较

本地黄牛和世界良种肉牛相比,存在颈部短而簿,耆甲低平,胸部狭窄,背腰欠宽广,后躯短窄,尻部尖斜,体型小,后躯发育不良,生产性能较低等缺点。随着商品经济的发展,对本地牛进行杂交改良,改变其体型缺陷,提高产肉率,缩短饲养周期,已势在必行。为今后黄丰改良工作提供科学依据,现将夏洛来牛和利木赞牛改良本地黄牛的比较结果报告如下:     

非洲猪瘟防控期间基层防疫体系建设研究

非洲猪瘟(ASF)在2018年8月首次传入我国,是一种传染性极强的疫病,对生猪养殖以及食品安全造成十分严重的影响,应充分加强非洲猪瘟防控工作,并强化相应的防疫体系建设。基于此,对当前基层防控非洲猪瘟面临的困难加以分析,并在此基础上提出强化防疫体系建设各环节管理、提升相关管理人员专业化水平、实施严格的管控制度以及完善餐厨垃圾回收处理等有效预防措施。     

长期有机无机肥配施下玉米氮素利用率和红壤碱解氮含量的阶段性变化

【目的】充足的氮素供应是玉米高产的保证,研究红壤上玉米氮素吸收和土壤氮素盈余对长期不同施肥措施的响应特征,旨在为红壤地区玉米持续高产和土壤氮素科学管理提供依据。【方法】本研究依托江西进贤双季玉米定位试验,选择不施肥(CK)、常量化肥(NPK)、两倍量化肥(DNPK)、有机肥(OM)与常量化肥+有机肥(NPKM) 5个处理,以10年为一个试验阶段,分析了35年来玉米产量、氮肥利用率、0—20 cm土层土壤碱解氮含量以及氮素表观盈余量等的阶段性变化规律。【结果】施肥处理(NPKM、DNPK、OM和NPK)玉米35年平均产量较不施肥对照(CK)分别显著提高了3.36～9.07、3.31～5.64、2.46～6.72和1.91～3.70倍,氮素吸收量分别显著提高了5.20～11.93、4.33～7.02、3.66～5.90和1.80～3.64倍。在试验0～10年,各施氮处理间玉米产量无显著差异,氮素吸收量NPKM、DNPK和OM处理间无显著差异,但均显著高于NPK处理。在试验11～20年,NPKM和DNPK处理产量与氮素吸收量显著高于NPK和OM处理;在试验21～35年,NPKM处理的产量和氮...     

不同密度调控强度对华北落叶松人工林土壤质量的影响

[目的]探究不同密度调控强度华北落叶松人工林土壤质量的变化规律,为合理利用林地资源及人工林的可持续经营提供理论依据.[方法]以山西太岳山好地方林场华北落叶松人工林为研究对象,基于土壤密度、含水率、养分含量、酶活性等18项土壤指标,并结合主成分分析和相关系数法建立土壤质量评价最小数据集,采用加权求和指数法对不同密度调控强...     

甜菜收购质量管控与以质论价

甜菜作为重要的糖料作物在中国种植已有100多年,但甜菜收购一直没有根据甜菜含糖率确定甜菜价格,而根据甜菜含糖率的多寡来确定甜菜价格在国际上是通行做法.甜菜制糖企业应制定甜菜收购质量标准,以此综合评定甜菜块根的切削质量、外观质量和品质质量,合理扣除杂质、残土等,并根据块根含糖率确定甜菜价格,实行甜菜收购以质论价.在执行甜...