鄱阳湖区家禽及野生候鸟禽流感感染情况的调查

2012~2014年,为了调查鄱阳湖地区家禽及野生候鸟禽流感的流行病学现状,以RT-q PCR试验为检测手段,在鄱阳湖区庐山区、湖口县、星子县等10个县的24个乡镇,共采集样品1 281份。其中,野生候鸟16个品种,样品135份,包括粪拭子102份、组织样本33份;家禽样品1 050份,包括粪拭子684份、喉拭子137份、泄殖腔拭子229份;水样96份。结果表明:共检出禽流感H2亚型病毒核酸阳性3个,H9亚型病毒核酸阳性2个。由此推断:鄱阳湖区家禽及野生候鸟现阶段没有感染高致病性禽流感,但存在低致病性禽流感感染的情况。     

香蕉束顶病毒简易制样技术及分子检测

筛选了5对依据香蕉束顶病毒（Banana Bunchy Top Virus,BBTV）外壳蛋白基因（CP）、复制酶基因（RF）保守区段设计的引物.结果显示,以RF为靶序列的引物,香蕉束顶病毒PCR特异性高,可以从感病组织中检测到ng（10-9g）级的病毒.样品提取缓冲液经过Sephadex凝胶介质过柱可有效浓缩病毒、去除PCR反应抑制物质,提高检测灵敏度,降低检测的假阴性.     

液相色谱-串联质谱法评估不同脱毒剂对脱氧雪腐镰刀菌烯醇的脱毒效果

评估市场上不同脱毒剂对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的脱毒效果,为饲料厂家及养殖户选择优质脱毒剂提供参考依据。从市场上收集了7种不同的脱毒剂(1~7号),对DON进行体外脱毒试验,采用液相色谱-串联质谱法分别测定脱毒前后霉变玉米中DON的含量,并计算其相应毒素的下降率。结果表明,不同厂家生产的脱霉剂脱毒效果差异显著,7种脱毒剂对DON的脱毒效果从好到差依次为7号、5号、6号、4号、1号、3号和2号。属酵母细胞壁类脱毒剂的5~7号对DON的脱毒效果比属铝硅酸盐类脱毒剂的1~4号明显,差异显著。     

培养基营养成分对香蕉枯萎病尖孢镰刀菌生长的影响

通过对香蕉枯萎病发病株病组织的分离、纯化,得到香蕉枯萎病病原菌--尖镰孢菌古巴专化型[Fusarium oxysporum f.sp.cubense(E.F.Smith)Snyder et Hansen].该病原菌在不同pH值培养基上培养4 d后,发现尖孢镰刀菌菌落在pH值4.0～9.0范围内均可生长,pH值为6.0～7.0时最适,菌落直径平均在3.7～3.9 cm之间.尖孢镰刀菌在不例营养成分的培养基上培养,结果表明,N源对尖孢镰刀菌菌丝的生长影响大于C源.生长到第6天时,全糖型培养基产孢量最大,且小型分生孢子的产孢量也最大,可使香蕉苗发病率达到100%.而大型分生孢子的产生最佳培养基为低氮型培养基.     

香蕉两种主要病毒多重PCR检测方法的建立

 根据香蕉束顶病(Banana bunchy top virus, BBTV) 和香蕉花叶心腐病(Cucumber mosaic virus,CMV) 的复制酶基因、外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物对, 在BBTV单一PCR和CMV RT-PCR优化体系的基础上, 建立了可同时检测BBTV、CMV的多重PCR检测方法。此方法可以特异地从感染BBTV和CMV的样品中扩增出2条带, BBTV (748 bp) 和CMV (557 bp) 。扩增产物序列测定结果表明, BBTV扩增产物与GenBank中其他分离物的核苷酸序列同源性为91% ～99% , CMV扩增产物与GenBank中其他分离物的核苷酸序列同源性为93%～98%。     

香蕉镰刀菌枯萎病拮抗放线菌的分离筛选及其抑制效果的初步评价

香蕉镰刀菌枯萎病是一种由尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f. sp. cubense侵染引起的维管束系统性病害。本试验对从海南省东方、八所、黄流、三亚和广东省湛江、徐闻、海安等香蕉种植地采集的根际土样进行拮抗放线菌的分离纯化,得到放线菌菌株139个。通过纸片扩散法,筛选出对香蕉枯萎病4号生理小种具有拮抗作用的菌株8个。进一步试验表明,其中4个菌株不仅对香蕉枯萎病生理小种4号的菌丝生长有良好稳定的抑制作用,且对另外14个不同专化型病原菌也有一定的抑制作用。另外,分别将这8株放线菌发酵上清液与香蕉枯萎病病原菌孢子悬浮液混合12h后,有6株放线菌发酵上清液对病原菌孢子萌发的抑制率超过85%。盆栽试验结果表明,2株放线菌对香蕉枯萎病防效达86%以上,极显著地高于恶霉灵药剂处理。     

利用香蕉水培系统测定枯萎病病原菌致病力

 为建立一种评价香蕉枯萎病病原菌(Fusarium oxysporum f.sp. cubense)菌株间致病力差异的体系,在改进的香蕉水培系统基础上,对影响香蕉枯萎病菌致病力的接种菌液浓度、类型及处理方式等因素开展分析,同时与不同菌株盆栽测定结果进行比较以验证该方法的可靠性。结果表明:在香蕉水培系统下,将摇培5 d的菌液稀释10倍以上,使孢子初始浓度为1×10⁶ cfu·mL^-1,直接加入该菌液50 mL即可用于致病力评价,且不同菌株用该测定方法与盆栽测定的致病力结果基本一致。该方法的建立为香蕉枯萎病菌致病力的评价提供了快速简便的方法,也为下一步解析尖孢镰刀菌致病相关基因功能和致病机理及抗病品种的选育奠定了基础。     

地高辛标记探针原位杂交检测猪延髓TPH2 mRNA的表达

为了从组织学水平研究色氨酸羟化酶2(TPH2)在猪体的表达通路,探讨5-羟色胺(5-HT)与猪厌食、呕吐的关系,试验采用PCR法对猪TPH2 cDNA探针进行地高辛(digoxigenin,DIG)标记,应用核酸分子原位杂交技术检测猪延髓组织内TPH2 mRNA的表达。结果表明:地高辛标记的TPH2cDNA探针使用简便,灵敏度高,特异性强,杂交结果直观,探针保存时间较长,无放射性污染;猪延髓组织内的血管壁、蛛网膜、下橄榄核区与极后区的神经元均有阳性反应,TPH2 mRNA的表达较高,提示了TPH2在这些部位的存在与5-HT的转运具有相关性。     

绿僵菌对东亚飞蝗的室内致病力测定

在室内用喷雾法测定了6株绿僵菌对东亚飞蝗的致病力,结果表明,其致病力强弱与菌株种类和接种剂量有密切关系,菌株对东亚飞蝗的致病力由强到弱顺序为MA3>MA4>MB6>MA6>MA5>MA11。接种MA3菌株的孢子浓度在1.0×108个/mL情况下,对4龄蝗蝻的LD50为4.46d。用不同剂量的MA4菌株的孢子油悬浮剂涂抹法接种4龄蝗蝻,发现其LD50仅为15.39个/头。另外,观察发现,MA3菌株具有很强的2次侵染能力。     

巴西橡胶树自根幼态无性系的试管微繁

带有腋芽的橡胶花药苗切段接种在MS 6—BA2mg/L的培养基上,30～40天新芽可长至3～5cm高,并可切割再次增殖;切取3～5cm高带叶片的增殖芽作为插条,基部经50～100mg/L IBA预处理再插到生根培养基上,生根率达95％;诱发的根系与茎杆之间愈合良好,输导组织连接紧密,生根植株移栽成活率达85％以上。