基于PCR的两步法丝状真菌基因敲除方法

基因敲除是研究真菌基因功能的重要方法之一,目前,丝状真菌敲除多采用基因两侧的同源臂对基因组的靶标进行同源替换,然后采用抗生素对转化子进行筛选,但这存在着筛选效率低、假阳性率高、操作复杂等问题。本研究以稻瘟菌为研究对象,采取以下步骤对此进行优化:1)构建HPH-GFP(潮霉素-绿色荧光蛋白)融合表达载体; 2)分别用带有接头序列的引物克隆待敲除基因上、下游片段; 3)克隆上、下游片段与HPH-GFP组成嵌合体片段; 4)嵌合体片段转化真菌原生质体; 5)对敲除突变体进行筛选。结果表明,该法操作简便、高效,除了用潮霉素HPH作为筛选标记外,还可用GFP作为荧光筛选标记,极大提高了筛选效率,可用作丝状真菌基因功能研究。     

水生植物的种植与栽后管理

近年来,随着水景园林的发展与水体生态修复的需要,水生植物的应用越来越广泛.水生植物是指生长在水中或至少是生长在由于水分充足而周期性缺氧的基质上的任何植物,尤其是生长在湿地或其它水环境中的植物.根据水生植物的生活方式和形态特征的不同,可以把水生植物分成挺水植物、浮叶植物、漂浮植物、沉水植物和湿生植物等类型.不同类型的水生植物,其种植季节、种植基质、种植密度、种植深度、种植方法与栽后管理也有所不同.     

PCR技术在动物疫病诊断中的应用

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）,又称体外扩增技术,最早于1985年由Kary Mullis研制,是一种根据生物体内DNA复制的特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术,具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点。它能特异地在体外扩增微量基因或DNA片段,将皮克（pg）水平的DNA特异地扩增10^6～10^7倍,达到检测诊断的目的;在对特异性基因进行扩增时可使核苷酸的错配率低于万分之一;其操作过程在2～4h即可完成,有效缩短了诊断的时间。PCR技术目前已广泛应用于从基因扩增、基因检测到基因克隆、基因改造、     

池养大弹涂鱼的个体生殖力

研究了浙江温岭池塘养殖的1、2龄大弹涂鱼的个体生殖力及其与各生物学指标的关系.结果表明,大弹涂鱼的个体绝对生殖力F、相对生殖力FL、FW均服从正态分布;1、2龄鱼个体生殖力F、FL差异高度显著(P＜0.01),FW差异不显著(P＞0.05);个体生殖力,与体长、体重、纯体重、性腺重均呈线性正相关,与成熟系数呈幂函数关系,R与各生物学指标均呈幂指数相关,FW与性腺重和成熟系数呈幂函数关系,而与其它指标关系不显著.给出了个体生殖力F、FL、FW均值的95%置信区间及与各指标的多元回归方程.     

饲用小麦种植和利用的试验研究

本研究筛选小麦品种在南方冬闲田进行饲用种植和利用试验。结果表明在饲用小麦适应性好、产量较高,条播行距25 cm、播种量10 kg/667 m²时,其鲜草产量可达4 780 kg/667 m²,干草产量为1 070 kg/667 m²、全株收货时干物质29.85%。在南方冬闲田合理种植小麦,具有较好的生长优势,可获得较高生物学产量,适宜进行刈割鲜饲或青贮加工利用。本文可为本区域及相似地区的饲用小麦生产提供参考依据,缓解冬季饲草严重缺乏等实际生产问题。     

玉米苗期氮素吸收利用效率差异及聚类分析

采用循环营养液培养法,研究安徽省23个玉米主推品种苗期吸收与积累氮素的差异.结果表明,在常氮(5 mmol/L)和高氮(45 mmol/L)水平下,玉米茎叶干重、总干重、叶面积、茎叶氮累积量和整株氮累积量的变异系数分别在0.34～0.58和0.35～0.51;其中,常氮和高氮条件下茎叶干重、总干重、叶面积、茎叶氮累积量和整株氮累积量呈极显著正相关(P<0.01),其相关系数分别在0.529～0.998和0.821～0.995.以玉米茎叶干重、总干重、叶面积、茎叶氮累积量和整株氮累积量为玉米苗期氮高效评价指标,玉米苗期氮效率综合值在常氮和高氮水平下分别在0.199～1.113和0.216～1.128,其中,浚单20在常氮和高氮条件下的氮效率综合值均大于0.90,且聚类分析中均在第一类群,为氮高效品种.     

不同提取工艺对补骨脂黄酮溶出的影响

为了筛选中药补骨脂黄酮溶出的最佳方法,本试验采用半仿生法、水煎法、有机溶剂浸提法等方法对补骨脂黄酮溶出进行了研究,结果表明,苯提取时,不同温度提取的补骨脂黄酮量不同,以45℃最佳;半仿生法提取温度在100℃时,补骨脂黄酮溶出最高,与37℃提取量比较,差异显著,p＜0.05,与水提法(100℃),苯萃取法比,差异极显著,p＜0.01.结论:半仿生法为提取补骨脂黄酮的最佳方法,在100℃时提取为半仿生法提取补骨脂黄酮的最佳条件.且半仿生法提取工艺操作简单,因此半仿生法提取是一种方便、提取率高的技术,可推动中药现代化的研究.     

机插水稻不同育秧方式对比试验分析

摘要：对机插水稻不同育秧方式进行对比试验分析，结果表明，相对于常规育秧，基质育秧秧苗素质高，水稻长势好，机械操作方便，经济效益好，生态效益明显。机插水稻基质育秧具有明显优势，矗大力椎产盔飘，