OPN基因序列分析及其在产蛋后期鸡胫骨中的表达研究

试验旨在研究鸡骨桥蛋白（osteopontin,OPN）基因的结构与功能,并探索其在蛋鸡产蛋后期骨骼组织中的表达特性。采集产蛋后期海兰灰蛋鸡胫骨组织进行RNA提取,根据GenBank数据库中公布的中国原鸡OPN基因序列（登录号：NC_006091.5）,利用Primer Premier 3.0在线软件设计引物,利用RT-PCR扩增OPN基因编码区（coding sequence,CDS）并对其进行生物信息学分析,实时荧光定量PCR检测海兰灰产蛋后期胫骨组织中OPN基因mRNA的表达。RT-PCR及测序结果显示,鸡OPN基因CDS区长795 bp,共编码264个氨基酸。应用Mega 6.0软件构建系统发育树发现,鸡与鹌鹑的亲缘关系最近,同源性为100%,OPN基因在禽类进化的过程中具有高度保守性。生物信息学分析表明,OPN为不稳定的水溶性蛋白,含有信号肽,无跨膜结构域,有27个O-糖基化位点、1个N-糖基化位点和34个磷酸化位点,亚细胞主要定位于细胞质（44.4%）和线粒体（33.3%）,二级结构主要是无规则卷曲和α-螺旋。实时荧光定量PCR结果表明,OPN基因mRNA在胫骨中的表达存在个体差异,但与骨骼强度无关。结果表明,蛋鸡产蛋后期OPN基因表达与骨断裂强度无显著相关,为进一步研究OPN基因在产蛋后期蛋鸡骨代谢中的作用机制提供依据。     

高、低钙饲粮交替饲喂对蛋鸡产蛋后期生产性能、蛋品质及血清指标的影响

本试验旨在研究高、低钙饲粮交替饲喂对蛋鸡产蛋后期生产性能、蛋品质及血清指标的影响。试验选取68周龄的大午粉1号蛋种鸡64只,随机分为2组,每组32只,单笼饲养于个体智能鸡笼内,对照组08:00和14:00分别饲喂43.3、86.7 g中钙饲粮(钙含量为3.66%),试验组08:00饲喂43.3 g低钙饲粮(钙含量为2.00%),14:00饲喂86.7 g高钙饲粮(钙含量为4.49%)。试验期为5周,其中预试期1周,正试期为4周。结果显示:试验组各周的平均日采食量、平均蛋重、产蛋率、料蛋比与对照组无显著差异(P0.05),但试验组各周的产蛋率在数值上高于对照组。试验组第2周的蛋壳厚度显著高于对照组(P0.05),而试验组各周蛋白高度、哈氏单位与对照组无显著差异(P0.05)。对照组中,18:00和22:00的血清钙含量显著高于10:00和14:00(P0.05),高于06:00和次日02:00(P0.05);试验组中,22:00的血清钙含量极显著高于06:00、10:00、18:00和次日02:00(P0.01),并显著高于14:00和18:00(P0.05);从06:00到22:00,试验组血清钙含量一直呈现增长的趋势,在22:00时,试验组血清钙、降钙素含量均显著高于对照组(P0.05)。由此得出,高、低钙饲粮交替饲喂(将高钙饲粮在下午饲喂)可提高蛋鸡产蛋后期的产蛋率和对钙的吸收和沉积,并且可在一定程度上改善蛋壳质量。     

禽白血病受体基因Tva和Tvb在大午粉蛋鸡中的分布研究

为研究抗A亚群禽白血病病毒受体基因(Tva)、抗B亚群禽白血病病毒受体基因(Tvb)易感和抗性等位基因在大午粉蛋鸡中的分布,试验选择健康的大午粉父母代蛋鸡35只,利用直接测序法进行基因分型并用BioEdit和Chromas软件进行序列比对分析,计算易感性和抗性等位基因的基因频率及基因型频率。结果表明:在所检测的大午粉商品蛋鸡中,Tva均为抗性等位基因Tvar3,其在内含子1区存在ACCCCGCCCC片段的缺失,并且缺失片段前的5个碱基突变为GCCCC; Tvb均为易感型,即Tvbs1(172C)和Tvbs4(184TG),其中Tvbs4中T、G等位基因频率分别为0. 81,0. 19,TT、TG和TT基因型频率分别为0. 62,0. 38和0. 00。说明大午粉蛋鸡群体中Tva基因为抗性等位基因,为培育禽白血病抗性品种提供了育种素材。     

5～9周龄大午粉1号商品代蛋雏鸡对饲粮能量和蛋白质的需要量研究

本试验通过建立饲粮能量或蛋白质水平与生长性能、血清生化指标、器官指数等指标的回归模型,旨在确定5~9周龄大午粉1号商品代蛋雏鸡对饲粮能量和蛋白质的需要量。选取810只遗传背景相同、体重接近、健康状态良好的28日龄大午粉1号商品代蛋雏鸡,随机分为9组,每组6个重复,每个重复15只蛋雏鸡。采用3×3双因素试验设计,设定饲粮中能量水平分别为12.42、11.92和11.42 MJ/kg,蛋白质水平分别为18.75%、17.75%和16.75%,共配制9种试验饲粮。试验期为35 d。结果显示:1)随着饲粮能量水平的升高,蛋雏鸡9周龄时胫长、胸宽、龙骨长、血清甘油三酯含量呈上升的趋势,5~9周龄平均日增重呈先下降后上升的趋势。2)随着饲粮蛋白质水平的升高,蛋雏鸡9周龄时体重(终末体重)、胸宽以及5~9周龄平均日增重呈先升高后降低的趋势。3)饲粮能量水平与蛋白质水平的互作效应对9周龄大午粉1号商品代蛋雏鸡的胸宽、龙骨长、血清甘油三酯含量有显著影响(P0.05)。4)通过对蛋雏鸡胸宽、龙骨长、血清甘油三酯含量与饲粮能量水平进行二次曲线拟合,得出饲粮适宜能量水平分别为11.420、11.483、11.379 M J/kg,平均值为11.427 M J/kg;通过对9周龄时体重与饲粮蛋白质水平二次曲线拟合,得到饲粮适宜蛋白质水平为17.902%。综合蛋雏鸡体尺指标、生长性能、器官指数和血清生化指标得出,5~9周龄大午粉1号商品代蛋雏鸡的能量和蛋白质需要量分别为11.427 M J/kg、17.902%。     

蜂胶醇提物对小鼠学习记忆的促进作用

目的:观察蜂胶醇提物对小鼠学习记忆功能的影响。方法:小鼠灌胃蜂胶醇提物,连续1周,利用Y型迷宫,观察蜂胶醇提物对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍、亚硝酸钠所致小鼠记忆巩固不良、三氯化铝所致急性衰老小鼠学习记忆障碍的影响。结果:蜂胶醇提物能明显改善东莨菪碱、亚硝酸钠和三氯化铝所致小鼠学习记忆功能障碍。结论:蜂胶醇提物可促进动物的学习记忆功能,可用于防治老年痴呆。     

鸡金银羽位点基因型PCR-RFLP鉴定方法的建立及其应用研究

为了建立一个快速、简便、有效鉴定鸡金银羽位点基因型的方法，试验通过对金银羽等位基因位点核苷酸序列进行分析，设计合成一对引物，应用该对引物对海兰褐、伊莎褐和大午金凤等采用金银羽羽色自别雌雄的蛋鸡配套系商品代公鸡（金银羽等位基因杂合，Ss）和母鸡（金羽等位基因半合子，s-）进行了PCR-RFLP基因型鉴定分析。结果显示，PCR-RFLP方法的鉴定结果与实际基因型一致；采用该方法从960只白羽太行鸡母鸡中鉴定得到3只不携带显性白羽等位基因的银羽母鸡（银羽等位基因半合子，S-）；以海兰褐父母代父本公鸡（金羽等位基因纯合，ss）作为父本与用本方法鉴定得到的3只银羽太行鸡母鸡进行杂交，来模拟金银羽自别雌雄的海兰褐蛋鸡商品代鸡的生产，获得的后代雏鸡绒羽颜色表型和性别符合海兰褐商品代鸡金银羽羽色自别雌雄的规律。上述结果表明，建立的PCR-RFLP方法能够快速、简便、有效且低成本地鉴定鸡金银羽位点基因型，为银羽纯合品系的建立提供了一个有效的个体金银羽位点基因型鉴定的方法。