徐淮地区黄皮洋葱大株繁种技术

随着徐淮地区黄皮洋葱的种植面积逐年扩大．洋葱种子需求量也随之增加。目前生产用种主要靠自繁解决（进口种子价格太高）,由于受繁种技术制约,繁制的种子不仅产量低,而且质量较差。笔者经过多年生产实践,摸索出较为成熟的黄皮洋葱大株繁种技术．现介绍如下。     

优质高产抗病芦笋新品系"96-1"选育

芦笋是我国创汇农业的重要产品,各地正在大力发展种植.目前我国芦笋生产用种还依赖进口,进口种子价格昂贵,且常有以劣充优、混杂退化、适应性差及茎枯病严重危害等问题.因此自育自繁芦笋良种已成为生产上的迫切需要.1993年起,本所通过引进芦笋品种资源,筛选优良易根型亲本,配制和筛选优良杂交组合,结合组培快繁技术,扩繁优良抗病组合的亲本株无性系进行规模制种,从而育成了高产、抗病的芦笋新品系"96-1".     

洋葱种质资源的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对52份洋葱(Allium cepa L.)种质资源进行遗传多样性聚类分析。从150个10 bp随机引物中筛选出28个扩增效果较好的引物进行扩增,80.3%的扩增条带表现出多态性。在遗传距离为0.150和0.132的水平上,52份材料分别被分为2类和5类,与生态型分类及以熟性、产量为特征的经济性状分类有一定的相关性。     

羊布鲁氏菌疫苗（S2株）口服免疫试验

为了解羊只布鲁氏菌疫苗(S2株)口服免疫的安全性及免疫效果,在甘肃省平凉市2个乡镇,各选1个行政村,选择散养户饲养的264只羊作为试验羊,进行小范围的布鲁氏菌S2株活疫苗口服免疫试验,其中3月龄以上羊只(包括怀孕母羊)每只口服活菌100×2亿,3月龄以下羊每只口服活菌100亿。分别在免疫后的30、60、180、210 d,采集试验羊血清样品,采用虎红平板凝集(RBT)+试管凝集联合试验(SAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)进行血清抗体检测。结果显示:试验组羊只免疫后均未出现异常反应,口服免疫30 d后,试验羊只2种检测方法检测的免疫抗体阳性率分别为47.3%和53.8%,不同时间2种方法的检测结果基本一致(P 0.05)。结果表明,布鲁氏菌S2株活疫苗按照试验剂量免疫安全有效,适用于所有月龄羊只以及怀孕母羊的整群免疫,可先行试点,逐步推广应用。     

洋葱不育性鉴定及组培扩繁研究

利用套袋自交及分子标记的方法,对田间观察到的连葱15号洋葱不育株进行育性鉴定,结果发现其自交不结实,orf725分子标记鉴定为CMS-T型不育;利用组织培养进行不育株扩繁,最后确定以洋葱鳞茎盘为外植体,含有7mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA的MS培养基增殖效果最好。另外利用根尖染色体计数鉴定组培苗仍为二倍体。     

多重PCR快速检测食品中单核细胞增生性李斯特菌检测分析

研究应用多重PCR方法检测单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogen,LM)的三种特异性毒力基因iap、hly、Inl,相应扩增片段分别为457 bp、745 bp、562 bp。引物特异性和菌株特异性试验均表明3对引物具有很高的特异性。在对食品中LM进行检测时,整个检测过程在16 h内,检测灵敏度达到2 cfu·g-1样品,检测阳性结果与GB 4789.30-2010方法的完全一致。我们的试验结果表明建立的多重PCR是LM检测的一种快速、灵敏和特异性强的检测方法。     

烟草瞬时表达人表皮细胞生长因子(hEGF)

构建人表皮细胞生长因子(hEGF)病毒表达载体,为实现h EGF在烟草中瞬时表达提供理论和实验依据。PCR扩增获得hEGF基因,将其连接到马铃薯病毒表达载体pGR107上,利用农杆菌介导法感染烟草叶片,对其进行转录水平和翻译水平检测。根据GFP的表达确定收获hEGF时间为病毒侵染叶片后第7天;RT-PCR检测的结果表明hEGF基因在转录水平有表达;Western blotting、ELISA和MTT结果表明感染烟草叶片中有hEGF蛋白表达,表达量为总可溶蛋白的0.0103%,且具有生物活性。     

洋葱(Allium cepa L.)RAPD-PCR反应体系及扩增程序的优化

为建立多态性高、稳定性好的洋葱RAPD-PCR反应体系,采用正交设计,研究了Taq酶、Mg2 、引物和dNTP 4种RAPD-PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,在此基础上对模板DNA用量、扩增程序中退火温度和反应循环次数进行了筛选。试验结果表明,洋葱20μl RAPD-PCR优化反应体系为1×Buffer、2.0 mmo1/L Mg2 、1.0 UTaqDNA聚合酶、200μmo1/L dNTP、0.6μmo1/L引物、2%甘油和15 ng DNA模板;PCR扩增程序为94℃预变性4 m in;94℃变性30 s,35℃退火40 s,72℃延长1.5 m in,45个循环;72℃保温延伸7 m in。     

极早熟洋葱连葱5号的选育

连葱5号是以港葱二号的株系为母本,汉城极早的株系为父本配组杂交后,经多代选择育成的,具有抗病、高产、早熟等优点.平均每667 m2产量4 000～5 500kg,适于长江流域种植.