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为建立一种诊断牛结核病的间接ELISA方法,以牛分枝杆菌Rv3403c、CFP10和ESAT6蛋白为靶标抗原,通过酶切连接和重叠延伸PCR方法,将3个抗原基因串联在pET-28a载体上,基因之间用Linker序列连接,构建出pET-28a-Rv3403c-CFP10-ESAT6并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并分析其反应原性。以纯化后的融合蛋白作为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示:通过SDS-PAGE和Western blot鉴定分析,成功表达并纯化出包涵体蛋白Rv3403c-CFP10-ESAT6,目的蛋白具有良好的反应原性;以融合蛋白为包被抗原建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,与其他牛病原体阳性血清不发生交叉反应。临床结果显示,本方法与商品化试剂盒阳性符合率为66.7%,阴性符合率99.3%,总符合率为99.3%。研究表明,成功串联表达了具有良好反应原性的融合蛋白Rv3403c-CFP10-ESAT6,并以此为包被抗原建立了一种牛分枝杆菌间接ELISA抗体检测方法,为检测和净化牛结核病提供了诊断工具。 相似文献
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奶牛乳房炎的诊治 总被引:1,自引:0,他引:1
薛焕彩 《动物科学与动物医学》2004,21(9):60-60
乳房炎是奶牛极易发生的一种乳腺疾病,常发生于泌乳期,对奶牛泌乳影响很大。如果不能及时发现治疗,将会影响奶牛的正常产奶,降低经济效益。笔者近几年多次诊治乳房炎病例,治愈率98%,痊愈后,产奶量恢复。 相似文献
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1992年8月江苏省某农场从上海引进罗曼父母代种雏鸡,突然大批死亡,死亡率达们%,病鸡主要表现急性下们,排出红色糊状稀粪,经现场调查、尸体刻检、实验室检验后,诊断为急性雏鸡白痢。16床检查1.l发病情况:1992年8月用日江苏省某鸡场从上海引进罗曼父母代种鸡5650只,雏鸡出亮时曾注射马立克二价苗,下午装车经12小时长途运输于22日凌晨到场,途中死亡ic只,22日早晨6:co查看发现死亡181只,以后陆续死亡,直至25日死亡2318只,死亡率达41.03%。1.2临床表现:雏鸡精神美顿、俄伏、闭眼缩头、翅下垂;刀死鸡呈张口呼吸,排出白色稀… 相似文献
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