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针对小反刍兽疫病毒核蛋白制备特异性的单克隆抗体,并对其进行生物学特性鉴定和初步应用。以纯化的Bacmid-PPRV-N重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的致敏脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG作用下融合,获得单克隆抗体,并通过染色体技术等方法研究其生物学特性,将其作为竞争单抗,Bacmid-PPRV-N重组蛋白作为检测抗原建立竞争ELISA检测方法。结果表明:经克隆和间接ELISA筛选,获得了2株能稳定分泌抗小反刍兽疫病毒N蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5B11和3H10-3B8。生物学特性鉴定试验表明:5B11和3H10-3B8抗体类型和亚类均为IgG2b;5B11单抗腹水的效价达1∶819 200,3H10-3B8达1∶12 800;血清学试验证明2株单抗均能与Bacmid-PPRV-N重组蛋白抗原结合,具有高度的特异性;相加ELISA试验结果显示,5B11和3H10-3B8 2株单克隆抗体分别识别N蛋白上不同的抗原位点;2株杂交瘤细胞的染色体均为99~104。应用建立的c-ELISA检测方法对222份血清样品进行PPRV抗体的检测,与参考试剂盒比较得到98.20%的符合率。本研究获得了2株能稳定分泌抗PPRV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以单抗5B11作为竞争抗体建立了PPRV的c-ELISA检测方法。 相似文献
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竞争酶联免疫吸附试验检测蓝舌病抗体的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用已研制的BTV-11型VP7单克隆抗体建立了竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)检测蓝舌病抗体的方法,并与琼脂免疫扩散试验(AGID)进行了检测比较,C-ELISA特异性强,不与相关环状病毒发生交叉反应,敏感性比AGID高。用研究制备的C-ELISA诊断试剂盒和美国、澳大利亚制备的诊断试剂盒对1377份临床样品的检测,以及对实验动物人工感染后抗体动脉检测。三种诊断试剂盒检测结果一致,且重复性好。本研究建立的蓝舌病C-ELISA是一种特异性强、敏感性高的蓝舌病抗体检测方法。 相似文献
45.
羊痘病毒 总被引:6,自引:0,他引:6
羊痘病毒能引起山羊痘、绵羊痘和牛的结节性疹块病.作者着重综述山羊痘和绵羊痘.羊痘病毒的基因组较大,山羊痘病毒和绵羊痘病毒的基因组非常相似,但自然条件下一般不会发生交叉感染.临床症状主要以发热和全身性丘疹或结节为特征,结合其临床症状实验室用透射电子显微镜检测病毒粒子的典型形态即可做出快速诊断.病毒培养和分离虽有较高的特异性,但耗时长;因羊痘病毒和副痘病毒有相似的血清型,一些血清学的诊断方法如琼脂扩散试验(AGID)、间接免疫荧光试验、检测抗体的ELISA等,因会出现抗体交叉反应而无法区分这2种病毒的感染;又因羊痘感染后主要引起细胞介导免疫,动物接触病原后仅产生低水平的中和抗体,故而病毒中和试验敏感性也不高.近年来,用于ELISA检测抗原的方法已经建立,具有较高的特异性;Western印迹试验利用羊痘病毒的P32抗原与待检血清反应,具有较好的敏感性和特异性,但价格昂贵、操作难.PCR可用来检查活体或组织培养品中羊痘病毒基因组;在此基础上发展了多重PCR技术,不但敏感性和特异性更强,且大量节省了时间和精力.治疗羊痘病毒无特效药,做好疫苗接种等防制措施很关键;目前采用活疫苗和灭活疫苗来控制本病,所有被鉴定的羊痘病毒毒株都有一个相同的主要中和位点,可以交叉保护.灭活苗的免疫保护期短.以羊痘病毒基因组作为其他反刍动物病原基因的载体,生产新一代羊痘病毒基因工程疫苗,具很大潜力. 相似文献
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SW2—1 1 0 1少油断路器在新安装投运前或大修后 ,均须对其进行调试。本人在长期工作中 ,针对SW2— 1 1 0 1少油断路器 (配CY5液压机构 )的调试 ,总结出一套原则、步骤和方法 ,即标题所提的“一原九步法”。“一原”指在调试工作中应遵循“先本体 ,后机构 ,先下面 ,后上面”工作原则。“九步法”即按此工作原则 ,对SW2—1 1 0 1少油断路器进行调试的九个步骤和方法。下面就按照“一原” ,对SW2— 1 1 0 1少油断路器进行“九步法”的调试 :第一步 ,工作缸活塞杆调整。通过改变工作缸缸帽位置使工作缸活塞杆行程为 1 3 2±1mm。第… 相似文献
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猴嗜T淋巴白血病病毒研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
猴嗜T淋巴白血病病毒(simian T-cell lymphotropic virus,STLV)是非特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一,是非人灵长类动物的一种重要的逆转录病毒,其潜伏期较长,非人灵长类动物感染了这一病毒在很长时间内无明显临床症状。目前,STLV已经遍布全球的非人灵长类,并可分为3种类型。研究证明STLV与非人灵长类动物的T淋巴白血病和淋巴肿瘤有关,其主要传播方式是通过血液传播。作者主要介绍了STLV的病毒学特点、流行及检测方法等的研究进展。 相似文献
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