丛枝菌根真菌、根瘤菌和解磷细菌之间相互作用的研究进展

在生物圈中,合作是普遍存在的,对于不同物种之间合作的研究,人们也做出了许多努力。研究发现,丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)、根瘤菌和解磷细菌对植物和土壤发挥着积极的作用。本文主要研究了AMF、根瘤菌和解磷细菌之间的合作共生关系及其相互作用,并归纳了接种AMF、解磷细菌和根瘤菌对植物生长、土壤修复和微生物生长的影响。总结了该三种微生物双接种的优势,进一步分析了AMF、解磷细菌和根瘤菌三者之间的相互作用,以及接种后对植物生长和周围土壤状况的影响。最后,提出了对AMF、解磷细菌和根瘤菌之间相互作用的主要研究方向。     

单倍体酿酒酵母的丙酮酸脱羧酶基因(pdc1)的敲除与鉴定

为了抑制单倍体酿酒酵母H14的副产物乙醇的合成,使得2,3-丁二醇产量的提升。利用基因工程手段构建载体pWCL-pdc1,获得两端含40 bp pdc1的同源重组片段-loxP-kanMX-loxP。利用Cre/loxP技术获得pdc1缺失菌株S. cerevisiae H14-01 (△pdc1)。并以野生型菌株S. cerevisiae H14为对照,进行摇瓶发酵试验。S. cerevisiae H14-01长势明显略低于原始菌株。在整个发酵期间,2,3-丁二醇的最高产量和转化率分别为0.373±0.016 g/L和0.005 g/g,分别较原始菌株提高了37.30%和4.66%,但原始菌株没有检测到乙偶姻和2,3-BD生成。另外S. cerevisiae H14-01的乙醇转化率降低了33.24%,但甘油产量提高了15.76%。说明了碳流流向乙醇被阻断之后,会增加2,3-丁二醇的产量,同时会使此部分碳流流向甘油。因此,并为进一步获得高产2,3-丁二醇的工程微生物群体奠定了基础。     

含有不同启动子、WPRE以及ITRs对重组杆状病毒表达新城疫F蛋白的影响

为了提高基因工程疫苗对新城疫病毒F蛋白的表达能力,从而为研制高效基因工程疫苗奠定了基础。利用Western blot技术检测含有不同启动子与表达元件的重组杆状病毒,在中国仓鼠卵巢细胞中其F蛋白的表达量的差异。Western blot结果显示,含有CMV立即早期增强子区与鸡肌动蛋白启动子区的复合启动子的质粒表达F蛋白量较含人巨细胞病毒立即早期启动子(CMV)的质粒提高了24.52%~231.18%,含有土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)能够提高F蛋白表达量2.9~8.6倍,而腺伴随病毒末端反向重复序列(ITRs)对质粒F蛋白表达量提高1.95%~9.27%。CBA启动子的启动能力远高于CMV的启动能力,调控元件WPRE能够显著提高F蛋白的表达量,而ITRs元件对于F蛋白的表达量未产生显著提高。     

控制pH值和溶解氧对地衣芽孢杆菌HDYM-04分批发酵产β-甘露聚糖酶的影响

为了探究地衣芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的能力,探究在发酵过程中pH值和溶氧水平对产β-甘露聚糖酶的影响。以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) HDYM-04为试验菌株,通过3,5-二硝基水杨酸比色法（DNS法）测定酶活力。结果表明,控制pH值至7.0直至发酵结束,在发酵的初始阶段(12~20 h)效果明显,酶活力水平均处于3200 U/mL以上,同时菌体密度达到5.5以上。其次,控制溶氧在25%左右时,保持菌体的生长状态,酶活力高峰持续时间较长（6~20 h保持在3000 U/mL左右）。因此控制pH值7.0,溶氧在25%左右时,在发酵的初始阶段,有良好的产酶能力。     

黑龙江省盐碱湖泊中微藻的分布及理化因素对优势藻种生物量的影响

旨在分析黑龙江省盐碱湖泊中微藻的分布及理化因素对优势藻种生物量的影响,本研究以黑龙江省大庆、肇东和扎龙盐碱地区湖泊作为研究对象,从中共分离筛选得到7株藻种,采用PlackettBurman试验设计筛选出显著影响因子,利用响应面设计对重要影响因素进行优化。结果表明,肇东盐碱湖泊分离筛选出的淡水小球藻(Chorella sorokiniana)HDA04的生物量和含油量均达到最高。藻种的生物量与环境因子有一定的相关性。在一定条件下,pH值和盐度越高,C.sorokiniana HDA04的生物量越高。当葡萄糖21.46 g/L、FeC_6H_5O_7·5H_2O 12 mg/L、K_2HPO_4·3H_2O 120 mg/L、MgSO_4·7H_2O 75 mg/L、pH 8.89、发酵温度32.91℃、转速为120 r/min时,以20%的接种量接种于100 m L的BG11培养基中,C.sorokiniana HDA04生物量达7.855±0.08 g/L,是优化前的1.99倍,生物量水平提高了98.9%。研究结果明确了理化因素对C.sorokiniana HDA04生长速率的影响,为微藻的进一步研究奠定基础。     

放线菌4-1的鉴定及其发酵液抑菌作用和稳定性探究

旨在挖掘盐碱地菌种资源并对其抑菌功能进行检测。以自行分离的放线菌4-1为候选菌株,利用形态学、生理生化以及分子生物学手段对其种属地位进行综合鉴定;采用琼脂扩散法和菌丝生长速率抑制法对其发酵液抑菌活性和稳定性进行评价。结果表明,菌株4-1与紫赤链霉菌(Streptomyces puniceus)最为相似,同源性高达99.93%,建立的系统发育树中二者亲缘关系最为相近;菌株4-1发酵液的抑菌谱比较广泛,对病原性细菌（6株）和病原性真菌（5株）都具有一定的抑制效果;酸碱、热、紫外线对发酵液稳定性影响较小,但当温度高于90℃或p H <4时,发酵液抑菌活性下降。该菌种资源的获得及功能评价,为进一步扩大根际促生细菌种类及应用奠定了菌种基础。     

黑龙江省高寒地区微藻的分离鉴定以及能源藻株的筛选

为了获得油脂高产的优良藻株,探究不同藻株的生长情况及产油情况。本研究以黑龙江省大庆地区湖泊作为研究对象采集水样,共分离筛选获得8株藻株,通过形态学与分子生物学手段对藻株进行种属鉴定;同时利用RDA分析藻株种类与采样湖泊理化因素之间的关系;对藻株的生长情况、脂质合成以及副产物含量进行了研究。结果表明HDL01、HDL04、HDL05和HDL07的生物量与某些环境因子之间呈正相关。单针藻(Monoraphidium convolutum) HDL08的生物量增长率和脂质增长率仅次于HDL01,为0.077±0.006 g/(L·d)和5.994±0.003 mg/(L·d)。结合微藻的脂质组成、副产物含量分析,发现HDL08有作为生产生物柴油供试藻株的潜力,这对丰富中国藻种资源和利用微藻生产生物柴油提供一定的支撑。     

外源添加乙偶姻对酿酒酵母W5/W141产2,3-丁二醇的影响

本研究旨在获得一株性能良好的2,3-丁二醇(2,3-BD)生产菌株。向酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W5/W141两株产2,3-BD菌株中添加不同浓度乙偶姻,并测定2,3-BD、乙醇和甘油产量随发酵时间的变化情况。S. cerevisiae W5最适乙偶姻添加浓度为12 g/L,且2,3-BD的产量在72 h达到最大,产量为2.54±0.03 g/L,甘油和乙醇转化率分别较未添加时下降了17.6%和23.6%。S. cerevisiae W141最适乙偶姻添加浓度为10 g/L,且2,3-BD的产量在72 h达到最大,产量为1.71±0.02 g/L,甘油和乙醇转化率分别较未添加时下降了57.1%和16.7%。通过对比,本课题最终选用S. cerevisiae W5作为最适菌株,为微生物发酵法生产2,3-BD提供新的资源。     

施磷水平对不同基因型大豆叶片及子粒可溶性蛋白含量的影响

磷以多种方式参与植物体内各种生物化学过程,对促进植物的生长发育和新陈代谢起着重要的作用[1]。可溶性蛋白质是植物所有蛋白质组分中最活跃的一部分,包括各种酶源、酶分子和代谢调节物[2]。磷是作物体内氮素代谢过程中的组成成分之一,与蛋白质的代谢关系极为密切[3-6]。因此,通过测定大豆叶片和子粒可溶性蛋白含量可了解多少施磷量更有利于促进大豆氮代谢。关于大豆可溶性蛋白含量与氮素关系的研究较多[7-11],而有关磷的研究报道较少。为此,本研究探讨不同施磷水平对高蛋白、高油和中间型3种基因型大豆生育期内叶片和子粒可溶性蛋白含量的…     

杆状病毒——高效蛋白表达载体

杆状病毒(Baculovirus)是昆虫专一性的病原病毒,是目前为止发现最早、研究最多且实用意义很大的昆虫病毒.杆状病毒表达载体系统(Baculovirus expression vector system,BEVS)是一个以杆状病毒为外源基因载体,昆虫和昆虫细胞为受体的表达系统.