细菌QJ2对对虾病原性哈维氏弧菌的拮抗作用

对气味黄杆菌(Flavobacteria ordoratum)QJ2及其去细胞上清液(CFS)对对虾病原性哈维氏弧菌(Virio harveyi)Z3G2、E022的拮抗作用进行了研究.QJ2的CFS对病原菌表现显著的拮抗性能,在6h内使数量为105 ～106cfu@mL-1的病原菌Z3G2、E022均降为0.经热、酸碱、蛋白酶处理的CFS,抑菌活性均有不同程度下降,结果为经60℃处理60min的CFS,经6h使Z3G2细菌数降为0,经15min使E022数量降为最低,为初始菌数的 63.0%经100℃处理10min,CFS使Z3G2和E022数量分别在1h和15min降为最低,各为初始菌数的23.7%和 72.1%;经pH4作用30min,CFS使Z3G2和E022数量分别在15min和1h降为最低,各为初始菌数的88.3%和 15.9%,而经pH12处理30min后,CFS没有使病原菌数下降,但使病原菌以比对照组细菌低的速率缓慢上升; 经蛋白酶K于37℃作用60min后,CFS在15min时使Z3G2和E022数量降为最低,各为初始菌数的15.0%和 66.1%.在人工水体中,QJ2活菌对病原菌也具有显著的拮抗性能,在24h内使Z3G2、E022数量下降到最低值,各下降了1.6、2.4 Log1o数量级.结果表明QJ2产生的抗性物质为细菌素,对病原性哈维氏弧菌具有良好的拮抗作用.     

3株O3血清型鳗弧菌灭活疫苗的免疫原性和免疫保护效果

鳗弧菌(Vibrio anguillarum)O3血清型菌株是感染鱼类的重要病原菌,本文研究了3株O3血清型鳗弧菌(SMP1、SMP3和SMP4)灭活疫苗的免疫原性和免疫保护。首先在牙鲆(Paralichthys olivaceus)体内对3株鳗弧菌进行复壮;检测复壮后的菌株毒力,检测的3株鳗弧菌对蓝蔓龙(Trichogaser trichopterus)的半数致死量(LD50)分别为105.1 CFU/ml(SMP1)、104.7 CFU/ml(SMP3)和105.4 CFU/ml(SMP4);制备了3株菌的甲醛灭活疫苗,注射免疫牙鲆,免疫后第7天可检测到牙鲆的血清特异性抗体产生,免疫后第28天的血清特异性抗体效价为1:1280(SMP1)、1:640(SMP3)和1:905(SMP4),提供的免疫保护率(Relative percent survival rate,RPS)为94.4%(SMP1)、100%(SMP3)和73.7%(SMP4)。研究表明,3株致病性O3血清型鳗弧菌菌株具有良好的免疫原性,其中SMP3为最适疫苗候选株。本研究为鳗弧菌O3血清型疫苗的开发应用奠定了基础。     

条斑紫菜(Pyropia yezoensis)绿斑病病原菌的分离鉴定

绿斑病(Green spot disease)是一种常见的海区栽培条斑紫菜(Pyropia yezoensis)病害,在整个紫菜栽培期间都可能发生,以每年11~12月份最为严重,主要出现在幼叶期和成叶期。首先,在叶状体上出现红色或淡红色小斑,而后逐渐转变为绿色,病斑继续扩展,在叶状体表面形成若干孔洞,后期几乎整个藻体变绿。本研究对日照地区患绿斑病的条斑紫菜进行病原菌分离纯化,得到5株优势菌(编号为Y1~Y5),人工回感实验结果显示,Y1可以引起健康条斑紫菜发生绿斑病。对Y1进行了生理生化检测、16S rRNA、dnaA和dnaN基因序列分析,确定病原菌为海洋假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)。对绿斑病的发病进程进行了观察,并检测了培养温度、海水比重和养殖密度等环境因子对绿斑病发生的影响,结果显示,高温和高密度养殖会加速绿斑病病情的发展,海水比重为1.022时,绿斑病发病较严重。本研究确定了一株引起条斑紫菜绿斑病的病原菌,并分析了部分理化因子对感染的影响,为条斑紫菜绿斑病的防控提供了基础数据。     

幼鸡无致病性大肠杆菌活菌的实验接种

BT—7菌株是从肉鸡分离到无致病性有菌毛的大肠杆菌,试用于预防鸡大肠杆菌感染的研究。实验室条件下,对不同日龄(1日、7日、14日、21日)的鸡对疫苗保护力的影响、免疫保护期、强毒攻击和接种途径对疫苗保护力的影响进行实验。结果表明:在14日龄或21日龄进行免疫比1日或7日龄进行免疫能更好地抵抗强毒的攻击;21日龄进行免疫的鸡一星期后用致病性大肠杆菌菌株O_1:K_1、O_2:K_2或O_(78):K_(80)攻毒,二星期内表现良好的保护。肌肉、喷雾、饮水、三种接种途径对     

海洋细菌来源低温褐藻胶裂解酶的分泌表达和酶学性质研究

为了筛选稳定性较好的低温褐藻胶裂解酶,本研究进行了海洋细菌分离鉴定、酶的编码基因克隆与分析、酶分泌表达与纯化、不同因素对酶活力和稳定性的影响以及酶解产物分析实验。结果显示,用以褐藻胶为唯一碳源的平板,筛选出一株能分泌低温褐藻胶裂解酶的海洋细菌SJ-H-12,基于16S rDNA序列构建进化树,该菌株鉴定为Yangia sp. SJ-H-12。进而克隆酶的编码基因Alyya,ALYYA属于PL5家族褐藻胶裂解酶。将基因在食品级宿主解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中进行分泌表达,重组ALYYA的活力达到34.2 U/mL,分子量约为39.0 kDa,具有较强的PolyM偏好性。ALYYA在25℃~35℃时表现出80%以上的活力,且在30℃时表现出最高活力;在pH为5.0~10.0的范围内稳定性较好,孵育后剩余超过60%的活力;0~2.0 mol/L的NaCl能明显激活ALYYA的活力。ALYYA降解褐藻胶的产物主要是二糖,另有少部分单糖和三糖,该酶是一种内切褐藻胶裂解酶。综上所述,本研究筛选到一株产低温褐藻胶裂解酶细菌,所产ALYYA是典型的低温褐藻胶裂解酶,具有优良的酶活力和稳定性。本研究为低温褐藻胶裂解酶的筛选和开发利用提供了参考数据。     

禽巴氏杆菌病B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗保存期试验

禽巴氏杆菌病 B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗在4～8℃温度环境下保存一年的10批苗,菌存率为76.7～93.3%,平均菌存率为86.4%;按瓶签头份稀释后免疫鸡,10批苗的保护率为75%～100%,总保护率为87.5%(37/40).本文就巴氏杆菌病 B_(26)-T_(1200)弱毒冻干苗在4℃～8℃的保存性能及免疫效力进行了试验,现将结果报告如下。     

禽巴氏杆菌病B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗对鸡的免疫产生期和免疫期试验

以禽巴氏杆菌病 B_(26)-T_(1200)弱毒疫苗免疫后8小时即能产生免疫力(1/5鸡得到保护);2～3天有3/5鸡获得保护;4～5天后能产生坚强免疫力(4/5～5/5保护).免疫后2、3、4和5个月的总保护率为83.3%(80/96);免疫后5个月,6批苗的平均保护率为75%(18/24).     

紫菜腐霉拮抗菌的筛选和鉴定

生物防治广泛用于农作物的病害防治,该方法在藻类病害防控方面尚未有相关的报道。腐霉(Pythium sp.)是引起紫菜(Neopyropia)赤腐病(red rot disease)的主要病原,本研究的目的是筛选和鉴定对紫菜腐霉有拮抗能力的细菌。从养殖藻类及其养殖环境中分离鉴定了385株细菌,通过平板对峙法筛选到9株对腐霉有拮抗作用的细菌,进一步通过含毒介质法筛选到3株胞外产物对腐霉具有抑制活性的细菌(P3、P6和P19)。3株拮抗菌对8株腐霉均有拮抗活性,对腐霉生长的抑制率分别为52.09%~97.95% (P3)、26.81%~78.04% (P6)、10.47%~41.91% (P19)。通过16S rRNA鉴定和多位点序列进化分析(16S rRNA-dnaA-dnaN-recA),将P3和P6鉴定为杀鱼假交替单胞菌(Pseudoalteromonas piscicida),P19鉴定为解肽假交替单胞菌(Pseudoalteromonas peptidolytica)。本研究筛选得到的拮抗菌为下一步建立紫菜赤腐病的生物防治方法奠定了基础。     

一起育苗场海带幼苗绿烂的病因分析

绿烂病是海带育苗期间常见的一种病害。2018年在山东一海带育苗场的调查中发现海带苗存在大面积绿烂现象。为了探析病害发生的原因,进行了育苗场水质分析、养殖模拟实验、褐藻酸降解菌分离鉴定和细菌回接感染,从环境因子和微生物相互作用角度进行了分析。水质分析结果显示,海带育苗池水的氮营养盐含量(30～35 mg·L^-1)比育苗规程高近10倍左右,磷营养盐含量(2.1～2.2 mg·L^-1)比海带育苗规程要求高5～6倍;养殖模拟实验显示,在10℃、光照2 000 ～ 4 000 lx、与育苗场近似的高营养盐浓度条件下,养殖的海带苗发生绿烂;从绿烂海带苗分离鉴定的附生优势菌属为Yangia和Glaciecola;回接感染实验结果显示,在氮磷浓度偏高情况下,细菌Glaciecola.DH-2-3可以引起海带苗发生绿烂,Yangia.SJ-H-12未引起海带苗发生绿烂。根据这些结果,判断此次海带幼苗病烂是由高营养盐引起。     

雏鸡暴发绿脓杆菌感染的诊断

绿脓杆菌广泛存在于自然界的土壤、水源和空气之中,是一种条件性的病原菌。我们曾在南宁郊区某鸡场观察到一起罗曼雏鸡暴发绿脓杆菌感染,导致大批雏鸡死亡的病例,现报告如下。