新发现的两个犬黑素皮质素受体-4缺失突变的探讨

目的：克隆犬黑素皮质素受体-4（Melanocortin-4 receptor，MC4R）基因片段，寻找其多态性位点。方法：根据犬、人和鼠等的MC4R基因序列，设计MC4R基因特异PCR引物。提取：本地犬基因组DNA，PCR扩增MC4R基因部分片段，回收纯化，连接载体，转化入感受态细胞，扩大培养。质粒酶切鉴定后，送测序公司测序。结果：本地犬MC4R基因片段有2处A碱基缺失突变。结论：本地犬中存在MC4R基因的多态性。本实验的MC4R两处缺失突变可能影响转录而引起：MC4R基因功能的改变。     

布鲁氏杆菌各类检测方法的比较

布鲁氏菌病是重要的人畜共患病,国内外对其病原菌—布鲁氏杆菌的检测已有很多种方法,且各具优缺点。主要对病原学诊断、各类血清学技术、PCR技术及核酸探针技术进行了综述,并且对其内部及整体间作一比较及评价,展望了快速、准确检测布鲁氏杆菌的前景。     

连城白鸭外周血淋巴细胞染色体核型研究

本试验通过对连城白鸭外周血淋巴细胞培养、秋水仙素处理后制备染色体标本,并进行染色体核型分析。结果表明,连城白鸭体细胞数目为2n=78±,1号常染色体为亚中央着丝粒染色体;2号常染色体为中央着丝粒染色体;3～9号常染色体及W性染色体为端着丝粒染色体;Z性染色体为亚端着丝粒染色体。本文通过对外周血淋巴细胞染色体核型分析,为进一步研究连城白鸭品种选育奠定基础。     

猪新基因CFL2真核表达载体的构建及在C2C12细胞中的瞬时表达

从猪的股二头肌中提取总RNA,利用RT-PCR技术从猪骨骼肌中获得CFL2基因的编码区序列,T-A克隆至PMD-18T载体,经HindⅢ和XhoⅠ酶切后定向克隆至真核表达载体pCDNA3.1(+)中。获得的重组质粒pCDNA3.1(+)/CFL2用限制性内切酶酶切分析和DNA测序分析鉴定,并经脂质体瞬时转染C2C12细胞,最后利用PCR检测转基因细胞中CFL2基因的存在及其表达情况。结果显示:猪CFL2基因已克隆到真核表达载体pCDNA3.1(+)中,转染的C2C12细胞中检测到细胞内较高量CFL2的表达。pCDNA3.1(+)/CFL2真核表达载体的成功构建,为深入研究CFL2基因在猪肌肉细胞中的功能奠定基础,为猪肉质品质的改良提供了新的思路。     

大骨鸡和AA+肉鸡生长性能、屠宰性状及血清生化指标差异性的研究

为研究大骨鸡和AA+肉鸡肉用性状及血清生化指标的差异,选择健康的0～24周龄(w)大骨鸡公鸡和0～7 w AA+公鸡各324只,每笼6只进行舍饲笼养。随机选取1日龄(d)、1～7 w的大骨鸡和AA+肉鸡各5只,8～24 w偶数周龄的大骨鸡5只,分别测定生长性能、屠宰性状和血清生化指标。结果显示：0～7 w的AA+肉鸡体重和平均日采食量(ADFI)极显著高于大骨鸡(P<0.01),大骨鸡和AA+肉鸡的体重、ADFI均与周龄呈极显著强相关(P<0.01);上市日龄大骨鸡(24 w)与AA+肉鸡(7 w)的屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率,以及肌胃、头、心、肝、脾、胸腺和法氏囊的比率均差异极显著(P<0.01),半净膛率、腺胃比率和直肠比率差异显著(P<0.05);大骨鸡胸肌和腿肌的剪切力与屠宰率、全净膛率、半净膛率间呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)正相关,而AA+肉鸡没有该特点;大骨鸡血清中无机磷和钙含量极显著低于AA+肉鸡(P<0.01)。20～22 w大骨鸡的生长速度和ADFI达到最高峰,屠宰性状最佳,提示大骨鸡上市日龄可以较常规...     

犬Elovl2基因片段的克隆和测序分析

利用比较基因组的方法获得犬elongation of very long chain fatty acids(FEN1/Elo2,SUR4/Elo3,yeast)-like 2基因(Elovl2)序列,为后续研究奠定基础.根据人ELOVL2和小鼠的Elovl2基因序列设计PCR引物,对比格犬和本地犬的DNA进行PCR扩增,回收纯化扩增片段,克隆、测序.对本地犬和比格犬的三次克隆测序分别得到长为672bp、671bp和675bp的基因片段,三个基因片段有11个碱基差异.测序结果表明,犬的Elovl2基因与人的ELOVL2基因和小鼠的Elovl2基因无显著相似性.扩增得到的基因片段还需进一步分析.     

辽宁地区中华蜜蜂囊状幼虫病的RT-PCR检测

蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病。通过RT-PCR方法,我们在辽宁地区检测出了该病,并且辽宁地区的蜂囊状幼虫病病毒与早期我国在广东地区检测到的中蜂囊状幼虫病病毒基因序列有所不同,推测中蜂囊状幼虫病病毒可能存在地区的差异性。     

猪calsarcin-2基因cDNA的克隆与测序

Z线是多种蛋白质通过蛋白-蛋白的相互作用，构成具有特定结构的蛋白复合体。在肌细胞发育与分化过程中，Z线的结构是不断发生变化的，并且Z线能够调节骨骼肌与心肌细胞的收缩。目前，利用蛋白质一蛋白质相互作用技术已将一些蛋白定位于Z线，根据它们在Z线的位置可分为两类：一类是蛋白的某一部分肽段位于Z线，     

胚胎冷冻技术及其在转基因小鼠中的应用

随着生物工程技术的发展．出现了许多生物工程小鼠品系．促使胚胎冷冻技术得到了广泛应用。胚胎冷冻技术不仅为转基因动物提供可用胚胎．还使胚胎移植不受时间、地域限制。简化引种过程．防止疾病传播,为建立优良动物的胚胎库提供了条件。综述了几种常用的胚胎冷冻方法及其在转基因小鼠中的应用研究．指出了胚胎冷冻方法存在的主要问题．并展望了其发展前景。     

SPF莱航鸡种群的微卫星多态性分析

【研究目的】利用5个微卫星位点对两个SPF莱航鸡封闭群进行了遗传检测,探讨群体内的遗传多态性,以期为实验用鸡遗传质量监测提供理论依据。【方法】PCR扩增后用ABI-3100Avant全自动基因分析仪进行电泳检测,用Genemapper3.1软件进行片段大小分析,收集电泳结果并进行基因分型。【结果】5个微卫星标记在A、B两个鸡群中共检测到20个等位基因,平均为4个;两个鸡群的平均杂合度为0.6211,平均多态信息含量为0.6663,表明所选标记在SPF莱航鸡群中有较高的多态性;adl176位点的180峰仅出现在A群中,188、191两峰在两个群体中的频率相差极大,可作为品系鉴定的理想引物。【结论】大部分微卫星具有多态性,若进行大范围筛查,必能找到一些特异位点为遗传监测所用。